soluție de inhibitor al ribonucleasei de înaltă puritate - inhibitor al rnazei 40 u/μl, optim pentru protecția RNA în sinteza CDNA și aplicații de biologie moleculară

Descrierea produsului

Introducerea soluției noastre de inhibitor de ribonuclează de înaltă puritate, un reactiv de calitate superioară care conțineInhibitor de rnazăla o concentrație ultra-concentrată de 40 Unități/μl. Această soluție este proiectată special pentru a oferi o protecție maximă împotriva ribonucleazelor în timpul manipulării ARN-ului în diverse proceduri de biologie moleculară.

caracteristici cheie

• puritate excepțională: inhibitorul ribonuclease este produs în mod recombinant și purificat cu strictețe pentru a garanta un grad ridicat de puritate, asigurând nici o interferență în experimentele dumneavoastră.

• Formula ultraconcentrată: furnizată la o concentrație de 40 u/μl, acest inhibitor permite utilizarea eficientă în aplicații exigente în care chiar și cantități mici de rnase pot compromite rezultatele.

• activitate cu spectru larg: inhibitorul neutralizează eficient o gamă largă de RNAase A, B, C şi alte endo- şi exoribonuclease, protejând astfel mostrele de RNA de degradare.

• stabil şi activ: formulate pentru stabilitate într- o gamă largă de temperaturi şi condiţii de pH, inhibitorul rămâne activ în timpul depozitării şi pe parcursul diferitelor protocoale experimentale.

• compatibilitate: ideal pentru utilizare cu sisteme automatizate și reacții preparate manual, este pe deplin compatibil cu tamponi și enzime utilizate în mod obișnuit în tehnicile de sinteză a CDNA și de manipulare a acidului nucleic.

aplicații

• Sinteza CDNA: esenţială pentru prevenirea contaminării cu rnază în timpul reacţiilor de transcriere inversă, îmbunătăţind astfel randamentul şi integritatea CDNA sintetizată.

• Izolarea şi purificarea RN: componente vitale în seturile de extracţie a RN şi în fluxurile de lucru de purificare pentru menţinerea integrităţii RN înainte şi după izolare.

• Northern blotting: asigură transferul de Rna de înaltă calitate şi hibridizarea prin inhibarea activităţii RNase care ar putea degrada RNA pe membrane.

• qpcr şi rt- qpcr: protejează șabloanele de RNA în testele cu PCR cantitativ şi transcriere inversă, sporind sensibilitatea şi specificitatea.

• Studiile de interacţiune RNA- proteină: conservă moleculele RNA în timpul co-imunoprecipitaţiei (rip) şi alţi experimente de interacţiune RNA- proteină.

sursa

tulpina de e. coli care exprimă un clon recombinant care poartă o genă inhibitor de ribonuclează din placenta umană.

concentraţie

40 u/μl.

definiție unitate

o unitate este definită ca cantitatea necesară de inhibitor al ribonucleasei recombinantă care inhibează activitatea 5ng a ribonucleasei cu 50%.

Activitatea este măsurată prin inhibarea hidrolizei monofosfatului ciclic de citidină 23 de către ribonuclează a.

buffer de stocare

20 mm hepes-koh ((ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, 50% ((v/v) glicerol

depozitare

să fie păstrat la -20°c

controlul calității

absenţa endonucleasei

1 μg de ADN lambda este incubat cu 200 de unități de inhibitor al ribonucleasei timp de 16 ore la 37°c.

după incubație, ADN-ul lambda este vizualizat ca intact pe un gel de agaroză vopsit cu bromură de etidiu pentru a verifica absența endonuclezei vizibile.

absența de nicase

1 μg de pbr322 superînfășurat de tip i este incubat cu 200 de unități de inhibitor al ribonucleasei timp de 4 ore la 37°c.

după incubație, ADN-ul superînfășurat este vizualizat pe un gel de agaroză vopsit cu bromură de etidiu pentru a verifica absența unor tăieturi sau tăieturi vizibile.

absența exonucleasei

1 μg de markeri de ADN lambda/hindiii sunt incubate cu 200 de unități de inhibitor al ribonucleasei timp de 16 ore la 37°c.

După incubație, markerele de ADN lambda/hindiii sunt separate cu gel de agaroză de 1% și vopsite cu bromură de etidiu. Marcătorii rămân în forma benzilor intacte fără a fi acoperite.

absenţa rnazei şi a rnazei latente

Pentru a se verifica prezența activității rnazei, 1 u.g. de rna este incubată cu 200 de unități de inhibitor al ribonucleasei timp de 4 ore la 37°C.

După incubație, ARN-ul este vizualizat ca bandă intactă pe un gel de agaroză vopsit cu bromură de etidiu pentru a verifica absența rnazei vizibile.

Pentru a detecta prezența unei activități latente a rnazei, 200 de unități de inhibitor de ribonuclează sunt denaturate termic la 70°C timp de 15 minute și incubate cu 1 u.g. de rna timp de 4 ore la 37°C.

După incubație, ARN-ul este vizualizat ca bandă intactă pe un gel de agaroză vopsit cu bromură de etidiu pentru a verifica absența rnazei vizibile.

puritate fizică

puritatea este ≥ 95%, apreciată prin gelul sds-poliacrilamidă cu colorat albastru coomassie.

Notă de utilizare

Inhibitorul ribonuclease este activ pe o gamă largă de pH (ph5. 5-9).