ڈی این اے پولیمراز کو سالماتی حیاتیات اور بائیو ٹیکنالوجی میں انقلاب کے طور پر پیش کیا گیا
سالماتی حیاتیات اور بائیو ٹیکنالوجی کا میدان ترقی کرتا رہتا ہے، اور انزائمز تحقیق اور ترقی کی ترقی میں اہم کردار ادا کرتے رہے ہیں۔ ایک اہم انزائم جس کا قابل ذکر اثر رہا ہے وہ ہےفُو ڈی این اے پولیمراز. یہ اینجیم ایک ہائپر تھرموفیل بیکٹیریا، پیروکوکس فیریوسس سے ماخوذ ہے جس میں منفرد خصوصیات ہیں جو اسے دوسرے ڈی این اے پولیمرازز سے مختلف بناتی ہیں، اس طرح اسے مختلف سالماتی تکنیکوں میں بہت مفید بناتی ہیں۔
فُو ڈی این اے پولیمراز کی خصوصیات:
فُو ڈی این اے پولیمراز کی کئی اہم خصوصیات ہیں جن کی وجہ سے اسے دنیا بھر میں مختلف مالیکیولر حیاتیات کی لیبارٹریوں میں وسیع پیمانے پر استعمال کیا جاتا ہے۔ ان میں شامل ہیں:
1.کرکٹ ریڈنگ کی صلاحیت: پی ڈی این اے پولیمراز جو خود کو زیادہ تر دوسروں سے ممتاز کرتا ہے کیونکہ اس میں 3' سے 5' ایکسونوکلیز سرگرمی ہے وہ غلطیوں کے لئے اپنے کام کی نگرانی کرسکتا ہے۔ اس طرح ، پی سی آر ایمپلیکیشن کے دوران ، اس سے غلط طور پر شامل نیوکلئیوٹائڈز
2.تھرموسٹیبلٹی: ایک ہائپر تھرموفیل جاندار سے حاصل ہونے کے ناطے ، پی ڈی این اے پولیمراز اعلی درجہ حرارت پر متاثر کن طور پر مستحکم ہے۔ یہ 95 ° C (203 ° F) تک فعال رہتا ہے جس کی وجہ سے یہ اعلی درجہ حرارت کی ضرورت والے رد عمل جیسے جی جی سے بھرپور ٹیم
3.fidelity: thermostability کے ساتھ ریکوریج کی صلاحیت کے مجموعے میں، taq polymerase کے مقابلے میں pfu dna polymerase کی وفاداری کی سطح کو بہتر بناتا ہے۔ اس سے یہ ایسی ایپلی کیشنز کے لئے مثالی ہے جہاں کلوننگ اور mutagenesis تجربات سمیت صحت سے متعلق ضروری ہے کیونکہ
فو ڈی این اے پولیمراز کے استعمال:
pfu-dna-polymerase کے سلسلے میں ان خصوصیات کی منفردیت نے مختلف سالماتی حیاتیات کے طریقوں میں اس کے وسیع استعمال کو محدود کیا:
پی سی آر امپلیفیکیشن: پی سی آر ایمپلیفیکیشن میں فائیو ڈی این اے پولیمراز انتخاب کا انزائم ہے کیونکہ اس میں اعلی وفاداری اور ریکوریج کی صلاحیت ہے ، خاص طور پر جب تقویت یافتہ مصنوع کی درستگی انتہائی اہم ہے۔ یہ جی سی سے بھرپور ٹیمپلیٹس یا لمبے ٹیمپلی
2.کلوننگ اور موٹجنیز: پی ایف ڈی این اے پولیمیرس سے منسلک غلطیوں کی کم تعداد اسے کلوننگ کے ساتھ ساتھ سائٹ پر مبنی موٹجنیز تجربات کے لئے ایک بہترین آپشن بناتی ہے جہاں حادثاتی تغیرات نتائج کو کمزور کرسکتے ہیں۔
ڈی این اے ترتیب: اس وجہ سے، پی ایف ڈی این اے پولیمراس ڈی این اے ترتیب کے اوزار میں استعمال کیا جا سکتا ہے تاکہ ترتیب کے اعداد و شمار اصل ٹیمپلیٹ کو درست طریقے سے ظاہر کریں.
فو ڈی این اے پولیمراز نے اپنی غیر معمولی خصوصیات جیسے ثبوت پڑھنے کی صلاحیت ، حرارتی استحکام اور اعلی وفاداری کے ساتھ سالماتی حیاتیات اور بائیو ٹیکنالوجی کے مختلف پہلوؤں میں انقلاب برپا کردیا ہے۔ اس کی وجہ یہ ہے کہ اسے پی سی آر امپلیفیکیشن سے لے کر کلوننگ تک ڈی این اے ترتیب دینے تک وسیع