Taq Dna Polimerazası Nəçədən Pcr Amplifikasiyasında Asıldır
Polimeraza zəncir reaksiyası (PCR) spesifik DNA ardıcıllıqlarının amplifikasiyası məqsədilə hazırlanmış bir metoddur. Bu kontekstdə, taq dna polimerazı DNA amplifikasiyası prosesinin səmərəliliyi və spesifikliyi baxımından müəyyənedici ferment kimi ortaya çıxır.
Nədir taq dna polimerazı ?
Taq DNA Polimeraz, Termus aquaticus adlı termofil bakteriyədən alınan və yayılmasında sığır balıqlarında əsasən istifadə edilən bir enzimdür. Enzim, eyni zamanda temperaturaya qarşı əlverişli məxsusiyyəti ilə də tanınır ki, bu da onun DNA fragmlərlərinin istifadəsi üçün təkrarlayan isitilmə və soğutulma prosesini kataliz etməsinə imkan verir.
PCR-də funksiya
PCR-nin ilk addımı zamanı, ikişəkil DNA nümunəsi iki şəkildə bölünməsi üçün istiliklə maraqlanır. Taq DNA Polimerazı daxil edir və sonra yeni DNA şərhləri sintez olunur ki, bu da nükleotidlər kimi işləyən yeganə şəkildə şablonları istifadə edir; Taq DNA nükleotid şablon şərhlərinə düzgün bazaları əlavə edir. Bu addım, məhsuldan gözlənilən miqdar və keyfiyyəti müəyyənləşdirən çox vacibdir.
Yuxarı temperaturada dayanma
Taq DNA Polimerazasının ən yaxşı ifadə edilən xüsusiyyətlərindən biri isə, bu, təxminən 75-80 °C kimi yüksək temperaturdakı aktivliyi verir. Bu yüksək temperatur fərqəsi yalnız DNA şirələrinin eriyib çıxmasını təmin etməkdə də, amma daha da əhəmiyyətli olan şey primer bağlanmasının spesifikiyyətini artırır və qeyri-spesifik ailəşmənin ehtimalını azaltır. Başqaları belə ähəmiyyətli fərqləri təklif etməyə bilməz. Bu, Taq-a çoxlu PCR protokollarında üstünlük verir.
Texnik səviyyə və effektivlik
Taq DNA polimerazası ailəşmə sürətinə malik olduğunu da göstərilmişdir. Bu isə onun nisbətən yüksək uzama sürəti olması səbəbindən PCR çevrilmələrini sürətləndirir. Bu effektivlik клонлашдыру, секvenirovka, diagnostika və forenzik yanaşmaların çoxsaylı prosedurlarında çox vacibdir.
Nəticədə olaraq, Taq DNA polimerazını əvəz etmək mümkün deyil, çünki bu reagentin çox yüksək temperaturadan keçidə qarşı qoyan xassələri, effektivliyi və spesifikiyyeti PCR ailifasiyasında istifadə edilməsində xüsusilə mühüm edir. Ondan sonra molekulyar biologiya araşdırması bu enzimnin gəlməsi ilə böyük dərəcədə asandırılmışdır, bu da elmlərə və tibbə aid olan genlərə və yaşayan maddənin öz essence-nə baxmaqlarına imkan vermişdir. Taq DNA Polimerazinin hələ də laboratoriyalarda rutin istifadə edilən reagent olması, bu reagentin elmlərdə və tibbədə əsas funksiyalarını yerinə yetirdiyini açıq şəkildə göstərir.