Molekulyar biologiyada Pfu DNA polymerazasining kuchini ochish

PFU DNA polimerazasi : DNKni ko'paytirish uchun aniq asbob

Enzimlar molekulyar biologiyada muhim rol o‘ynaydi. Pfu DNA polimerazasi shu jumladan, yaratuvchilar tomonidan maxsus DNA kengaytmasi va replikatsiya uchun ko‘p ishlatiladigan belgi mol ekamidir. Ushbu enzim termofil bakteriyadan - Pyrococcus furiosus ajratilgan va DNA sintezida baland etiborli bo‘lib davom etadi, u vaqtning osonlik bilan yetarlicha ushlab turadi.

Termik qadrlilik: PCR strategiyasini o‘zgartiruvchi

Undagi eng farq qiladigan xususiyatlardan biri PFU DNA polimerazasi mukammal termik qadrlilikidir. Boshqa polimerazalar kabi, u 100°C dan pastda faol bo‘lib qoladi va shuning uchun mashxur denaturation shartlari kerak bo‘lgan PCR protokollari uchun idealdir. Bu qattiqlik amplifikatsiya jarayonining davom etishini ta’minlaydi va sovuq boshlang‘ich bosim yoki o‘rtacha sochish bosimlari talabini kamaytiradi.

Etibor va aniqlik: muassar genomika zaruriyati

Dorixona asarlari va yaqinlashgan genetik muhandislik usullari bilan belgilangan davrda aniqlik murakkab hisoblanadi. Uning sog'lomligi darajasi Taq Polimerazadan yaxshiroqdir, bu esa PCR texnologiyasining rivojlanishiga davom etgan davrining past dasturidir. Bu yaxshi sog'lomlik natijasi sifatida, PCR orqali to'g'ri mahsulotlar ta'minolanadi, bunda istalgan mutatsiyalar yoki shimerik tartiblangan ketma-ketliklar sodir bo'lish imkoniyati kamayadi, bu keyingi ishlatishni, masalan, klonlash, tartiblash va mutagenizmni kuchaytiradi.

Molekulyar biologiyada muammolar

Boshlanganida PCR-larida takrorlanuvchi tsikl reaksiyalari orqali mashhur bo'lgan Pfu DNA Polimerazi, molekulyar biologiyada boshqa ko'p qulayliklarga ega. Bu Pfu, asosiy o'zgarishlarni (baza tartibini aniq o'zgartirish kerak bo'lgan holatlarda) to'g'ri ravishda amalga oshirish uchun sayt-muqobil mutagenesida asosiy vosita sifatida qiymat beriladi, chunki u yuqori darajada jarayoniy (uzun DNA kesimlarini shablondan ajratilmay qolgan holda sintez qilishi mumkin). Shuningdek, bu enzim o'zgaruvchan reaksiya tarkibida mavjud bo'lgan yuqori konsentratsiyadagi ikkilav miqyorli ionlar (masalan, magiyev ionlari) bilan yaxshi ishlaydi; shuning uchun uning turli bufferlar va qo'shimchalarga mosligi bor.

Innovatsiya va rivojlantirish: muvofiqlik sohasidagi Pfu DNA Polimerazasi

Pfu DNA polimerazining foydalanilishi molekulyar biologiyaning yuraklayishi bilan doim o'zgaradi. Issledovchilar ushbu enzimni o'zgartirish va uning tezligini oshirish uchun, masalan, inhibitorlarga qarshi muqavimatini oshirish yoki mutasiyalarni kirgizib kattalashtirishni ko'rib chiqmoqda. Shuningdek, bir nechta bosqichli jarayonni mustaqillikka erishish va ish jarayonini oddiylashtirish uchun Pfu DNA polimerasasi boshqa enzimlar yoki funksionalitetlar bilan birlashtirilgan hamda yengillatilgan fusiyatsion protеinlari ishlab chiqarilmoqda.