انتہائی خالص ربونوکلیز روک تھام حل - rnase روک تھام 40u/μl، سی ڈی این اے کی ترکیب اور مالیکیولر حیاتیات کی ایپلی کیشنز میں آر این اے تحفظ کے لئے بہترین
- تعارف
تعارف
مصنوعات کی تفصیل
ہمارا ہائیلی پیور رائبو نیوکلیز انحیبیٹر حل متعارف کروا رہے ہیں، ایک اعلیٰ معیار کا ریجنٹ جوrnase inhibitor رناز انفیکٹرانتہائی مرتکز 40 یونٹس/μl میں پیش کرتا ہے۔ یہ حل خاص طور پر مختلف مالیکیولر بایولوجی کے طریقوں میں RNA ہینڈلنگ کے دوران رائبو نیوکلیز کے خلاف زیادہ سے زیادہ تحفظ فراہم کرنے کے لیے انجینئر کیا گیا ہے۔
اہم خصوصیات
غیر معمولی پاکیزگی: ربونوکلیز روکنے والا دوبارہ پیدا ہوتا ہے اور سخت طور پر خالص ہوتا ہے تاکہ اعلی سطح کی پاکیزگی کو یقینی بنایا جاسکے ، جس سے آپ کے تجربات میں کوئی مداخلت نہ ہو۔
انتہائی مرکب فارمولا: 40 یو / μl حراستی میں فراہم کیا جاتا ہے، یہ روک تھام سخت ایپلی کیشنز میں موثر استعمال کی اجازت دیتا ہے جہاں rnase کے بھی نشانات نتائج کو سمجھوتہ کرسکتے ہیں.
وسیع سپیکٹرم سرگرمی: روک تھام مؤثر طریقے سے rnases A، B، C، اور دیگر endo اور exoribonucleases کی ایک وسیع رینج کو غیر فعال کرتا ہے، آپ کے rna کے نمونے کو خراب ہونے سے بچاتا ہے.
مستحکم اور فعال: درجہ حرارت اور پی ایچ کے حالات کی ایک حد میں استحکام کے لئے تیار کیا گیا ہے، روک تھام اسٹوریج کے دوران اور مختلف تجرباتی پروٹوکول کے دوران فعال رہتا ہے۔
مطابقت: خودکار نظاموں اور ہاتھ سے تیار کردہ رد عمل کے ساتھ استعمال کے لئے مثالی ، یہ سی ڈی این اے ترکیب اور نیوکلک ایسڈ ہیرا پھیری کی تکنیک میں عام طور پر استعمال ہونے والے بفر اور انزائمز کے ساتھ مکمل طور پر مطابقت رکھتا ہے۔
درخواستیں
سی ڈی این اے کی ترکیب: ریورس ٹرانسکرپشن رد عمل کے دوران آر این ایز آلودگی کو روکنے کے لئے ضروری ہے، اس طرح سنتھیزڈ سی ڈی این اے کی پیداوار اور سالمیت کو بہتر بناتا ہے۔
آر این اے الگ تھلگ اور صاف کرنا: الگ تھلگ ہونے سے پہلے اور بعد میں آر این اے کی سالمیت کو برقرار رکھنے کے لئے آر این اے نکالنے کی کٹس اور صاف کرنے کے کام کے بہاؤ میں اہم جزو۔
شمالی دھندلاؤ: رنا کی سرگرمی کو روکنے سے اعلی معیار کی آر این اے کی منتقلی اور ہائبرڈائزیشن کو یقینی بناتا ہے جو جھلیوں پر آر این اے کو خراب کرسکتا ہے۔
qpcr اور rt-qpcr: مقدار کے پی سی آر اور ریورس ٹرانسکرپشن کی مقدار کے پی سی آر ٹیسٹ میں آر این اے ٹیمپلیٹس کی حفاظت کرتا ہے ، حساسیت اور خاصیت کو بڑھا دیتا ہے۔
آر این اے پروٹین تعاملات کے مطالعے: شریک مدافعتی (ریپ) اور دیگر آر این اے پروٹین تعاملات کے تجربات کے دوران آر این اے مالیکیولوں کو محفوظ رکھتا ہے۔
ماخذ
ای. کولی سٹریم جو ایک ریکومبینٹ کلون کا اظہار کرتا ہے جو انسانی مشکوک سے ربونوکلیز روکنے والے جین کو لے جاتا ہے۔
حراستی
40 یو/ایم ایل
یونٹ کی تعریف
ایک یونٹ کو ریبونوکلیز اے کے 5 این جی کی سرگرمی کو 50 فیصد تک روکنے کے لئے ریکومبیننٹ ریبونوکلیز انفیکٹر کی ضرورت کی مقدار کے طور پر بیان کیا گیا ہے۔
سرگرمی کو سائٹائڈین 23- سائیکلک مونو فاسفیٹ کی ہائیڈولائز کی روک تھام کے ذریعے ریبونوکلیز اے کی طرف سے ماپا جاتا ہے.
