เอนไซม์ Cold sensitive mutant HotStart Taq DNA Polymerase
- บทนำ
บทนำ
คำอธิบายผลิตภัณฑ์:
โพลีเมอเรส HotStart ที่ไวต่อความเย็นของเรา taq DNA โพลิเมเรซ เป็นรูปแบบที่ไม่เหมือนใครของโพลีเมอเรส Taq แบบดั้งเดิม ซึ่งถูกออกแบบด้วยการกลายพันธุ์ที่ไวต่อความเย็นที่ป้องกันไม่ให้มีการทำงานที่อุณหภูมิห้อง การออกแบบที่เป็นนวัตกรรมนี้ทำให้เอนไซม์ยังคงไม่ทำงานจนกว่าจะถึงขั้นตอนการทำให้เสถียรเริ่มต้นของ PCR ซึ่งช่วยลดการขยายพันธุ์ที่ไม่เฉพาะเจาะจงและการเกิดไดเมอร์ของไพรเมอร์.
คุณสมบัติหลัก:
- การกลายพันธุ์แบบ cold-sensitive สำหรับการเปิดใช้งานที่ควบคุมได้
- ไม่มีกิจกรรมที่อุณหภูมิห้อง ลดการขยายตัวที่ไม่จำเพาะลง
- เพิ่มความจำเพาะและปริมาณของ DNA เป้าหมาย
- เหมาะสำหรับ touch-down PCR และ gradient PCR
- ประสิทธิภาพดียิ่งขึ้นในปฏิกิริยา multiplex PCR
- เหมาะสำหรับระบบการจัดการของเหลวอัตโนมัติ
การใช้งาน:
- Touch-down PCR และ gradient PCR
- Multiplex PCR สำหรับการขยายเป้าหมายหลายตัวพร้อมกัน
- การตั้งค่า PCR อัตโนมัติโดยใช้หุ่นยนต์จัดการของเหลว
- การทดสอบวินิจฉัยที่ต้องการความจำเพาะสูง
- การประยุกต์ใช้งานในการวิจัยที่เกี่ยวข้องกับเทมเพลตที่ซับซ้อนหรือปริมาณน้อย
- การทดสอบทางนิติเวชและคลินิกที่ความจำเพาะเป็นสิ่งสำคัญที่สุด
HotStart Taq DNA Polymerase แบบ Cold sensitive mutant ของเราให้ประโยชน์อย่างมากในแอปพลิเคชัน PCR โดยการมอบการเริ่มต้นที่สะอาดให้กับกระบวนการขยายพันธุกรรม การเปิดใช้งานที่ควบคุมได้ทำให้ผลลัพธ์แม่นยำและมีประสิทธิภาพมากขึ้น ทำให้มันกลายเป็นทรัพยากรที่มีค่าสำหรับห้องปฏิบัติการที่ต้องการปรับปรุงกระบวนการทำงานของ PCR
คำอธิบาย
CSM Taq polymerases (Cold sensitive mutant Taq polymerases) เป็นประเภทหนึ่งของ HotStar Polymerase มาจาก E. coli ที่ถูกดัดแปลงพันธุกรรม CSM Taq polymerase แตกต่างจาก Hot Start Taq ที่ใช้แอนติบอดีโมโนโคลนอล หรือ Hot Start Taq ที่ถูกดัดแปลงทางเคมี Cold Taq เป็น Cold Sensitive Mutant Taq มันยังคงความสามารถของ Hot Start ตลอดวงจรการขยายพันธุกรรม
เอนไซม์โพลิเมอเรส Taq ที่เป็นมิวแทนต์ไวต่อความเย็นถูกออกแบบมาสำหรับการใช้งาน Hot Start PCR โดยจะไม่ทำงานที่อุณหภูมิต่ำ ให้ความจำเพาะเจาะจงยอดเยี่ยมและมีความแม่นยำสูงกว่า Taq ชนิดป่าสองเท่า เหมาะสำหรับการทำ PCR กับเทมเพลตที่ยาก เช่น ชิ้นส่วนที่มี GC หนาแน่นและไมโครซาเทลไลท์
เอนไซม์โพลิเมอเรส Taq มิวแทนต์ไวต่อความเย็นเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการขยายไพรเมอร์ของตัวบ่งชี้ Single Nucleotide Polymorphism (SNP)
