dung dịch ức chế ribonuclease tinh khiết cao - ức chế rnase 40u/μl, tối ưu cho bảo vệ rna trong tổng hợp cdna và ứng dụng sinh học phân tử

Mô tả sản phẩm

Giới thiệu Giải pháp Ức chế Ribonuclease Siêu Tinh Khiết của chúng tôi, một chất tái chế chất lượng cao vớiThuốc ức chế rnaseở nồng độ siêu cao 40 Đơn vị/μl. Giải pháp này được thiết kế đặc biệt để cung cấp sự bảo vệ tối đa chống lại ribonuclease trong quá trình xử lý RNA trong các quy trình sinh học phân tử khác nhau.

Các đặc điểm chính

• tinh khiết đặc biệt: chất ức chế ribonuclease được sản xuất tái kết hợp và tinh khiết nghiêm ngặt để đảm bảo mức độ tinh khiết cao, đảm bảo không có sự can thiệp vào các thí nghiệm của bạn.

• Công thức cực tập trung: được cung cấp ở nồng độ 40u/μl, chất ức chế này cho phép sử dụng hiệu quả trong các ứng dụng đòi hỏi, ngay cả lượng rnase nhỏ cũng có thể ảnh hưởng đến kết quả.

• hoạt động phổ rộng: chất ức chế có hiệu quả trung hòa một loạt các rnases a, b, c, và các endo- và exoribonucleases khác, bảo vệ các mẫu RNA của bạn khỏi bị phân hủy.

• ổn định và hoạt động: được xây dựng để ổn định trong một phạm vi nhiệt độ và điều kiện ph, chất ức chế vẫn hoạt động trong thời gian lưu trữ và trong suốt các giao thức thử nghiệm khác nhau.

• Hoàn hợp: lý tưởng để sử dụng với các hệ thống tự động và phản ứng được chuẩn bị bằng tay, nó hoàn toàn tương thích với các bộ đệm và enzyme thường được sử dụng trong tổng hợp CDNA và kỹ thuật thao tác axit nucleic.

ứng dụng

• CDNA tổng hợp: cần thiết để ngăn ngừa nhiễm rnase trong các phản ứng phiên âm ngược, do đó cải thiện năng suất và tính toàn vẹn của CDNA tổng hợp.

• Rna cô lập và tinh chế: thành phần quan trọng trong bộ thu thập RNA và quy trình làm việc tinh chế để duy trì tính toàn vẹn của RNA trước và sau khi cô lập.

• Northern blotting: đảm bảo chuyển RNA và lai tạo chất lượng cao bằng cách ức chế hoạt động rnase có thể phá hủy RNA trên màng.

• qpcr và rt-qpcr: bảo vệ mẫu RNA trong các xét nghiệm pcr định lượng và phiên bản ngược, tăng độ nhạy và tính cụ thể.

• Nghiên cứu tương tác RNA-protein: bảo quản các phân tử RNA trong quá trình đồng miễn dịch (rip) và các thí nghiệm tương tác RNA-protein khác.

nguồn

chủng e. coli biểu hiện một bản sao tái hợp mang gen ức chế ribonuclease từ nhau thai của con người.

nồng độ

40 u/μl.

định nghĩa đơn vị

một đơn vị được định nghĩa là lượng chất ức chế ribonuclease tái tổ hợp cần thiết ức chế hoạt động của 5ng ribonuclease a bằng 50%.

Hoạt động được đo bằng cách ức chế thủy phân cytidine 23-cyclic monophosphate bởi ribonuclease a.

bộ đệm lưu trữ

20mm hepes-koh ((ph7.6), 50mm kcl, 8mm dtt, 50% ((v/v) glycerol

lưu trữ

lưu trữ ở -20°c

kiểm soát chất lượng

Không có endonuclease

1μg lambda dna được ủ với 200 đơn vị chất ức chế ribonuclease trong 16 giờ ở 37 °C.

Sau khi ủ, lambda DNA được hình dung nguyên vẹn trên gel agarose có màu bromua ethidium để xác minh sự vắng mặt của endonuclease có thể nhìn thấy.

Không có nickase

1μg pbr322 loại i siêu cuộn được ủ với 200 đơn vị chất ức chế ribonuclease trong 4 giờ ở 37 °C.

Sau khi ủ, DNA siêu cuộn được hình dung trên gel agarose có màu bromua ethidium để xác minh sự vắng mặt của vết cắt hoặc cắt có thể nhìn thấy.

Không có exonuclease

1μg các dấu hiệu lambda dna/hindiii được ủ với 200 đơn vị chất ức chế ribonuclease trong 16 giờ ở 37°c.

Sau khi ủ, các dấu hiệu lambda dna/hindiii được tách bằng gel agarose 1% và nhuộm bằng ethidium bromide. Các dấu hiệu vẫn còn nguyên vẹn như các dải mà không bôi mỡ.

Không có rnase và rnase tiềm ẩn

Để kiểm tra sự hiện diện của hoạt động rnase, 1 ug rna được ủ với 200 đơn vị chất ức chế ribonuclease trong 4 giờ ở 37 °C.

Sau khi ủ, RNA được hình dung dưới dạng dải nguyên vẹn trên gel agarose có màu bromua ethidium để xác minh sự vắng mặt của rnase có thể nhìn thấy.

Để kiểm tra sự hiện diện của hoạt động rnase tiềm ẩn, 200 đơn vị chất ức chế ribonuclease được biến đổi nhiệt ở 70 °C trong 15 phút và ủ với 1 u rna trong 4 giờ ở 37 °C.

Sau khi ủ, RNA được hình dung dưới dạng dải nguyên vẹn trên gel agarose có màu bromua ethidium để xác minh sự vắng mặt của rnase có thể nhìn thấy.

tinh khiết về thể chất

Độ tinh khiết là ≥95% được đánh giá bằng sds-polyacrylamide gel với màu xanh coomassie.

ghi chú sử dụng

Các chất ức chế ribonuclease hoạt động trong phạm vi ph rộng (ph5. 5-9). rt tiêu chuẩn và phiên bản in vitro sử dụng chất ức chế ribonuclease ở nồng độ cuối cùng là 1u/ ul.