molekulyar biologiyada m-mlv reverst transkriptazaning roli va qoʻllanmalari

molekulaviy biologiya sohalarida turli xil biokimyoviy reaksiyalarda muhim rol o'ynagan.m-mlv reversiv transkriptaza(m-mlv rt), bu fermentlardan biri bo'lib, u oxirgi paytlarda katta e'tiborni jalb qildi, chunki u rna namunalaridan cdna sintez qilish qobiliyatiga ega. Moloney murine leykemiya virusidan (m-mlv) olingan ushbu ferment tadqiqot laboratoriyalarida amalga oshiriladigan boshqa qo'llanmalar

m-mlv reversiv transkriptazaning tuzilishi va funksiyasi

m-mlv reversiv transkriptaza DNKga bogʻliq DNK polimeraza sifatida ishlaydi, u ham RNKga bogʻliq DNK polimeraza, ham RBN h (rnasa h) faoliyati bilan shugʻullanadi. u RNK namunalarini taniydi va CDNA zanjirlarini sintez qilishni amalga oshiradi.

m-mlv reverst transkriptazaning qoʻllanmalari

CDNA sintezi: m-mlv rt-dan foydalangan holda teskari transkripsiya usullari RNK tarkibini CDNAga aylantirish uchun keng tarqalgan usullardir.

gen klonlash: m-mlv rt dan foydalangan holda tadqiqotchilar oʻzlarining RNK namunalaridan muayyan genlarni klonlashlari mumkin. Natijada, muayyan genlarni alohida ajratish va kuchaytirish mumkin, shunda ular funktsiya jihatidan yanada tahlil qilinishi mumkin.

ifodalanish tahlili: qpcr yoki mikro array tahlili kabi har qanday ifodalanish tahlili usullarining muhim bosqichida enzim tomonidan rnase h faoliyati orqali vositachi bo'lgan cdnas sintezi amalga oshiriladi. Bu usullar orqali olimlar genlarning biologik namunalarda o'zlarini qanday ifodalashini aniqlash imkoniyatiga

funksional genomika: funksional genomikada m-mlv rt kompleks RNA populyatsiyalaridan CDNA kutubxonalarini tayyorlash uchun ishlatiladi. Keyinchalik ushbu kutubxonalar aniqlangan funktsiyalar yoki fenotiplarga ega genlar uchun tekshirib ko'riladi va shu yo'sin genlar funksiyasi va o'zaro ta'siri haqida yangi tushun

afzalliklari va e'tiborlari

m-mlv reversiv transkriptaza yuqori samaradorlik, spetsifiklik va qayta koʻrinishga ega boʻlish kabi bir nechta afzalliklarga ega. Biroq, shuni taʼkidlash kerakki, ferment optimal harorat, pH qiymati va tuz konsentratsiyasi kabi maxsus sharoitlarda yaxshi ishlaydi. baʼzida cdna sintezi davomida m-

xulosa qilib aytganda, m-mlv reversiya transkriptazasi molekulaviy biologiya tadqiqotlarida turli xil dasturlar uchun rna namunalaridan cdna sintez qilish uchun foydali vosita hisoblanadi. Gen klonlash, ekspresssiya tahlili va funksional genomika tadqiqotlari m-mlv rt ga katta darajada tayanadi, chunki