malamig na sensitibo sa malamig na mutant na hotstar taq dna polymerase
- pagpapakilala
pagpapakilala
paglalarawan ng produkto:
Ang aming Cold sensitive mutant HotStarttaq dna polymeraseay isang natatanging variant ng tradisyonal na Taq polymerase, na ininhinyero na may isang cold-sensitive mutation na pumipigil sa aktibidad sa temperatura ng silid. Ang makabagong disenyo na ito ay tinitiyak na ang enzyme ay nananatiling hindi aktibo hanggang sa paunang hakbang ng denaturation ng PCR, na nagpapababa sa hindi tiyak na amplification at pagbuo ng primer-dimer.
mga pangunahing katangian:
- malamig-sensitive na mutation para sa kinokontrol na pagpapatupad
- walang aktibidad sa temperatura ng silid, na binabawasan ang di-espisipiko na pagpapalawak
- pinahusay na pagiging partikular at pag-aani ng target na DNA
- angkop para sa touch-down pcr at gradient pcr
- pinahusay ang pagganap sa multiplex pcr reaction
- angkop para sa mga awtomatikong sistema ng paghawak ng likido
mga aplikasyon:
- touch-down pcr at gradient pcr
- multiplex pcr para sa sabay-sabay na pagpapalawak ng maraming mga target
- mga awtomatikong pag-setup ng PCR gamit ang mga robot na nagmamaneho ng likido
- mga pagsusuri sa diagnosis na nangangailangan ng mataas na pagiging partikular
- mga aplikasyon sa pananaliksik na nagsasangkot ng mga kumplikadong o mababang dami ng mga template
- forensic at klinikal na pagsubok kung saan ang pagiging partikular ay mahalaga
Ang aming malamig na sensitibo na hotstart mutant taq dna polymerase ay nag-aalok ng isang makabuluhang kalamangan sa mga aplikasyon ng PCR sa pamamagitan ng pagbibigay ng isang malinis na pagsisimula sa proseso ng pagpapalakas. Ang kinokontrol na pag-activate nito ay tinitiyak ang isang mas naka-target at mahusay na
paglalarawan
Ang csm taq polymerases (cold sensitive mutant taq polymerases) ay isang uri ng hotstar polymerase. pinagmulan mula sa mutant na E. coli. Ang csm taq polymerase hindi katulad ng monoclonal antibody based hot start taq o kemikal na binago hot start taq, ang cold taq ay ang cold sensitive
Ang malamig na sensitibo mutant taq polymerases ay dinisenyo para sa mainit na pagsisimula ng PCR, hindi ito sa mababang temperatura. Nag-aalok ito ng mahusay na pagiging partikular at dalawang beses na mas mataas na katapat kaysa sa ligaw na uri ng taq. Ito ay dinisenyo para sa PCR na may mga mahirap na template tulad ng mga
Ang malamig na sensitibo mutant taq polymerases ay partikular na angkop sa primer extension ng mga marker ng single nucleotide polymorphism (snp).
Ang malamig na sensitibo mutant taq polymerases ay nagpapanatili ng mahusay na pagiging partikular at minimal na background kahit sa mga kondisyon na dinisenyo para sa mataas na output. Sa katunayan, kahit sa mga template ng genomic, ang enzyme ay maaaring magamit sa mgcl2+ concentrations na mataas hanggang 10 mm.
Ang malamig na sensitibo mutant taq polymerases ay may kakayahang mag-extend sa pamamagitan ng mga mahirap na rehiyon, halimbawa, mga rehiyon, na kinabibilangan ng mga inverted tandem repeats at yaong may mataas na halaga ng pangalawang istraktura.
Ang malamig na sensitibo mutant taq polymerases ay gumagana sa isang ganap na natatanging paraan, na nagsasangkot ng pinahusay na pagpili ng nucleotide sa aktibong site, at isang mas mababang rate ng mis-match extension, nangangahulugang ang perpektong naka-align na mga primer lamang ang mapalawak. bilang
mga aplikasyon
- Hot start pcr pagpapalakas
- ang espesipikong pagpapalawak ng kumplikadong cdna at genomic template, para sa pagpapalawak ng mga mahirap na template, tulad ng mga fragment na may-gc-rich at microsatellites
- primer extension ng mga marker ng snp
- pagpapalawak ng mga target ng genomic DNA hanggang 10 kb na may mataas na katapat, pagiging partikular at sensitibo
- pagpapalawak mula sa mababang template ng kopya ng numero ng DNA, mataas na throughput hot start pcr na may mataas na pagiging tiyak, sensitibo at output
- routine diagnostic hot start PCR na nangangailangan ng mataas na reproducibility.
- real-time pcr
- maraming pcr
- pagbuo ng mga produkto ng PCR para sa pag-clone
kontrol sa kalidad
- walang functional na aktibidad ng endonuclease na may double at single strand;
- ang kalinisan> 99% pagsubok sa pamamagitan ng sds gel electrophoresis;
- Ang bawat lote ng csm taq dna polymerase ay sinusuri para sa pagpapalawak mula sa isang maliit na 10 ng ng human genomic dna;
- mapanatili ang buong aktibidad sa temperatura ng silid sa loob ng isang linggo;
- walang natitirang DNA ng host.
ang halo ng reaksyon ay naka-set up
bahagi | dami | pangwakas na konsentrasyon |
template | dna < 1 ug | ayon sa kinakailangan |
ang unang pag-primar sa harap (10 μm) | 2 μl | 0.4 μm |
ang reverse primer (10 μm) | 5 μl | 1x |
2.5mm bawat dntpmix | 4 μl | 200μm bawat isa |
csm taq dna polymerase, 5u/μl | 0.4 μl | 2 yunit |
ng2o sa huling dami | 50μl | hindi naaangkop |
konsentrasyon: 5 u/μl
pag-iimbak: mag-imbak sa -20°c
pakete: bulk
pagkakasunud-sunod
pc05 | csm taq DNA polymerase | malamig na sensitibo mutant taq dna polymerases, 5u/μl |