เอนไซม์โพลิเมอเรส Taq มิวแทนต์ไวต่อความเย็นรักษาความจำเพาะเจาะจงยอดเยี่ยมและความเป็นพื้นหลังต่ำแม้ในเงื่อนไขที่ออกแบบมาสำหรับผลผลิตสูง อันที่จริง แม้ในเทมเพลตจีโนม เอนไซม์สามารถใช้งานได้ด้วยความเข้มข้นของ MgCl2 สูงถึง 10 mM
เอนไซม์โพลิเมอเรส Taq มิวแทนต์ไวต่อความเย็นสามารถขยายผ่านพื้นที่ที่ยากได้ เช่น พื้นที่ที่มีซ้ำกันแบบกลับกลอกและพื้นที่ที่มีโครงสร้างรองระดับสูง
เอนไซม์โพลิเมอเรส Taq ที่ไวต่อความเย็นทำงานด้วยวิธีการที่ไม่เหมือนใคร โดยเกี่ยวข้องกับการเลือกนิวคลีโอไทด์ที่ดีขึ้นที่ตำแหน่งปฏิกิริยา และอัตราการขยายตัวของความผิดพลาดที่ลดลงอย่างมาก ซึ่งหมายความว่าเฉพาะไพรเมอร์ที่จับได้สมบูรณ์เท่านั้นที่จะถูกขยาย อันเป็นผลให้เอนไซม์สามารถให้ความจำเพาะแม่นยำกว่าเทคนิค hot-start (แบบทำเองหรืออัตโนมัติ) โดยไม่ต้องมีขั้นตอนการเตรียมตัวเบื้องต้นที่ลำบาก
การประยุกต์ใช้
- การขยายตัวด้วย PCR Hot Start
- การขยายตัวเฉพาะเจาะจงสำหรับ cDNA และเทมเพลตจีโนมที่ซับซ้อน สำหรับการขยายเทมเพลตที่ยาก เช่น ชิ้นส่วนที่มี GC สูงและไมโครซาเทลไลท์
- การขยายตัวของไพรเมอร์สำหรับตัวบ่งชี้ SNP
- การขยายตัวของ DNA เจเนติกข้ามเป้าหมายขนาดยาวถึง 10 kb ด้วยความซื่อสัตย์ ความจำเพาะ และความไวสูง
- การขยายตัวจากเทมเพลต DNA ที่มีจำนวนคัดลอกต่ำ การทำ PCR Hot Start ประสิทธิภาพสูงด้วยความจำเพาะ ความไว และผลผลิตสูง
- การทำ PCR Hot Start วินิจฉัยปกติที่ต้องการความคงที่สูง
- Real-Time PCR
- การขยายตัวหลายครั้ง (Multiple PCR)
- การสร้างผลิตภัณฑ์ PCR สำหรับการโคลน TA
ควบคุมคุณภาพ
- การไม่มีกิจกรรม endonuclease แบบมีสายใยคู่และสายใยเดียว
- การทดสอบความบริสุทธิ์> 99% โดยการตรวจไฟฟ้าเจล sds
- แต่ละล็อตของ CSM Taq DNA Polymerase จะถูกทดสอบสำหรับการขยายตัวจากปริมาณน้อยกว่า 10 นาโนกรัมของ DNA เจนอมิกมนุษย์;
- รักษากิจกรรมเต็มที่ในอุณหภูมิห้องหนึ่งสัปดาห์
- ไม่มีซาก DNA ของเจ้าบ้าน
การตั้งผสมปฏิกิริยา
ชิ้นส่วน | ระดับเสียง | สังกัดสุดท้าย |
เทมเพลต | DNA <1 ug | ตามความต้องการ |
ไพรเมอร์ด้านหน้า (10 μm) | 2 μl | 0.4 μM |
ผ่าตัดแบบกลับ (10 μm) | 5 μl | 1x |
2.5mM สารผสม dNTP แต่ละชนิด | 4 μl | 200μM แต่ละชนิด |
CSM Taq DNA polymerase, 5U/μl | 0.4 μl | 2 ยูนิต |
ธ 2o ถึงปริมาณสุดท้าย | 50μl | ไม่ใช้ |
ความเข้มข้น : 5 u/μl
การจัดเก็บ : เก็บรักษาที่ -20°C
แพ็คเกจ : ขนของ
สั่งซื้อ
PC05 | csm Taq DNA Polymerase | เอนไซม์ Taq DNA Polymerase สายพันธุ์ที่ไวต่อความเย็น 5U/μl |