ذخیرہ کرنے کا بفر
20 ملی میٹر ہیپس کوہ (ph7.6) ، 50 ملی میٹر کلور، 8 ملی میٹر ڈی ٹی ٹی، 50 فیصد گلیسرول (v/v)
ذخیرہ
-20°C پر محفوظ کریں
کوالٹی کنٹرول
اینڈونوکلیز کی عدم موجودگی
لیمبڈا ڈی این اے کا 1μg 200 یونٹس ریبونوکلیز انفیکٹر کے ساتھ 37°C پر 16 گھنٹے تک انکیوبیٹ کیا جاتا ہے۔
انکیوبیشن کے بعد، لامبڈا ڈی این اے کو ایتھڈیم برومائڈ سے رنگے ہوئے ایگروز جیل پر برقرار ہونے کے طور پر دیکھا جاتا ہے تاکہ یہ معلوم ہو سکے کہ اندرونی نیوکلیز موجود نہیں ہے۔
نیکاز کی عدم موجودگی
1μg قسم I supercoiled pbr322 200 یونٹس ribonuclease inhibitor کے ساتھ 37 °C پر 4 گھنٹے کے لئے incubated ہے.
انکیوبیشن کے بعد، سپر وولڈ ڈی این اے کو ایتھڈیم برومائڈ سے رنگے ہوئے ایگروز جیل پر دیکھا جاتا ہے تاکہ یہ معلوم ہو سکے کہ کوئی نمایاں نشان یا کٹ نہیں ہے۔
ایگزونوکلیز کی عدم موجودگی
لیمبڈا ڈی این اے/ہندی آئی آئی مارکرز کے 1μg کو 200 یونٹس ریبونوکلیز انفیکٹر کے ساتھ 37°C پر 16 گھنٹے تک انکیوبیٹ کیا جاتا ہے۔
انکیوبیشن کے بعد، لامبڈا ڈی این اے/ہندی آئی آئی مارکرز کو 1 فیصد اگروز جیل سے الگ کیا جاتا ہے اور ایتھڈیم برومائڈ سے رنگا جاتا ہے۔ مارکرز بغیر کسی ملبہ کے برقرار بینڈ کے طور پر رہتے ہیں۔
rnase کی عدم موجودگی اور پوشیدہ rnase
rnase سرگرمی کی موجودگی کے لئے ٹیسٹ کرنے کے لئے، rnase کی 1ug 200 یونٹس ribonuclease inhibitor کے ساتھ 37 °C پر 4 گھنٹے کے لئے incubated ہے.
انکیوبیشن کے بعد، RNA کو ایتھڈیم برومائڈ سے رنگے ہوئے ایگروز جیل پر ایک برقرار بینڈ کے طور پر دیکھا جاتا ہے تاکہ یہ معلوم ہو سکے کہ کوئی بھی نظر آنے والا rnase موجود نہیں ہے۔
لیٹنٹ آر این ایز سرگرمی کی موجودگی کی جانچ کرنے کے لئے، 200 یونٹس ربونوکلیز انفیکٹر کو 70 °C پر 15 منٹ تک گرمی سے منقطع کیا جاتا ہے اور 37 °C پر 1 یوگ آر این اے کے ساتھ 4 گھنٹے تک انکیوبیٹ کیا جاتا ہے۔
انکیوبیشن کے بعد، RNA کو ایتھڈیم برومائڈ سے رنگے ہوئے ایگروز جیل پر ایک برقرار بینڈ کے طور پر دیکھا جاتا ہے تاکہ یہ معلوم ہو سکے کہ کوئی بھی نظر آنے والا rnase موجود نہیں ہے۔
جسمانی پاکیزگی
پاکیزگی ≥95٪ ہے جو کوماسی نیلے رنگ کے رنگ کے ساتھ ایس ڈی ایس-پولیاکریلامائڈ جیل کے ذریعہ فیصلہ کیا گیا ہے۔
استعمال کا نوٹ
ریبونوکلیز انفیکٹر وسیع پی ایچ رینج (پی ایچ 5.5-9) پر فعال ہے۔ معیاری آر ٹی اور ان وٹرو ٹرانسکرپشن میں ریبونوکلیز انفیکٹر کا استعمال 1 یو/ یو ایل کی حتمی حراستی میں کیا جاتا ہے۔