ang mga gamot na ito ay may mga

rekombinant human placenta ribonuclease inhibitor, 40u/μl

pinagmulan

e. coli strain na nagpapahayag ng isang recombinant clone na nagdadala ng ribonuclease inhibitor gene mula sa placenta ng tao.

konsentrasyon

40 u/μl.

kahulugan ng yunit

Ang isang yunit ay tinukoy bilang ang halaga ng rekombinant na ribonuclease inhibitor na kinakailangan upang pigilan ang aktibidad ng 5ng ng ribonuclease a ng 50%.

Ang aktibidad ay sinusukat sa pamamagitan ng paghinto ng hydrolysis ng cytidine 23-cyclic monophosphate sa pamamagitan ng ribonuclease a.

buffer ng imbakan

20mm hepes-koh ((ph7.6), 50mm kcl, 8mm dtt, 50% ((v/v) glycerol

pag-iimbak

mag-imbak sa -20°c

kontrol sa kalidad

kawalan ng endonuclease
Ang 1μg ng lambda dna ay inkubado sa 200 yunit ng ribonuclease inhibitor sa loob ng 16 oras sa 37°c.
Pagkatapos ng pag-init, ang lambda DNA ay nakikita na buo sa isang ethidium bromide-stained agarose gel upang matiyak ang kawalan ng nakikita na endonuclease.

kawalan ng nikase
Ang 1μg ng pbr322 na supercoiled ng type i ay inkubado sa 200 yunit ng ribonuclease inhibitor sa loob ng 4 oras sa 37°c.
Pagkatapos ng pag-init, ang supercoiled DNA ay nakikita sa isang ethidium bromide-stained agarose gel upang matiyak na walang nakikita na mga nicking o cut.

kawalan ng exonuclease
Ang 1μg ng mga marker ng lambda dna/hindiii ay inkubado sa 200 yunit ng inhibitor ng ribonuclease sa loob ng 16 oras sa 37°c.
Pagkatapos ng pag-init, ang mga marker ng lambda DNA/hindiii ay hiwalay ng 1% agarose gel at pinakilab na may ethidium bromide. Ang mga marker ay nananatiling hindi nasira na mga banda nang walang pag-aalis.

walang rnase at latent rnase
upang subukan ang pagkakaroon ng aktibidad ng rnase, ang 1 ug ng rna ay inkubado sa 200 yunit ng ribonuclease inhibitor sa loob ng 4 oras sa 37°c.
Pagkatapos ng pag-init, ang RNA ay nakikita bilang isang buo na banda sa isang ethidium bromide-stained agarose gel upang matiyak ang kawalan ng nakikita na rnase.
upang subukan ang pagkakaroon ng latent na aktibidad ng rnase, 200unit ng inhibitor ng ribonuclease ay init-denatured sa 70°c sa loob ng 15 minuto at inubado sa 1ug ng rna sa loob ng 4 oras sa 37°c.
Pagkatapos ng pag-init, ang RNA ay nakikita bilang isang buo na banda sa isang ethidium bromide-stained agarose gel upang matiyak ang kawalan ng nakikita na rnase.

pisikal na kalinisan

ang kalinisan ay ≥95% ayon sa sds-polyacrylamide gel na may coomassie blue staining.

tala ng paggamit

Ang standard na rt at in vitro transcription ay gumagamit ng ribonuclease inhibitor sa isang pangwakas na konsentrasyon ng 1u/ ul.

pagkakasunud-sunod