Pfu-dna polimeraza kot revolucija v molekularni biologiji in biotehnologiji
področje molekularne biologije in biotehnologije se nenehno razvija, encimi pa so bili ključni pri napredku raziskav in razvoja.Pfu DNK polimerazaTa encim, pridobljen iz bakterije pyrococcus furiosus, hipertermofilne bakterije, ima edinstvene značilnosti, ki ga razlikujejo od drugih DNK polimeraz, zaradi česar je zelo uporaben v različnih molekularnih tehnikah.
značilnosti pfu dna polimeraze:
Obstaja več ključnih lastnosti pfu dna polimeraze, zaradi katerih se uporablja v različnih laboratorijih za molekularno biologijo po vsem svetu. Med njimi so:
1. zmožnost preverjanja: Pfu dna polimeraza, ki se razlikuje od večine drugih z vnatančno 3' do 5' aktivnostjo eksonuklease, lahko spremlja svoje delo glede napak. Kot taka med pcr amplifikacijo olajša identifikacijo in popravilo nepravilno vključenih nukleotidov, s čimer se znižajo
2. termoostabilnost: ker izvira iz hipertermofilnega organizma, ima pu dna polimeraza impresivno visoko stabilnost pri visokih temperaturah.
3. zanesljivost: v kombinaciji s sposobnostjo preverjanja z termostabilnostjo poveča stopnjo zanesljivosti pfu dna polimeraze v primerjavi s taq polimerazo. To jo naredi idealno za aplikacije, kjer je natančnost ključnega pomena, vključno s kloniranjem in mutageneso, ker je pri uporabi tega encima veliko nižja stopnja
Uporaba pfu dna polimeraze:
edinstvenost, ki jo obkrožajo lastnosti, kot so te v zvezi s pfu-dna-polimerazami, omejuje njegovo široko uporabo v različnih molekularnih bioloških metodah:
1. amplifikacija pcr: pfu dna polimeraza je enzim izbira pri amplifikaciji pcr, ker ima visoko zvestobo in sposobnost preverjanja, zlasti kadar je natančnost ojačanega proizvoda najpomembnejša.
2.kloniranje in mutageneza: zaradi nizke pogostosti napak, povezanih s polymeraso puDna, je odlična možnost za kloniranje in za poskuse s mutagenezo, usmerjene na kraju, kjer naključne mutacije lahko ogrozijo rezultate.
3. zaporedje DNK: zato se lahko polymerasa pfu DNA uporablja v orodjih za zaporedje DNK, tako da podatki o zaporedju natančno odražajo izvirno predlogo.
Pfu-dna polimeraza je z izjemnimi lastnostmi, kot so sposobnost branja dokazov, termostabilnost in visoka zvestoba, spremenila različne vidike molekularne biologije in biotehnologije. To pojasnjuje, zakaj je uporabna v širšem obsegu od pcr-amplifikacije do kloniranja do