Cold sensitive mutant hotstar Taq DNA Polymerase
- Panimula
Panimula
Paglalarawan ng Produkto:
Ang aming Cold sensitive mutant HotStart taq dna polymerase ay isang natatanging variant ng tradisyonal na Taq polymerase, na ininhinyero na may isang cold-sensitive mutation na pumipigil sa aktibidad sa temperatura ng silid. Ang makabagong disenyo na ito ay tinitiyak na ang enzyme ay nananatiling hindi aktibo hanggang sa paunang hakbang ng denaturation ng PCR, na nagpapababa sa hindi tiyak na amplification at pagbuo ng primer-dimer.
Mga Pangunahing katangian:
- Mutasyong cold-sensitive para sa kontroladong pagsisimula
- Walang aktibidad sa temperatura ng kuwarto, minimizando ang hindi intendenteng pag-amplify
- Pinabuti ang espesipikidad at bunga ng target na DNA
- Kaya ng touch-down PCR at gradient PCR
- Pinabuti ang pagganap sa multiplex PCR reaksyon
- Ideal para sa mga sistemang automatikong likido handling
Mga aplikasyon:
- Touch-down PCR at gradient PCR
- Multiplex PCR para sa katulad na pag-amplify ng maraming target
- Automatikong mga pagsasaayos ng PCR gamit ang mga robot na nag-aalsa ng likido
- Mga diagnostic assay na kailangan ng mataas na katuturan
- Mga aplikasyon sa pananaliksik na sumasangkot sa maaaring o mababang-abundansiya na template
- Pagsusuri at klinikal na pagsubok kung saan ang katuturan ay pinakamahalaga
Ang aming Cold sensitive mutant HotStart Taq DNA Polymerase ay nagbibigay ng malaking benepisyo sa mga aplikasyon ng PCR sa pamamagitan ng pagbibigay ng maayos na simula sa proseso ng pagpaparami. Ang kinontrol na pagsisimula nito ay nagiging mas direksyonado at epektibong resulta, gumagawa ito upang maging mahalagang yaman para sa mga laboratoryo na humihingi ng optimisasyon sa kanilang mga workflow ng PCR.
Paglalarawan
CSM Taq polymerases (Cold sensitive mutant Taq polymerases) ay isang uri ng HotStar Polymerase. Nagmula sa mutant E. coli. Hindi tulad ng hot start Taq na batay sa monoklonal antibody o kimikal na binago na hot start Taq, Cold Taq ay ang cold sensitive mutant Taq. Ito'y nakikipag-hot start sa buong siklo ng pagpaparami.
Ang Cold sensitive mutant Taq polymerases ay disenyo para sa Hot Start PCR, hindi ito sa mababang temperatura. Nagdadala ito ng mahusay na espesipikidad at dalawang beses ang katitikan kaysa sa wild-type Taq. Disenyo ito para sa PCR na may mahirap na template tulad ng GC-rich fragments at microsatellites.
Ang Cold sensitive mutant Taq polymerases ay partikular na maayos para sa pagpapalawig ng primer ng Single Nucleotide Polymorphism (SNP) markers.
Ang Cold sensitive mutant Taq polymerases ay nakakatago ng mahusay na espesipikidad at minumal na background kahit sa mga kondisyon na disenyo para sa mataas na bunga. Sa katunayan, kahit sa mga genomic templates, maaaring gamitin ang enzim na ito kasama ang MgCl2+ konsentrasyon hanggang 10 mM.
Ang Cold sensitive mutant Taq polymerases ay makakapag-extend sa pamamagitan ng mahirap na rehiyon, halimbawa, mga rehiyon na kasama ang inverted tandem repeats at mga ito na may mataas na dami ng secondary structure.
Ang Cold sensitive mutant Taq polymerases ay gumagana nang ganap na unikong paraan, kumakatawan sa pinagaling na pagsasama ng nucleotide sa aktibong lugar, at mababang rate ng mismong pag-extend, ibig sabihin na ang mga perpektong nakalinya lamang na primers ang magiging extended. Dahil dito, maaaring bigyan ng mas mataas pa ang espesipikidad ng enzyme kaysa sa teknikong hot-start (manual o awtomatiko) nang walang pangangailangan ng mapagpipithang pre-incubation steps.
Paggamit
- Pag-amplify ng Hot start PCR
- Espesipikong pag-amplify ng komplikseng cDNA at genomic template, para sa pag-amplify ng mga mahirap na template tulad ng mga GC-rich fragments at microsatellites
- Primer extension ng mga marker ng SNP
- Pag-amplify ng mga target ng genomic DNA hanggang 10 kb na may mataas na katwiran, espesipikidad, at sensitibidad
- Pag-amplify mula sa template ng DNA na may mababang bilang ng kopya, mataas na saklaw na Hot Start PCR na may mataas na espesipikidad, sensitibidad, at bunga
- Karaniwang diagnostikong Hot Start PCR na kailangan ng mataas na reproduktibilidad.
- Real-Time PCR
- Maramihang PCR
- Paggawa ng mga produkto ng PCR para sa TA cloning
Kontrol ng Kalidad
- walang functional na aktibidad ng endonuclease na may double at single strand;
- ang kalinisan> 99% pagsubok sa pamamagitan ng sds gel electrophoresis;
- Bawat sakop ng CSM Taq DNA Polymerase ay inuusisa para sa pag-amplify mula sa kakaunti lang na 10 ng ng human genomic DNA;
- mapanatili ang buong aktibidad sa temperatura ng silid sa loob ng isang linggo;
- walang natitirang DNA ng host.
ang halo ng reaksyon ay naka-set up
Komponente | Volume | pangwakas na konsentrasyon |
Template | DNA <1 ug | ayon sa kinakailangan |
ang unang pag-primar sa harap (10 μm) | 2 μl | 0.4 μM |
ang reverse primer (10 μm) | 5 μl | 1x |
2.5mM bawat dNTPmix | 4 μl | 200μM bawat |
CSM Taq DNA polymerase, 5U\/μl | 0.4 μl | 2 yunit |
ng 2o sa huling dami | 50μl | hindi naaangkop |
konsentrasyon : 5 u/μl
Imbakan : Iimbak sa -20°C
PACKAGE : bulk
Order
PC05 | csm Taq DNA Polymerase | Mutante na sensitibo sa malamig na Taq DNA Polymerase, 5U\/μl |