ng chế ribonuclease, ng chế rnase 40u

ức chế ribonuclease nhau thai tái hợp của người, 40u/μl

nguồn

chủng e. coli biểu hiện một bản sao tái hợp mang gen ức chế ribonuclease từ nhau thai của con người.

nồng độ

40 u/μl.

định nghĩa đơn vị

một đơn vị được định nghĩa là lượng chất ức chế ribonuclease tái tổ hợp cần thiết ức chế hoạt động của 5ng ribonuclease a bằng 50%.

Hoạt động được đo bằng cách ức chế thủy phân cytidine 23-cyclic monophosphate bởi ribonuclease a.

bộ đệm lưu trữ

20mm hepes-koh ((ph7.6), 50mm kcl, 8mm dtt, 50% ((v/v) glycerol

lưu trữ

lưu trữ ở -20°c

kiểm soát chất lượng

Không có endonuclease
1μg lambda dna được ủ với 200 đơn vị chất ức chế ribonuclease trong 16 giờ ở 37 °C.
Sau khi ủ, lambda DNA được hình dung nguyên vẹn trên gel agarose có màu bromua ethidium để xác minh sự vắng mặt của endonuclease có thể nhìn thấy.

Không có nickase
1μg pbr322 loại i siêu cuộn được ủ với 200 đơn vị chất ức chế ribonuclease trong 4 giờ ở 37 °C.
Sau khi ủ, DNA siêu cuộn được hình dung trên gel agarose có màu bromua ethidium để xác minh sự vắng mặt của vết cắt hoặc cắt có thể nhìn thấy.

Không có exonuclease
1μg các dấu hiệu lambda dna/hindiii được ủ với 200 đơn vị chất ức chế ribonuclease trong 16 giờ ở 37°c.
Sau khi ủ, các dấu hiệu lambda dna/hindiii được tách bằng gel agarose 1% và nhuộm bằng ethidium bromide. Các dấu hiệu vẫn còn nguyên vẹn như các dải mà không bôi mỡ.

Không có rnase và rnase tiềm ẩn
Để kiểm tra sự hiện diện của hoạt động rnase, 1 ug rna được ủ với 200 đơn vị chất ức chế ribonuclease trong 4 giờ ở 37 °C.
Sau khi ủ, RNA được hình dung dưới dạng dải nguyên vẹn trên gel agarose có màu bromua ethidium để xác minh sự vắng mặt của rnase có thể nhìn thấy.
Để kiểm tra sự hiện diện của hoạt động rnase tiềm ẩn, 200 đơn vị chất ức chế ribonuclease được biến đổi nhiệt ở 70 °C trong 15 phút và ủ với 1 u rna trong 4 giờ ở 37 °C.
Sau khi ủ, RNA được hình dung dưới dạng dải nguyên vẹn trên gel agarose có màu bromua ethidium để xác minh sự vắng mặt của rnase có thể nhìn thấy.

tinh khiết về thể chất

Độ tinh khiết là ≥95% được đánh giá bằng sds-polyacrylamide gel với màu xanh coomassie.

ghi chú sử dụng

Các chất ức chế ribonuclease hoạt động trong phạm vi ph rộng (ph5. 5-9). rt tiêu chuẩn và phiên bản in vitro sử dụng chất ức chế ribonuclease ở nồng độ cuối cùng là 1u/ ul.

thứ tự