থার্মোলাবিল ইউরাসিল-ডিএনএ গ্লাইকোসিলাস (ইউএনজি) এনজাইম - পিসিআর এবং এনজিএসের নমুনা প্রস্তুতিতে ডিইউ অপসারণের জন্য অত্যন্ত নির্দিষ্ট, ডিএনএ মান নিয়ন্ত্রণ উন্নত করে

বর্ণনা

ইউরেসিল-ডিএনএ গ্লাইকোসিলেজ (UNG), থারমোল্যাবল হল একটি রিকম্বিনেন্ট প্রোটিন ই. কোলিতে, মেরিন ব্যাকটেরিয়াম থেকে। এই এনজাইম একক- এবং ডাবল-শ্রেণীর ডিএনএতে U-ডিএনএতে ইউরেসিল-গ্লাইকোসিডিক বন্ধন হাইড্রোলাইজ করে ইউরেসিল ছেদ করে এবং ডিএনএয় অভিসিক্ত সাইট তৈরি করে। এই এনজাইম আরএনএ এবং নেটিভ, ইউরেসিল-মুক্ত ডিএনএতে অক্রিয়। কারণ ইউরেসিল-ডিএনএ গ্লাইকোসিলেজ (UNG), থারমোল্যাবল কোনও মেটাল আয়নের প্রয়োজন নেই, এটি EDTA উপস্থিতিতে সম্পূর্ণ ক্রিয়াশীল।

ইউরাসিল-ডিএনএ গ্লাইকোসিলাস (ইউএনজি), থার্মোলাবিলকে পিসিআর ভার-কারি দূষণ দূর করতে dUTP এর সাথে ব্যবহার করা যেতে পারে যা পূর্ববর্তী ডিএনএ সংশ্লেষণের প্রতিক্রিয়া থেকে আসে। পিসিআর পণ্যকে বিভাজনযোগ্য করার জন্য, পিসিআর রেঅ্যাকশন মিশ্রণে ডিটিটিপিকে ডিইউটিপি দ্বারা প্রতিস্থাপন করতে হবে। পরবর্তী পিসিআর প্রতিক্রিয়া মিশ্রণগুলি ইউরাসিল-ডিএনএ গ্লাইকোসাইলেজ (ইউএনজি), থার্মোলাবিলের সাথে পিসিআরের আগে ইউরাসিল-ধারণকারী ডিএনএকে অবনমিত করতে প্রিট্রাক্ট করা উচিত। নেটিভ ডিএনএতে ইউরাসিল নেই, তাই এই পদ্ধতিতে নমুনাটি বিভাজন হয় না।

উৎস: রিকম্বিনেন্ট E. coli

আঞ্চুরেশন এবং আকার: 1U/μL

অ্যাপ্লিকেশন:

qPCR এবং ডিজিটাল PCR: পরবর্তী প্রতিক্রিয়াগুলিতে পুনরায় প্রসারিত হওয়া রোধ করতে পূর্ববর্তী PCR পণ্য থেকে ইউরাসিলকে বাদ দেওয়া, যা পরিমাপের সংবেদনশীলতা এবং স্বতন্ত্রতা বৃদ্ধি করে।

নেক্সট-জেনারেশন সিকোয়েন্সিং (NGS): NGS স্যাম্পল প্রস্তুতি ফ্লোয়ার একটি গুরুত্বপূর্ণ উপাদান, যা দূষিত DNA অণুগুলি থেকে ইউরেসিল ভিত্তিকে সরিয়ে ফেলে, ফলে সিকোয়েন্সিং সঠিকতা বাড়ায় এবং পটভূমি শব্দ কমে।

ফোরেনসিক বিশ্লেষণ: ফোরেনসিক স্যাম্পলে ট্রেস পরিমাণের DNA-কে আরও সঠিক এবং নির্ভরযোগ্যভাবে চিহ্নিত করতে সাহায্য করে ক্রস-দূষণকে কমিয়ে।

মেথালেশন নির্ণয়: বাইসালফাইট রূপান্তরণ পদ্ধতির সাথে একত্রে, UNG চিকিৎসা অমেথালেটেড সাইটোসিনের বিষয়টি ইউরেসিলে রূপান্তরিত করে সরিয়ে ফেলে, যা মেথালেশন বিশ্লেষণকে সহজ করে।

ইনহিবিটর সরানো: ইউরেসিল বিশিষ্ট ক্ষতিগ্রস্ত বা ক্ষয়প্রাপ্ত DNA-কে পাচন করে ডিএনএকে শোধিত করতে সাহায্য করে, ফলে লক্ষ্য ডিএনএ সিকোয়েন্সের শুদ্ধতা বাড়ে।

থার্মোল্যাবল ইউরেসিল-ডিএনএ গ্লাইকোসিলেজ এনজাইম মৌলিক জীববিজ্ঞানীদের এবং সংবেদনশীল নিউক্লিক এসিড ভিত্তিক পরীক্ষায় নিযুক্ত গবেষকদের জন্য একটি অপরিহার্য যন্ত্র, যা DNA স্যাম্পলের পূর্ণতা ওপর উত্তম নিয়ন্ত্রণ প্রদান করে এবং অভিমত বিঘ্নকারী অ্যার্টিফ্যাক্ট কমিয়ে দেয়।

ইউনিট সংজ্ঞা

একটি একক হলো উর্যাসিল-ডিএনএ গ্লাইকোসিলেজ (UNG) এর পরিমাণ, যা 37°C তাপমাত্রায় 60 মিনিটে 1μg শুদ্ধ একক-চালা উর্যাসিল-ধারণকারী ডিএনএ কে সম্পূর্ণভাবে ভেঙে দেয়।

স্টোরেজ বাফার

20mM ট্রিস-HCl (pH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 1mM DTT, 0.5%(v/v) টুইন-20, 0.5%(v/v) NP-40, 50%(v/v) গ্লাইসারল।

গুণত্ব নিয়ন্ত্রণ

পুরিফিকেশন >99% এসডি এস পেজ দ্বারা।

এনডোনিউক্লিয়েস, নিকেস, এক্সোনিউক্লিয়েস এবং আরএনএস এর কোনো দূষণ নেই।

তাপমাত্রা দ্বারা অক্রিয়।

50°C তাপমাত্রায় 2 মিনিট।

রিঅ্যাকশনের তাপমাত্রা।

20~37°C তাপমাত্রায় 10 মিনিট।

ব্যবহারের পরিমাণ।

প্রতি 50ul রিঅ্যাকশনে 0.1~1U UNG এনজাইম।

পরিবহন এবং সংরক্ষণ

-20°C তে রাখুন, গেল আইস সঙ্গে পাঠান।