Pfu DNA پولیمریز مولیکولر بائیولوژی اور بائیوتیکنالوجی میں ایک کرنی

جزیاتی حیاتیات اور بائیوتیکنالوجی کا شعبہ قدم بڑھاتے چلے جا رہا ہے، اور انزائمس نے تحقیق اور ترقی کے پیشرفت میں اہم کردار ادا کیا ہے۔ ایک معین انزائمس نے جس نے عجیب و غریب اثر دیا ہے وہ ہے PFU ڈی این اے پالیمریز ۔ یہ انزائمس پایروکوکkus فیروسس، ایک سپانچہ گرمائی باکٹیریا سے ماخوذ ہے، جس کے پاس منفرد خصوصیات ہوتی ہیں جو اسے دوسرے ڈی این اے پولیمریزز سے الگ کرتی ہیں، اس لیے یہ مختلف جزياتی تقنيات میں استعمال کرنے کے لئے بہت مفید ہوتی ہیں۔

Pfu ڈی این اے پولیمریز کی خصوصیات:

عالمی طور پر مختلف جزياتی حیاتیات کے ذرائع میں عام استعمال ہونے والی Pfu ڈی این اے پولیمریز کے کئی اہم صفات ہیں۔ وہ یہ ہیں:

1.تصویری صلاحیت: Pfu ڈی این اے پولیمریز جو اپنے آپ کو زیادہ تر دوسرے سے الگ کرتی ہے، اس کے پاس ذاتی 3' سے 5' ایکسونیکلیز صلاحیت ہوتی ہے جو اپنے کام کو غلطیوں کے لئے نگرانی کرتی ہے۔ اس طرح، PCR میں وسعت کے دوران، یہ غلطیوں کی شناخت اور تعمیر کو فасلتی ہے اور غلطیوں کی شرح کو غیر تصویری پولیمریز کے مقابلے میں کم کرتی ہے۔

2. ٹرمو استیبلائٹی: اس کے مخ مریض جاندار سے حاصل کیا جانا، پی ایف یو ڈی این اے پولیمریز گرما کی بلند درجہ حرارت پر بالا استحکام دکھاتا ہے۔ یہ 95°C (203°F) تک فعال رہتا ہے جس کے بنا پر یہ بلند درجہ حرارت کی ضرورت والے توانائیات کے لئے جیسے PCR امپلی فی کشن میں GC-ثقلی کے ٹیمپلیٹس یا لمبے ٹیمپلیٹس کے لئے ضروری ہے۔

3. وفا: ثبوت داری کی صلاحیتوں کے ساتھ ٹرمو استیبلائٹی کا ملا جانا پی ایف یو ڈی این اے پولیمریز کی وفا کی سطح کو تقویت میں بڑھاتا ہے جس کے نتیجے میں یہ Taq پولیمریز کے مقابلے میں زیادہ بہتر ہوتا ہے۔ یہ کلوننگ اور میوٹیجنیس تجربات جیسے کاموں کے لئے ایدال ہے کیونکہ اس انزایم کے استعمال سے منجر ہونے والی غلطی کی شرح بہت کم ہوتی ہے جبکہ Taq پولیمریز کے استعمال سے نتیجہ منجر ہوتا ہے۔

پی ایف یو ڈی این اے پولیمریز کے استعمال:

اس کی خاصیتوں کی اس طرح کی منفردی PFU-DNA-polymerase کو مختلف مولیکولر بائیولاجی کی طریقہ کاروں میں وسیع استعمال کی حد تک محدود کرتی ہے جیسے:

1.PCR وسعت: Pfu ڈی این اے پولیمریز PCR وسعت میں منتخب انزائیم ہے کیونکہ اس میں بالا وفاوریت اور غلطیوں کو تsekhty کی صلاحیت ہوتی ہے، خاص طور پر جب وسعت شدید مناسب ہونا ضروری ہوتا ہے۔ یہ GC سے محاط ٹیمپلیٹس یا لمبے ٹیمپلیٹس کو بھی بہتر طریقے سے وسعت دیتا ہے جو دوسری پولیمریز کے لئے مشکل ہوسکتے ہیں۔

2.کلوننگ اور موٹیجنیسیس: Pfu ڈی این اے پولیمریز سے جڑے گلا غلطیوں کی نمائندگی کی وجہ سے یہ کلوننگ کے لئے بہترین اختیار ہے اور موقعی موٹیجنیسیس تجربات میں بھی استعمال ہوتی ہے جہاں اتفاقی موٹیشنز نتیجے کو زیادہ سے زیادہ متاثر کرسکتی ہیں۔

3.ڈی این اے سیکوئنسنگ: اسی وجہ سے، Pfu ڈی این اے پولیمریز ڈی این اے سیکوئنسنگ اوزار میں بھی استعمال کی جاسکتی ہے تاکہ سیکوئنس ڈیٹا اصل ٹیمپلیٹ کو مضبوط طور پر ظاہر کرے۔

پی ایف یو ڈینی اے پولیمریز اس کی اسی مخصوص خصوصیات جیسے غلطیوں کو چیک کرنے کی صلاحیت، گرما کی تحمل ورنے کی قابلیت اور بالا وفا اسے انواع مختلف مولیکولر بائیالوجی اور بائیو ٹیکنالوجی کے علاقوں میں بدل دیا ہے۔ یہ بتاتا ہے کہ یہ کیوں پی سی آر امپلی فیکشن سے لے کر کلوننگ تک اور ڈینی اے سیکوئنسرنگ تک کے وسیع طور پر استعمال میں آتا ہے اور اس لیے مدرن مولیکولر بائیالوجی کی تحقیق اور ترقی کے لیے ضروری بن جاتا ہے۔ ٹیکنالوجی میں ترقی کے ساتھ، بالا وفا والے انزایمز جیسے پی ایف یو ڈینی اے پولیمریز کی تقاضا میں اضافہ ہوگا اور یہ مولیکولر بائیالوجی کے شعبے میں سب سے مہتمم اوزاروں میں سے ایک بن جائے گا بہت سالوں تک.