ról agus feidhmíocht m-mlv reverse transcriptase i bitheolaíocht mhóilíneach
Tá an-chuid de na héifeachtaí a bhaineann le héifeachtaí bithcheimiceacha ag an réimse a bhfuil an-dinimiciúlacht aige i bitheolaíocht mhóilíneach.m-mlv reverse transcriptase(m-mlv rt), atá ar cheann de na hionsamhlacha sin, tá aird mhór air le déanaí ós rud é go bhfuil sé in ann CDNA a shintéisiú ó thamplaí RNA. Tá úsáid mhór ag an ensím seo a fhaightear ó víreas leucéimí moloney murine (m-mlv), i
struchtúr agus feidhm m-mlv reverse transcriptase
Feidhmíonn m-mlv reverse transcriptase mar pholíméaras DNA atá ag brath ar DNA le gníomhaíochtaí dna-políméasa agus ribonuclease h (rnase h) atá ag brath ar rna araon. aithníonn sé sampléid rna agus déanann sé sintéis de shrutha cdna ag baint úsáide as
feidhmchlár m-mlv reverse transcriptase
Síntiús CDNA: is nósanna coitianta iad modhanna trasscríbhneoireachta inverse a úsáideann m-mlv rt chun ábhar RNA a athrú go CDNA. I gcás staidéir downstream lena n-áirítear PCR cainníochtúil, anailís ar léiriú géine nó leabharlann CDNA a thógáil, tá an teicníc seo do
clóniú géine: trí m-mlv rt a úsáid, is féidir le taighdeoirí géiní sonracha a chlóniú óna samplaí RNA. Dá bhrí sin, is féidir géiní ar leith a eisiamh agus a mhéadú ionas gur féidir anailís bhreise a dhéanamh orthu i dtéarmaí feidhme.
anailís léiriúcháin: is céim riachtanach i dteicnící aon anailís léiriúcháin mar shampla anailís qpcr nó anailís micrea-airí a bhaineann le CDNA a shintéisí a dhéanann an ensím trína ghníomhaíocht rnase h. Trí na bealaí seo, faigheann eolaithe deis a fháil amach conas a lé
Gnéamaíocht fheidhmiúil: i gnéamaíocht fheidhmiúil, úsáidtear m-mlv rt chun leabharlanna CDNA a ullmhú ó phobal casta rna. Scrúdaítear na leabharlanna seo ansin le haghaidh géiní a bhfuil feidhmeanna sonraithe nó feiniméitheacha acu agus mar sin léargas nua a nochtadh
buntáistí agus cúinsí
Tá roinnt buntáistí ag m-mlv reverse transcriptase mar éifeachtúlacht ard, sonracht agus athráitheacht. áfach, ba cheart a thabhairt faoi deara go n-oibríonn an einsím go maith faoi choinníollacha sonracha mar teocht is fearr, luachanna ph chomh maith le tiúchan salainn. uaireanta le linn shintéis CDNA bíonn dí
Mar fhocal scoir, is uirlis cabhrach í m-mlv reverse transcriptase i dtaighde bithcheimiceach moileicléach chun CDNA a shintéisí ó thamplaí rna le haghaidh feidhmchlár éagsúla. Tá cloning géine, anailís léiriúcháin agus staidéir feidhmiúla géineolaíochta