інгібітор рибонуклеази, інгібітор рнази

рекомбінантний інгібітор рибонуклеази плаценти людини, 40 у/мкл

джерело

штам E. coli, що виражає рекомбінантний клон, який несе ген інгібітора рибонуклеази з плаценти людини.

концентрація

40 е/мл.

Определіння одиниці

одна одиниця визначається як кількість необхідного інгібітора рекомбінантної рибонуклеази, що інгібує активність 5ng рибонуклеази а на 50%.

активність вимірюється шляхом інгібції гідролізу цитидіна 23-циклічного монофосфату рибонуклеазою а.

буфер зберігання

20 мм хепес-кох (ph7.6), 50 мм кл, 8 мм дтт, 50% (в/в) гліцерину

зберігання

зберігати при -20°C

контроль якості

відсутність ендонуклеази
1 мкг Ламбда-ДНК інкубується 200 одиницями інгібітора рибонуклеази протягом 16 годин при 37°C.
Після інкубації, Ламбда-ДНК зображається як нескладна на гелі агарози, зафарбованому бромідом етидію, для перевірки відсутності видимих ендонуклеаз.

відсутність ніказу
1 мкг pbr322 типу i, що викручено на суперкружку, інкубується 200 одиницями інгібітора рибонуклеази протягом 4 годин при 37°C.
Після інкубації надкручену ДНК візуалізують на гелі агарози, зафарбованому бромідом етидію, щоб перевірити відсутність видимих порізків або порізків.

відсутність екзонуклеази
1 мкг маркерів Ламбда-ДНК/Індііі інкубується 200 одиницями інгібітора рибонуклеази протягом 16 годин при 37°C.
Після інкубації маркері Ламбда-ДНК/ІндііІІ відділяються 1% гелем агарози і забарвлені бромідом етидію. Маркері залишаються нетрохманими смугами без розмалювання.

відсутність рнази та латентної рнази
Для тестування на наявність активності рнази 1 г рна інкубується 200 одиницями інгібітора рибонуклеази протягом 4 годин при 37°C.
Після інкубації РНК візуалізується як нескладна смуга на гелі агарози, зафарбованому бромідом етидію, щоб перевірити відсутність видимих рназ.
Для тестування на наявність латентної активності рнази 200 одиниць інгібітора рибонуклеази тепло-денурують при 70°C протягом 15 хвилин і інкубують 1 уг рна протягом 4 годин при 37°C.
Після інкубації РНК візуалізується як нескладна смуга на гелі агарози, зафарбованому бромідом етидію, щоб перевірити відсутність видимих рназ.

фізична чистота

Чистота ≥ 95%, як це оцінюється гелем sds-полякриламиду з синім забарвленням.

Записка про використання

Стандартний рт і in vitro транскрипція використовує інгібітор рибонуклеази в кінцевій концентрації 1у/ уль.

порядок