রিবনুক্লিয়াস ইনহিবিটার, আরএনএএস ইনহিবিটার 40u

পুনরায় সংমিশ্রিত মানব প্লাসেন্টার রিবনুক্লিয়াস ইনহিবিটার, ৪০ ইউ/মিক্লি

উৎস

ই. কোলি স্ট্রেন যা মানব প্লেসেন্টার থেকে রিবনুক্লিয়াস ইনহিবিটার জিন বহন করে এমন একটি পুনরায় সংমিশ্রিত ক্লোন প্রকাশ করে।

ঘনত্ব

৪০ ইউ/মিলিটার।

ইউনিট সংজ্ঞা

এক ইউনিটকে রিকম্বিন্যান্ট রিবনুক্লিয়াস ইনহিবিটার হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয় যা রিবনুক্লিয়াস এ এর 5 এনজি কার্যকলাপকে 50% হ্রাস করতে প্রয়োজন।

সাইটিডিন ২৩-সাইক্লিকাল মনোফোসফেটের হাইড্রোলাইসিস রিবনুক্লিয়াস এ দ্বারা প্রতিরোধ করে কার্যকারিতা পরিমাপ করা হয়।

সঞ্চয়স্থান বাফার

20mm hepes-koh ((ph7.6), 50mm kcl, 8mm dtt, 50% ((v/v) গ্লিসারিন

সঞ্চয়

-২০°সি এ সংরক্ষণ করুন

গুণমান নিয়ন্ত্রণ

এন্ডোনুক্লিয়াস অনুপস্থিতি
১ এমকেজি ল্যাম্বডা ডিএনএ ৩৭ ডিগ্রি সেলসিয়াসে ১৬ ঘন্টা ধরে ২০০ ইউনিট রিবনুক্লিয়াস ইনহিবিটার দিয়ে ইনকিউবেট করা হয়।
ইনকিউবেশনের পর, ল্যাম্বডা ডিএনএকে ইথিডিয়াম ব্রোমাইড-বর্ণযুক্ত অ্যাগারোজ জেলের উপর অক্ষত হিসাবে দৃশ্যমান করে দেখা যায় যাতে দৃশ্যমান এন্ডোনুক্লিয়াসের অনুপস্থিতি নিশ্চিত করা যায়।

নিকেজ অনুপস্থিতি
১ মাইক্রোগ্রাম টাইপ আই সুপার-কোয়লড পিবিআর৩২২ রাইবোনুক্লিয়াজ ইনহিবিটর ২০০ ইউনিট দিয়ে ৩৭ ডিগ্রি সেলসিয়াসে ৪ ঘন্টা ইনকিউবেট করা হয়।
ইনকিউবেশনের পর, সুপার-রোলড ডিএনএটি ইথিডিয়াম ব্রোমাইড-বর্ণযুক্ত অ্যাগারোজ জেলের উপর দৃশ্যমানভাবে দেখা যায় যাতে দৃশ্যমান ক্লিপিং বা কাটা না হয়।

এক্সনুক্লিয়াসের অভাব
ল্যাম্বডা ডিএনএ/হিন্দিআইআই মার্কারের ১ মাইক্রোগ্রাম রিবনুক্লিয়াস ইনহিবিটর ২০০ ইউনিটের সাথে ৩৭ ডিগ্রি সেলসিয়াসে ১৬ ঘন্টা ইনকিউবেট করা হয়।
ইনকিউবেশনের পর, ল্যাম্বডা ডিএনএ/হিন্দিআইআই মার্কারগুলি ১% এগারোজ জেল দ্বারা পৃথক করা হয় এবং ইথিডিয়াম ব্রোমাইড দিয়ে রঙ করা হয়। মার্কারগুলি স্টিয়ারিং ছাড়াই অক্ষত ব্যান্ড হিসাবে থাকে।

আরএনএএস এর অনুপস্থিতি এবং লুকানো আরএনএএস
আরএনএজ কার্যকলাপের উপস্থিতি পরীক্ষা করার জন্য, আরএনএ এর 1 ইউজি 200 ইউনিট রিবনুক্লিয়াস ইনহিবিটার দিয়ে 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 4 ঘন্টা ইনকিউবেট করা হয়।
ইনকিউবেশনের পর, আরএনএকে ইথিডিয়াম ব্রোমাইড-বর্ণযুক্ত অ্যাগারোজ জেলের উপর অক্ষত ব্যান্ড হিসাবে দৃশ্যমান করা হয় যাতে দৃশ্যমান আরএনএসের অনুপস্থিতি যাচাই করা যায়।
ল্যাটেনট আরএনএএস কার্যকলাপের উপস্থিতি পরীক্ষা করার জন্য, রিবনুক্লিয়াস ইনহিবিটর 200 ইউনিট তাপ-ডেনেচার করা হয় 70°সিতে 15 মিনিট এবং 37°সিতে 1 ইউজি আরএনএ দিয়ে 4 ঘন্টা ইনকিউবেট করা হয়।
ইনকিউবেশনের পর, আরএনএকে ইথিডিয়াম ব্রোমাইড-বর্ণযুক্ত অ্যাগারোজ জেলের উপর অক্ষত ব্যান্ড হিসাবে দৃশ্যমান করা হয় যাতে দৃশ্যমান আরএনএসের অনুপস্থিতি যাচাই করা যায়।

শারীরিক বিশুদ্ধতা

বিশুদ্ধতা ≥95% যা কোমাসি ব্লু রঙের এসডিএস-পলিঅ্যাক্রাইলামাইড জেল দ্বারা বিচার করা হয়।

ব্যবহারের নোট

রিবনুক্লিয়াস ইনহিবিটার একটি বিস্তৃত পিএইচ পরিসরে (পিএইচ 5.5-9) সক্রিয়। স্ট্যান্ডার্ড rt এবং in vitro ট্রান্সক্রিপশন 1u/ ul এর চূড়ান্ত ঘনত্বের রিবনুক্লিয়াস ইনহিবিটার ব্যবহার করে।

আদেশ