Urasil-N-Glikosilaz, Termo labil

Mahsulot tavsifi:

Urafil-N-Glikosilazamiz (UNG) uratsilik DNA bandlarini maxsus ravishda kesib olishga imkon beruvchi termolabil enzimdir. Ushbu enzim avvalgi reaksiyalardagi uratsilik ampikonlarni past qilish uchun PCR taqdimotida ishlatiladi.

Asosiy xususiyatlari:

• Uratsilikka ega DNA bandlarining maxsus kesishishi
• Yuqori temperaturada aslab bo'lish uchun termolabil xossalar
• PCR-dagi past qilishdan himoyalashni muvaffaqiyatli ravishda oldini oladi
• UNG-bilan trata qilingan PCR asosiy qo'shimchalarda ishlatish uchun moyin
• Almashtirib bo'lmaydigan past qilish bosqichlari shart emas bo'lgan PCR sozlashi uchun qulay
• Katta hajmdagi PCR taqdimoti va avtomatlashtirilgan platformalar uchun ideal

Qo'llanma:

• Past qilishdan himoyalash uchun PCR va haqiqiy vaqtning PCR
• PCR master mix-larida Uracil-DNA glikozilazis muovafiati
• Kutubchanalik muammolariga e'tibor beradigan DNA namunalarining kengaytirilishi
• Sirtqi kontsimatsiya nazorati talab etuvchi diagnostik testlar
• PCR asoslangan aniqlash usullarining tadqiqot va rivojlantirish
• Molekulyar biologiyaga oid ta'lim va tajriba mashg'ulotlari

Bizning Uracil-N-Glikozilazi PCR ishlab chiqarish jarayoniga qimmat bo'lgan qo'shimcha hisoblanadi, carryover kontsimatsiyasi sababli yolg'on musbat natijalarni oldini olish orqali natijalar integritetini ta'minlaydi. Uning termolabil uyusi inaktivatsiyani oddiy va effektiv ravishda amalga oshirish imkonini beradi, bu esa PCR testlarini bajardigan laboratoriyalar uchun ishonchli tanlov hisoblanadi.

Tavsif

Uracil-DNA Glycosidase (UNG), Termolabil E. coli-da rekombinant protein, dengiz bakteriyasi orqali olindi. Enzim uracil-glikosidik bondsini U-DNA da faollashtiradi va uracilni olib tashlaydi, shuningdek, DNA-da alkaliga hassas abaz site yaratadi. Enzim RNA va uracilning yo'qligi natijasida DNA-da faol emas. Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Termolabil metal ionlari talab etmaydi va EDTA mavjud bo'lganda to'liq faol hisoblanadi.

Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Termolabil mo‘ljallangan PCR "carry over" sirlantirishlarni avvalgi DNA sintez reaksiyalaridan olib tashlash uchun dUTP bilan ishlatilishi mumkin. PCR mahsulotlarini zayiflashga qarshilik qiladigan holatga keltirish uchun PCR reaksiya mixida dTTP ni dUTP bilan almashtirish kerak. Keyingi PCR reaksiya mixlari PCRdan oldin Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Termolabil bilan pretreatment qilinishi kerak, chunki urasil turib bulgan DNA ni zayiflashtiradi. Asliy DNA da urasil mavjud emas, shuning uchun ushbu jarayon orqali namuna zayiflanmaydi.

Manba: Recombinant E. coli

Konsentratsiya va hajmi: 1U/μL

Vahidning belgilash usuli

Bir vahid 37°C temperaturada 60 minut ichida to‘g‘ri tartibda 1μg tozalangan bitta jihatli urasil turib bulgan DNA ni butunlay zayiflashtirish uchun talab qilinadigan Uracil-DNA Glycosylase (UNG) miqdori sifatida aniqlanadi.

Saqlash bufferi

20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 1mM DTT, 0.5%(h/h) Tween-20, 0.5%(h/h) NP-40, 50%(h/h) glicerol.

Sifatni tekshirish

SDS page bo'yicha tozalik>99%

Endonuklease, Nickase, Exonuklease va RNase soliqmasi yo'q.

Issiq bilan faollikni yo'qotirish

50°C uchun 2 daqiqa

Reaksiya temperaturasi

20~37°C uchun 10 daqiqa.

Ishlatiladigan miqdor

Har bir 50ul reaksiyada 0.1~1U UNG enzymi.

Yetkazib berish va saqlash

-20°C da saqlang, gel maydoni bilan yetkazib bering.

buyurtma