เบนโซนิวเคลส์
- บทนำ
บทนำ
เอนไซม์เบนโซนูคลีเอส ชนิดรีคอมไบแนท, เอนไซม์ย่อยนิวคลีอัสด้วยทั่วไป, เบนโซเนส เอนโดนูคลีเอส ไม่มีความจำเพาะเจาะจง, 250U/µl, 50KU/ขวด
คำอธิบาย
Benzo Nuclease เป็นเอนไซม์เอนโดนิวเคลียสไม่จำเพาะชนิดหนึ่ง เอนไซม์ Benzo Nuclease ที่ผ่านการวิศวกรรมพันธุกรรมมาจาก Serratia marcescens
Benzo Nuclease ทำลาย DNA และ RNA ทุกประเภท (คู่เดี่ยว คู่คู่เส้น เส้นตรง วงกลม และ supercoil) โดยไม่มีกิจกรรมโปรตีเอส สามารถทำงานได้อย่างมีประสิทธิภาพในเงื่อนไขหลากหลายและมีกิจกรรมเฉพาะเจาะจงสูงมาก
เบนโซ นิวคลีเอสสามารถย่อยสลายกรดenucleicอย่างสมบูรณ์เป็นโอลิโกนิวคลีโอไทด์ที่มีความยาว 2 ถึง 5 ฐาน (ต่ำกว่าขีดจำกัดการไฮบริด) โดยมีปลายโมโนฟอสเฟต 5' ซึ่งเหมาะสำหรับการกำจัดกรดenucleicออกจากโปรตีนรีคอมบิแนนต์ ช่วยให้ปฏิบัติตามแนวทางของ FDA เกี่ยวกับการปนเปื้อนของกรดenucleic ความสามารถของเบนโซ นิวคลีเอสในการย่อยสลายกรดenucleicอย่างรวดเร็วทำให้เอนไซมนี้เป็นทางเลือกที่ยอดเยี่ยมสำหรับการลดความหนืด เพื่อลดเวลาในการประมวลผลและเพิ่มผลผลิตของโปรตีน ตัวอย่างเช่น เอนไซม์นี้เข้ากันได้กับสารสกัดโปรตีน BugBuster® และ PopCulture® ดังนั้นสามารถเติมลงไปพร้อมกับสารเหล่านี้เพื่อกำจัดความหนืดและกรดenucleicจากสารสกัด E. coli เอนไซม์ประกอบด้วยยูนิตย่อยสองยูนิต ขนาด 30 kDa แต่ละยูนิต มันทำงานได้ในช่วง pH 6-10 และอุณหภูมิ 0-42°C โดยต้องใช้ Mg2+ 1-2 mM เพื่อกระตุ้นการทำงาน นอกจากนี้ เอนไซม์ยังคงทำงานได้ในสารทำความสะอาดแบบไอออนิกและไม่เป็นไอออนิก สารลดลง PMSF (1 mM), EDTA (1 mM) และยูเรีย (กิจกรรมขึ้นอยู่กับเงื่อนไขเฉพาะ) กิจกรรมจะถูกยับยั้งโดยcation单价มากกว่า 150 mM, ฟอสเฟตมากกว่า 100 mM, แอมโมเนียมซัลเฟตมากกว่า 100 mM หรือ guanidine HCl มากกว่า 100 mM
- ที่มา: Serratia marcescens
- น้ำหนักโมเลกุล: 27.9 KD (SDS)
- ความบริสุทธิ์: ≥90%, (Ultra≥99%)(SDS-PAGE)
- PI: 6.85
- pH ที่เหมาะสมที่สุด: 8.0
- อุณหภูมิที่เหมาะสมที่สุด: 37°C
- โคแฟคเตอร์: 1~10mM Mg2+
- รูปแบบ: เอนไซม์ในของเหลวเป็นสารละลายใส (มีไกลเซอริน)
- เอนไซม์ในรูปผงแห้งเป็นผงอบแห้งสีขาว
- ความเข้มข้น: 1000 U/µl.
