بہت سافہ رائبو نیوکلی ایس انسائیبٹر حل - RNase Inhibitor 40U/μl، cDNA تخلیق اور مولیکولر زندگیاتیاتی ایپلی کیشن میں RNA کی حفاظت کے لئے مناسب

محصول کا تشریح

ہمارا ہائیلی پیور رائبو نیوکلیز انحیبیٹر حل متعارف کروا رہے ہیں، ایک اعلیٰ معیار کا ریجنٹ جو آر آئی سی انہابیٹر انتہائی مرتکز 40 یونٹس/μl میں پیش کرتا ہے۔ یہ حل خاص طور پر مختلف مالیکیولر بایولوجی کے طریقوں میں RNA ہینڈلنگ کے دوران رائبو نیوکلیز کے خلاف زیادہ سے زیادہ تحفظ فراہم کرنے کے لیے انجینئر کیا گیا ہے۔

اہم خصوصیات

• عجیب و غریب صافی: ریبو نیوکلیز انہیبٹر کو بازتولید کیا جاتا ہے اور اس کو صارفین کے ذرائع کو متاثر نہ کرنا یقینی بنانے کے لئے مضبوط طور پر صاف کیا جاتا ہے۔

• اُلٹرا مراکز فارمولا: 40U/μl کی تراکوند میں فراہم کیا جاتا ہے، جس سے مطلوبہ استعمالات میں موثر استعمال کی اجازت ہوتی ہے جہاں تکRNase کی خاص مقداروں سے نتائج متاثر ہوسکتے ہیں۔

• وسیع طектہ کام: انہیبٹر کوشش سے RNases A، B، C اور دیگر اندو-اور ایکسوریبو نیوکلیز کو مسلسل طور پر معطل کرتا ہے، آپ کے RNA نمونوں کو تباہی سے بچانا۔

• ثبات اور فعالیت: مختلف درجات حرارت اور pH کے شرطین میں ثبات کے لئے تیار کیا گیا، انہیبرٹر ذخیرہ کے دوران اور مختلف تجربی پروٹوکولز کے دوران فعال رہتا ہے۔

• مطابقت: خودکار نظاموں اور ہاتھ سے تیار کردہ تفاعلات کے ساتھ استعمال کرنے کے لئے مناسب، یہ cDNA تخلیق اور نوکلیک اسیدomanipulation تکنیکوں میں عام طور پر استعمال کی جانے والی بافر اور آنزائیم کے ساتھ پوری طرح مطابقت رکھتا ہے۔

استعمالات

• cDNA تخلیق: معکوس ترجمانی تفاعل کے دوران RNase آلودگی روکنے کے لئے ضروری، اس سے cDNA کی تخلیق کی حاصل اور سلیقہ میں بہتری ہوتی ہے۔

• RNA الگ کرنا اور صاف کرنا: RNA الگ کرنے کے قبل اور بعد RNA کی سلیقہ برقرار رکھنے کے لئے RNA الگ کرنے کے کٹ کے اور صاف کرنے کے عمل کا اہم حصہ ہے۔

• شمالی بلٹنگ: مموریز پر RNA کو زیادہ کرنے سے روکنے کے لئے RNase آلودگی کو روکتا ہے، جس سے RNA کی اچھی کیفیت کی منتقلی اور ہائبرڈائزیشن یقینی بن جاتی ہے۔

• qPCR اور RT-qPCR: کوانتٹیوٹیو PCR اور معکوس ترجمانی کوانتٹیوٹیو PCR اسس میں RNA ٹیمپلیٹ کو حفاظت دیتا ہے، حساسیت اور خصوصیت میں بہتری کرتا ہے۔

• آر این اے-پروٹین متبادل کی تحقیق: مشترکہ ایمیونو پریسپٹیشن (آر آئی پی) اور دیگر آر این اے-پروٹین متبادل تجربات کے دوران آر این اے مولیکلز کو حفاظت کرتا ہے۔

ماخذ

ایچ کولی استرین جو ایک ریکمبنٹ کلون کو ظاہر کرتا ہے جو مینشیا پلسنتا سے ریبو نیوکلیز انہیبٹر گین کو حامل ہے۔

سانچہ

40 U/μl.

یونٹ کی تعریف

ایک یونٹ کو اس مقدار کے طور پر تعریف کیا جاتا ہے جو ریکمبنٹ ریبو نیوکلیز انہیبٹر کی ضرورت ہوتی ہے کہ ریبو نیوکلیز A کی سرگرمی کو 50 فیصد تک روک دے۔

