la taq DNK polimerazi, uzoq pcr polimerazi
- kirish soʻzlari
kirish soʻzlari
Uzun PCRtaq DNK polimerazasi, 5U/μl
tavsif
taq dna polimerazasidan uch barobar yuqori
uzoq pcr polimerazi sinergiya asosida uzoq pcr mahsulotlarini ishlab chiqaradi, bu esa faqat taq dna polimeraziga qaraganda ko'proq hosil va sodiqlikni beradi.
PCR ning sodiqligi taq DNK polimerazasiga qaraganda uch baravar yuqori.
la taq juda uzun amplikonlarni hosil qilish uchun optimallashtirilgan: virus DNKda 40 kb gacha va genomik DNK namunalarida 15 kb gacha. Maxsus tayyorlangan la taq bufer DNKni uzoq issiqlik sikli davomida purinatsiyadan va o'tkirlikdan himoya qiladi.
La taq DNK polimerazasi bilan hosil bo'lgan pcr mahsulotlari asosan 3'-da quyruqli bo'lib, ular ta vektorda klonlanishi mumkin.
xususiyatlari
- uzun pcr mahsulotlari
- virus DNK nusxasini koʻrsatgan holda 40 kb gacha
- 15 kb gacha bo'lgan genomik DNK namuna sifatida
- 85% GC gacha bo'lgan GC boy namunalari uchun ideal.
- taq DNK polimerazasi bilan taqqoslaganda 3 barobar yuqori.
- yuqori hosil beradi. oʻzgartirilgan nukleotidlarni oʻz ichiga oladi.
sifatni nazorat qilish
lambda DNK namunasini qo'llagan holda 40 kb amplikon hosil qilishda funksional sinovdan o'tkazilgan.
konsentratsiya: 5 u/μl
saqlash
saqlash bufferi: ferment quyidagilarda taqdim etiladi: 20 mm tris-hcl (ph 8.0); 0,1 mm edta; 1 mm dtt; 100 mm kcl; stabilizatorlar; 50% gliserol.
saqlash: -20°C haroratda saqlang.
reaksiya
reaksiya pcr aralashmasi o'rnatilgan va tavsiya etilgan issiqlik sikli sharoitlari: oqim faqat 20kb inson genomik DNKni namuna sifatida oladigan misol, faqat ma'lumot uchun, u namuna va primerning uzunligi va ketma-ketligiga qarab sozlanishi mumkin.
tarkibiy qism | hajmi | yakuniy konsentratsiya |
namuna | dna < 1 ug | talabga koʻra |
oldingi boshlang'ich (10 μm) | 1 μl | har biri 0,2-0,4 μm |
orqaga burilish (10 μm) | 1 μl | har biri 0,2-0,4 μm |
10 x taq bufferi | 5 μl | 1 x |
2,5 mm dntps | 4 μl | 0,2 mm |
la taq DNK polimerazasi | 0,5 μl | 2,5 birlik |
ddh2o yakuniy hajmga | 50 μl | qo'llanilmaydi |
94°C 3 daqiqa
94°C 30 soniya
55°C 30 sek 30 tsikl
72°C 1 daqiqa
72°C 5 daqiqa.
tartib
pc08 | la taq DNK polimerazasi | uzun pcr taq dna polimerazasi, 5u/μl |