Ribonukleaz inhibitori, rnaza inhibitori 40u ul

Rekombinant inson placenta ribonukleaz inhibitori, 40 u/μl

manba

e. coli turi, inson placentaidan ribonukleaz inhibitor genini olib yuradigan rekombinant klonni ifodalaydi.

konsentratsiya

40 u/μl

birlikning taʼrifi

bir birlik - rekombinant ribonukleaz inhibitorining 5 ng ribonukleaz a faolligini 50% kamaytirishi uchun zarur bo'lgan miqdori sifatida aniqlanadi.

Aktivligi sitidin 23- siklik monofosfatining ribonukleaz a tomonidan gidrolizini inhibitsiya qilish orqali oʻlchanadi.

saqlash buferi

20 mm hepes-koh ((ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, 50% ((v/v) gliserol

saqlash

-20°C haroratda saqlang

sifatni nazorat qilish

endonukleaz mavjud emas
1 μg lambda DNKni 200 birlik ribonukleaz inhibitori bilan 37°C haroratda 16 soat davomida inkubatsiya qilish kerak.
Inkubaatsiyadan so'ng lambda DNKsi ko'rinadigan endonukleaz yo'qligini tekshirish uchun etidiy bromidi bilan bo'yalgan agaroz jelga to'liq ko'rinadi.

nikase mavjud emasligi
1 μg i turdagi superko'pikli pbr322 200 birlik ribonukleaz inhibitori bilan 37°C haroratda 4 soat davomida inkubatsiya qilinadi.
Inkubatsiyadan so'ng superko'rikli DNK etidiy bromid bilan bo'yalgan agaroz jelga ko'rib chiqiladi, bu esa ko'rinadigan kesish yoki kesish yo'qligini tekshirish uchun.

eksonukleaz mavjud emas
1 μg lambda dna/hindiii markerlari 200 birlik ribonukleaz inhibitori bilan 37°C haroratda 16 soat davomida inkubatsiya qilinadi.
Inkubatsiyadan so'ng lambda DNK/hindiii markerlari 1% agaroz jel bilan ajratib olinadi va etidiy bromidi bilan bo'yaladi. Markerlar bosishmasdan barqaror lentalar sifatida qoladi.

rnaza va yashirin rnaza yoʻqligi
rnase faolligini aniqlash uchun 1 ug rna 200 birlik ribonukleaz inhibitori bilan 37 °C da 4 soat davomida inkubatsiya qilinadi.
Inkubaatsiyadan soʻng, koʻrinadigan rnaza yoʻqligini tekshirish uchun RNK etidiy bromid bilan boʻyalgan agaroz jelga toʻliq tasma sifatida koʻrsatiladi.
Yotoq rnaza faolligini aniqlash uchun 200 birlik ribonukleaz inhibitori 70 °C haroratda 15 daqiqa davomida issiqlik bilan denaturlanadi va 1 ug rna bilan 37 °C haroratda 4 soat davomida inkubatsiya qilinadi.
Inkubaatsiyadan soʻng, koʻrinadigan rnaza yoʻqligini tekshirish uchun RNK etidiy bromid bilan boʻyalgan agaroz jelga toʻliq tasma sifatida koʻrsatiladi.

jismoniy poklik

sofligi ≥ 95% bo'lib, ko'k rangli ko'k rangli sds-poliyaakrilamid jel bilan baholanadi.

Foydalanish bayoni

Ribonukleaz inhibitori keng pH oraligʻida (ph5. 5- 9) faol boʻladi.

tartib