سرگرمی کو ریبو نیوکلیز A کے ذریعہ cytidine 2'3'-cyclic monophosphate کے هیدرولیسس کی روکاوٹ سے پیمائی جاتی ہے۔

استوریج بفر

20mM HEPES-KOH(PH7.6)، 50mM KCl، 8mM DTT، 50%(v/v) گلائسرول

اسٹوریج

پر کھانا -20°C

کوالٹی کنٹرول

اینڈونیوکلیز کی موجودگی نہیں

1μg لامڈا ڈین ایچ ڈیبیلیس کو 37°C پر 16 گھنٹے تک رائبو نیوکلیز انہیبٹر کے ساتھ انکوبیٹ کیا جاتا ہے۔

انکوبیشن کے بعد، لامڈا ڈین ایچ ڈیبیلیس کو ایتھیڈیم براومائیڈ-ستارہ ایگاروس گیل پر مکمل طور پر دیکھا جاتا ہے تاکہ وضاحت کی جائے کہ دیکھنے والے اینڈونیوکلیز کی موجودگی نہیں ہے۔

نکیس کی موجودگی نہیں

1μg ٹائپ آئی سپرکوائلڈ پی بی آر 322 کو 37°C پر 4 گھنٹے تک رائبو نیوکلیز انہیبٹر کے ساتھ انکوبیٹ کیا جاتا ہے۔

انکوبیشن کے بعد، سپرکوائلڈ ڈین ایچ ڈیبیلیس کو ایتھیڈیم براومائیڈ-ستارہ ایگاروس گیل پر دیکھا جاتا ہے تاکہ وضاحت کی جائے کہ دیکھنے والے نکنگ یا کٹنگ کی موجودگی نہیں ہے۔

ایکسونیوکلیز کی موجودگی نہیں

1μg لامڈا ڈین ایچ ڈیبیلیس/ہنڈ III مارکرز کو 37°C پر 16 گھنٹے تک رائبو نیوکلیز انہیبٹر کے ساتھ انکوبیٹ کیا جاتا ہے۔

انکوبیشن کے بعد، لامڈا ڈین ایچ ڈیبیلیس/ہنڈ III مارکرز کو 1% ایگاروس گیل سے الگ کیا جاتا ہے اور ایتھیڈیم براومائیڈ سے رنگ دیا جاتا ہے۔ مارکرز مکمل طور پر بنديوں کے طور پر رہتے ہیں جبکہ سمیرنگ کے بغیر۔

RNase اور لاٹینٹ RNase کی موجودگی نہیں

RNase سرگرمی کی موجودگی کو ٹیسٹ کرنے کے لئے، 1 مکروگرام RNA کو 200 یونٹس Ribonuclease Inhibitor کے ساتھ 37°C پر چار گھنٹے تک انکیوبیٹ کیا جاتا ہے۔

انکیوبیشن کے بعد، RNA کو ایثیڈیم براومائیڈ سے رنگ لگایے گئے ایگاروس گیل پر آلے ہوئے بنڈ کے طور پر دیکھا جاتا ہے تاکہ وضاحت کی جائے کہ نظری RNase غیر موجود ہے۔

پوشیدہ RNase سرگرمی کی موجودگی کو ٹیسٹ کرنے کے لئے، 200 یونٹس Ribonuclease Inhibitor کو 70°C پر 15 منٹ تک گرمی سے دھوتا دیا جاتا ہے اور 1 مکروگرام RNA کے ساتھ 37°C پر چار گھنٹے تک انکیوبیٹ کیا جاتا ہے۔

انکیوبیشن کے بعد، RNA کو ایثیڈیم براومائیڈ سے رنگ لگایے گئے ایگاروس گیل پر آلے ہوئے بنڈ کے طور پر دیکھا جاتا ہے تاکہ وضاحت کی جائے کہ نظری RNase غیر موجود ہے۔

جسمانی صافی

صافی ≥95% ہے جیسا کہ SDS-پولیاکرائلیم گیل کومناسی بلیو رنگنے کے ذریعے جدgm کی گئی ہے۔

استعمال کی نوٹ

Ribonuclease Inhibitor وسیع pH رینج (pH5.5-9) میں سرگرم ہے۔ معیاری RT اور in vitro ترانسکرپشن میں Ribonuclease Inhibitor کو آخری تراکون 1u/ul پر استعمال کیا جاتا ہے۔