m- mlv reversiv transkriptazaning CDNA sintezisida oʻynagan oʻrni

m-mlv reversiv transkriptazamolekulaviy biologiyada RNKni komplementar DNKga (CDNA) transkriptsiya qilishni kataliz qiluvchi va moloney murine leykemiya virusidan hosil bo'lgan mashhur fermentdir. Bu genlarni klonlash va sekvensiyalash uchun zarur ferment bo'lib, shuningdek genlarning ekspressiyasi tadqiqotlarida uning qo'llanilishini topadi.

molekulyar biologiyada qo'llanmalar

m-mlv reversiv transkriptazaning eng keng tarqalgan foydalanishlaridan biri genlar ekspressiyasi tadqiqotlari sohasida. Bu ko'pincha mRNA ning reversiv transkriptatsiyasi orqali amalga oshiriladi. mRNA cdnaga aylantiriladi. Bu esa genlarning ekspresssiya darajasini miqdoriy pcr (qpcr) orqali baholash imkonini

afzalliklari va cheklovlari

m-mlv reversiv transkriptaza oʻzining baʼzi afzalliklariga ega, ular orasida uzoq CDNA molekulalarini sintez qilishda zarur boʻlgan yuqori protsessivlik va sodiqlikni taʼminlashga qodir. Biroq, ushbu fermentning baʼzi kamchiliklari bor, jumladan, RNK namunasida mavjud boʻlgan

texnikasi va protokollari

M-MLV Reverse Transcriptase'dan samarali foydalanish uchun, primerlar tanlovi, reaksiya harorati va buffer tarkibi kabi omillarga alohida e'tibor berish kerak. Primerlar shunday tuzilishi kerakki, ularning ichida hairpin looplar bo'lmasin va RNA shabloniga bog'lanish maksimal darajada bo'lsin. Enzim reaksiya uchun optimal hisoblangan 42°C, bunday reaksiyalar uchun keng tarqalgan harorat bo'lib, shunda enzim faoliyati va barqarorligi optimaldir. Aksincha, boshqa moddalar, masalan,rnaza inhibitorlarireaksiya davomida parchalanadigan RNA'ni saqlab qolishi mumkin.

kelajak istiqbollari

biotexnologiyalarni yanada takomillashtirish, shuningdek, m-mlv reversiv transkriptazani qo'llashda yanada rivojlanishga yordam beradi. Bugungi kunda mavjud bo'lgan yangi strategiyalar, muhandislar tomonidan ishlab chiqarilgan kerakli xususiyatlarga ega bo'lgan fermentlarni qurishdir. Bundan tashqari, ushbu texnologiya keyingi avlod sekvensiyalash bilan

xulosa qilib aytganda, m-mlv reversiv transkriptaza molekulyar biologiya tadqiqotlarida muhim ahamiyatga ega, chunki u CDNAni hujayralarga kiritish uchun muhim ahamiyatga ega.