HiFi III M-MLV Reverse Transcriptazasi (RNase H-)

Mahsulot tavsifi:

Bizning HiFi III m-mlv reversiv transkriptaza (RNase H-) yuqori aniqlikdagi teskari transkripsiya ilovalari uchun mo'ljallangan zamonaviy fermentdir. Ushbu ferment Moloney Murine Leukemia Virus (M-MLV) teskari transkriptaza modifikatsiyasi bo'lib, RNase H faoliyatini yo'qotish uchun ishlab chiqilgan, shuning uchun cDNA sintezi davomida RNA parchalanishini minimallashtiradi.

Asosiy xususiyatlari:

• RNase H faoliyati yo'q holatda o'zgartirilgan M-MLV reverst transkriptaziya
• cDNA sintezi davomida ajralib olinmaydigan sifat va effektivlik
• To'liq uzunlikdagi mRNA va keng tarqalgan shablonlar uchun mos keladi
• RNA yorug'ini kamaytirish orqali mustaqil templatlarni saqlash
• RT-PCR buffer sharoitlari to'plami bilan uyumli
• Keyingi ishlosh uchun yuqori sifatli cDNA yaratish uchun ideal

Qo'llanma:

• Revers transkriptsiya PCR (RT-PCR)
• Suzuv va klonsazlik uchun cDNA bibliotekalari sintezi
• Gen ifodasi tahlili
• RNA вирусларини aniqlash va miqdorini belgilash
• Nadir yoki kam sondagi RNA transkriptlarning koʻpaytirilishi
• RNA tadqiqotlari uchun ta'limiy va tadqiqot muhitlari

Bizning HiFi III M-MLV Teskarisi Transkriptaziya (RNase H-) tadqiqotchilarga teskarisi transkriptsiya eksperimentlarini bajarish uchun kuchli vosita hisoblanadi. Uning baland etiborligi va RNase H faoliyati yo'qligi RNA shablonlarni cDNA-ga toʻgʻri transkript qilishiga va keyingi molekulyar biologiya testlar uchun ishonchli asos yaratishiga imkon beradi.

Tavsif

MMLV Reverse Transcriptase, Moloney Murine Leukemia Virus (MMLV RT) tomonidan kodlangan va RNA-ga bog'liq DNA polimerazasi sifatida ishlaydi. Bu enzim, primer hibridlangan bitta jihatli RNA shablonidan komplement cDNA birinchi jihatini sintezi qiladi. MMLV RT shuningdek, bitta jihatli DNA ga hibridlangan primerni uzaytirishi mumkin. Ikkinchi jihatli cDNA ni sintezi ba'zi mRNA shablonlari uchun qo'shimcha DNA polimerazi shart emas. Umumiy M-MLV RT dan farqi shundaki, ushbu enzimning ist yeltirishga qarshi dayomiyligi oshirilgan. U 50°C da 100% faoliyatni saqlaydi va 55°C da ham 80% dan ziyod faoliyatni saqlaydi.

Manba

Moloney murine leukemia virus reverz transcriptaza genini o'z ichiga olgan E. coli ning rekombinatsiyasi Moloney murine klonidan.

Qo'llanish sohaları

Birinchi chorak cDNA sintezi; RT-PCR

Xususiyatlari

• RNase H faoliyati yo'q: Kamchilikda RNase H faoliyati Yuqori cDNA miqdori, to'liq uzunlikdagi cDNA ni ko'proq olish mumkin.
• issiqga qarshilik: optimal reaksiya harorati 50°C, eng yuqori harorat 60°C. Mavzu RNA ikkinchi turdagi strukturani tashlab ketishi mumkin va reverz transcriptaza eksperimentini muvaffaqiyat bilan yakunlashi mumkin.
• keng harorat diapazoni: 37-60C orqali reverz transcript qilish mumkin, eng yuqori faoliyat 42°C-55°C da 80% dan ortiq. Xaridor reaksiya haroratini ozgina tanlashingiz mumkin.
• Kuchli kattalashdirish faoliyati: Gen mutatsiyasi enzym va RNA ning bog'lanish qobiliyatini oshirdi. Kattalashdirish tezligini oshirdi, sifatli cDNA ni olish mumkin, cDNA biblioteka qurish uchun muhim.

Vahidning belgilash usuli

MMLV RT vahidi 37°C da oligo(dT)12-18-primerlangan poly(A)n shablonidan foydalanib 10 daqiqa ichida 1 nmol dTTP ni kattalashgan asiddan pochulmaydigan materialga o'tkazadi.

Mutaxassislik : 200U/μl

Qadoqlash : Bulk

Komponent : M-MLV (200U/μl) 5xBuffer (DTT bilan)

Saqlash : -20°C

buyurtma