molekulyar biologiya tadqiqotlari uchun m-mlv reversiv transkriptaza

m-mlv reversiv transkriptazaMoloney Murine Leukemia Virus mahsuloti butun dunyo bo'ylab molekulyar biologiya laboratoriyalarida asosiy vosita hisoblanadi. Bu RNA dan teskari transkripsiya orqali to'ldiruvchi DNK (cDNA) sintezini boshqaradigan samarali fermentdir. Ferment yuqori aniqlikka ega va gen ifodasi tahlili, RNA viruslarini klonlash va funktsional genomika tadqiqotlari kabi turli ilovalarda ishlatilishi mumkin.

m- mlv reverst transkriptazaning xususiyatlari va afzalliklari

m-mlv reversiv transkriptazauning mashhurligiga hissa qoʻshadigan koʻplab xususiyatlarga ega. Bunga yuqori haroratlarda yaxshi ishlash qobiliyati kiradi, bu esa hosilni yaxshilashga va sifatli CDNA-larga olib keladi. Bundan tashqari, uning rnaza faolligi past, shuning uchun jarayon davomida rna minimal darajada parchalanadi. Bundan tashqari, u tadqiqotchilarga

m-mlv reverst transkriptazaning qoʻllanmalari

turli sohalar m-mlv reversiv transkriptazaning qo'llanmalar bo'yicha qanchalik ko'p qirraliligini amaliyotda ko'rsatdi. Ushbu usul mRNA namunalaridan qpcr yoki mikro array tahlillari uchun ishlatilishi mumkin bo'lgan cdna kutubxonalarini yaratishda yordam bergani uchun mRNAni miqdorlashda

m-mlv reverst transkriptaza bilan optimallashtirish va muammoni hal qilish

M-MLV RT dan foydalanayotganda tavsiya etilgan reaksiya sharoitlari va protokollariga amal qilish kerak, shunda o'tkazilgan tajribalardan eng yaxshi natijalarni olish mumkin.. RNA shablonining konsentratsiyasi, kerakli ferment miqdori va buffer tanlovi kabi bir qator omillarni hisobga olish kerak. Muammolarni hal qilishda reaksiya haroratini optimal sharoitlarga o'zgartirish, primer konsentratsiyalarini moslashtirish yoki foydalanishrnaza inhibitorlariRNA parchalanishini kamaytirishga yordam beradi. Ushbu sharoitlar M-MLV Teskari Transkriptaza tomonidan cDNA sintezining maksimal samaradorligi va hosilini ta'minlaydi.

m-mlv reversiv transkriptaza molekulyar biologiya tadqiqotlarida arna-ni cdna-ga samarali va aniq aylantirish imkonini beradigan bebaho vosita hisoblanadi. Uning yuqori sodiqligi va kuchli ishlashi uni ko'plab tadqiqotchilar uchun afzal tanlovga aylantiradi, chunki uni ko'plab turli sohalarda qo'llash mumkin. Tad