la taq dna polymerase, mahabang pcr polymerase
- pagpapakilala
pagpapakilala
Mahabang PCRtaq dna polymerase, 5U/μl
paglalarawan
ang taq dna polymerase ay tatlong beses na mas mataas kaysa sa taq dna polymerase
Long pcr polymerase na sinergetically generate long pcr products na may mas mataas na output at fidelity kaysa sa taq dna polymerase lamang.
Ang katapat ng pcr ay tatlong beses na mas mataas kaysa sa taq dna polymerase.
ang la taq ay na-optimize para sa pagbuo ng napakahabang mga amplicon: hanggang 40 kb sa viral DNA at hanggang 15 kb sa mga template ng genomic DNA. Ang espesyal na pormula ng la taq buffer ay nag-iingat ng DNA mula sa depurine at nicking sa panahon ng mahabang thermal cycling.
Ang mga produkto ng PCR na nabuo sa la taq DNA polymerase ay karamihan ay 3'-da tailed, na maaaring klon sa ta vector.
mga katangian
- mga produkto ng mahabang pcr
- hanggang sa 40 kb na may viral DNA bilang template
- hanggang sa 15 kb na may genomic DNA bilang template
- angkop para sa mga template na may mataas na GC hanggang 85% GC.
- Ang katapat ay tatlong beses na mas mataas kaysa sa taq DNA polymerase.
- mataas na ani. naglalaman ng mga binago na nucleotide.
kontrol sa kalidad
functionally na nasubok sa pagbuo ng 40 kb amplicon na may lambda DNA bilang template.
konsentrasyon: 5 u/μl
pag-iimbak
storage buffer: ang enzyme ay ibinibigay sa: 20mm tris-hcl (ph 8.0); 0.1mm edta; 1mm dtt; 100mm kcl; mga stabilizer; 50% glycerol.
Paglalaan: maglalaan sa -20°C.
reaksyon
Reaksyon pcr halo na itinakda at inirerekomenda thermal cycling kondisyon: ang daloy ay lamang ng isang halimbawa na kumuha ng isang 20kb tao genomic DNA bilang ang template, na lamang para sa isang reference, ito ay maaaring ayusin ayon sa haba at pagkakasunud-sunod ng template at ang primer.
bahagi | dami | pangwakas na konsentrasyon |
template | dna < 1 ug | ayon sa kinakailangan |
ang unang pag-primar sa harap (10 μm) | 1 μl | 0.2-0.4 μm bawat isa |
ang reverse primer (10 μm) | 1 μl | 0.2-0.4 μm bawat isa |
10x ang buffer ng taq | 5 μl | 1x |
2.5 mm dntps | 4 μl | 0.2 mm |
la taq dna polymerase | 0.5μl | 2.5 yunit |
ddh2o hanggang sa huling dami | 50μl | hindi naaangkop |
94°c 3 minuto
94°c 30 segundo
55°c 30 sec 30 siklo
72°c 1 minuto
72°c 5 minuto.
pagkakasunud-sunod
pc08 | la taq dna polymerase | mahabang pcr taq dna polymerase, 5u/μl |