- กิจกรรม: ≥1000U/μl
- กิจกรรมเฉพาะ: ≥1.0x106U/มก. โปรตีน
- โปรตีเอส: ไม่ตรวจพบ
- ข้อจำกัดของจุลชีพ: แอโรบิก <10CFU/100 KU เชื้อราและรา: <10CFU/100 KU
- การทดสอบเอนโดท็อกซิน: (Gel Clot LAL Assay) <0.25EU/1000U
พื้นที่เก็บ
20 mM Tris-Cl(pH 8.0), 2 mM MgCl2, 2 mM NaCl, 50% ไกลเซอรีน
บัฟเฟอร์สำหรับการเจือจาง
20 mM Tris-Cl(pH 8.0), 2 mM MgCl2, 2 mM NaCl.
ความหมายของหน่วย
หนึ่งยูนิตกำหนดให้เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่ทำให้เกิด ΔA260 เท่ากับ 1.0 ในเวลา 30 นาที ซึ่งเทียบเท่ากับการย่อย DNA อย่างสมบูรณ์ 37 µg
การใช้งาน
- ด้วยกิจกรรมภายในที่สูงและความทนทานต่อสารตั้งต้นที่กว้าง ทำให้เอนโดนิวเคลียสเป็นเครื่องมือที่เหมาะสำหรับการใช้งานในหลากหลายสาขาทางชีวเทคโนโลยีและการแพทย์:
- การกำจัดกรดนิวคลีอิกออกจากตัวอย่างโปรตีน
- การกำจัดกรดนิวคลีอิกออกจากโปรตีน рекомбинันต์
- การทำให้บริสุทธิ์ของชิ้นส่วนโปรตีนจาก inclusion bodies;
- การเตรียมตัวอย่างใน western blotting หรือ two-dimensional gel electrophoresis
- การลดความหนืดในสารสกัดโปรตีน.
การขนส่งและการจัดการ
เอนไซม์ของเหลว: ส่งพร้อม Blue Ice เก็บรักษาที่ -20°C
ผง Freeze-dried: ส่งที่อุณหภูมิห้อง เก็บรักษาต่ำกว่า 4°C
การรับประกัน
2 ปี
CAS: 9025-65-4
EC: 3.1.30.2
สั่งซื้อ
BE01 | เอนไซม์เบนโซเนส | เอนไซม์เบนโซนูคลีเอส ชนิดรีคอมไบแนท, เอนไซม์ย่อยนิวคลีอัสด้วยทั่วไป, เบนโซเนส เอนโดนูคลีเอส ไม่มีความจำเพาะเจาะจง, 250U/µl, 50KU/ขวด |
BE02 | Benzonase Nuclease, Lyophilized Powder | เอนไซม์เบนโซนูคลีเอส ชนิดรีคอมไบแนท, เอนไซม์ย่อยนิวคลีอัสด้วยทั่วไป, เบนโซเนส เอนโดนูคลีเอส ไม่มีความจำเพาะเจาะจง, ผงไลโอฟาย, 50KU/ขวด |
BE03 | Benzonase Nuclease, Lyophilized Powder | เอนไซม์เบนโซนูคลีเอส ชนิดรีคอมไบแนท, เอนไซม์ย่อยนิวคลีอัสด้วยทั่วไป, เบนโซเนส เอนโดนูคลีเอส ไม่มีความจำเพาะเจาะจง, ผงไลโอฟาย, 100KU/ขวด |
BE0171 | เบนโซเนส, เกรด GMP | เอนไซม์เบนโซนิวคลีเอส รีคอมไบแนท ยูนิเวอร์แซล นิวคลีเอส เบนโซเนส เอนโดนิวคลีเอส ไม่มีการจำเพาะเจาะจง 250U/µl, 250KU/ขวด |
BE0172 | เบนโซเนส, เกรด GMP | เอนไซม์เบนโซนิวคลีเอส รีคอมไบแนท ยูนิเวอร์แซล นิวคลีเอส เบนโซเนส เอนโดนิวคลีเอส ไม่มีการจำเพาะเจาะจง 250U/µl, 500KU/ขวด |