Pfu dna polymerase mar réabhlóid i bitheolaíocht mhóilíneach agus i bitheicneolaíocht

Tá réimse na bitheolaíochta mhóilíneach agus na bithteicneolaíochta ag forbairt go leanúnach, agus bhí ionsaí lárnach ag dul chun cinn an taighde agus an forbartha.Pfu DNA polymerase. an einsím seo a dhíorthaítear ó pyrococcus furiosus, baictéar hyperthermophilic, tá gnéithe uathúla aige a dhéanann é difriúil ó pholíméarasí DNA eile, rud a fhágann go bhfuil sé an-úsáideach i dteicnící móilíneacha éagsúla.

gnéithe de phfu dna polymerase:

Tá roinnt príomh-athrúchán ag Pfu DNA polymerase a rinne go n-úsáidtear go forleathan é i saotharlanna éagsúla bithcheimiceacha móilíneacha ar fud an domhain. Áirítear leo:

1. cumas léitheoireachta: is féidir le polymerases DNA a bhfuil gníomhaíocht exonuclease 3' go 5' de bhunaithe aige a monatóireacht a dhéanamh ar a gcuid oibre féin le haghaidh earráidí. Mar sin, le linn an chumhdú pcr, cuireann sé seo ar chumas nucleotides a ionchorpraíodh go

2.thermostability: mar a thagann sé ó chomhshaol hyperthermophile, tá cobhsaíocht iontach ard ag pólíméaras DNA ag teocht ard. Fágann sé gníomhach suas le 95°C (203°F) agus is gá é sin le haghaidh imoibrithe a éilíonn teocht ard mar mhéadaithe pcr

3.Fidelity: i gcomhar le cumas léitheoireachta le tearmachthostability, méadaíonn sé leibhéal fírinneachta pfu dna polymerase i gcomparáid le taq polymerase. Is é seo an rud is oiriúnaí do na hiarratais ina bhfuil cruinneas ríthábhachtach lena n-áirítear turgnaimh chló

iarratais ar phfu dna polymerase:

an uathúlacht a bhaineann le hairíonna mar seo i ndáil le pfu-dna-pholaiméaras, theorainn a úsáid leathan i modhanna éagsúla bithcheimiceacha móilíneacha mar a leanas:

1. méadú pcr: is é an pholíméaras pfu dna an einsím is fearr le méadú pcr toisc go bhfuil an-chreidmheas agus an cumas léitheoireachta aige, go háirithe nuair a bhíonn cruinneas an táirge méadaithe ríthábhachtach.

2.cloneáil agus mutagineas: is rogha iontach é an fhadhb íseal a bhaineann le póliméarase pfu DNA chun cloneáil a dhéanamh agus chun turgnaimh mutagineasaí a dhíreofar ar shuíomh a dhéanamh nuair is féidir le maitiú míchruinnithe torthaí a dhíchur.

3.Seiceanú DNA: ar an gcúis seo, is féidir póliméarase pfu DNA a úsáid i uirlisí seiceanála DNA ionas go léiríonn sonraí seiceáin an teimpléad bunaidh go cruinn.

Tá réabhlóid déanta ag póliméarase pfu dna lena airíonna eisceachtúla mar chumas léitheoireachta cruthúnas, teirmeastóireacht agus ardchreidmheas i ngnéithe éagsúla de bhitheolaíocht mhóilíneach agus bithteicneolaíocht. Míníonn sé seo cén fáth go bhfaigheann sé feidhmíocht i raon leathan ó