rola i zastosowanie m-mlv odwrotnej transkryptazy w biologii molekularnej
Enzymy były kluczowe w różnych reakcjach biochemicznych w związku z dynamicznym polem biologii molekularnej.m-mlv transkryptaza odwrotna(m-mlv rt), który jest jednym z tych enzymów, ostatnio zyskał duże zainteresowanie, ponieważ jest w stanie syntetyzować CDNA z szablonów RNA.
strukturę i funkcję m-mlv transkryptazy odwrotnej
m-mlv odwrotna transkryptaza funkcjonuje jako DNA-zależna DNA polimeraza z działaniem zarówno DNA-zależnej DNA polimerazy jak i ribonukleazy h (rnasa h). rozpoznaje wzory RNA i przeprowadza syntezę nici CDNA przy użyciu dntps jako podłoża.
zastosowania transkryptazy odwrotnej m-mlv
Synteza CDNA: metody odwrotnej transkrypcji wykorzystujące m-mlv rt są powszechnymi procedurami stosowanymi do przekształcania zawartości RNA w CDNA. W przypadku badań w dół rzeki, w tym ilościowego PCR, analizy ekspresji genów lub budowy
Klon genów: dzięki zastosowaniu m-mlv rt naukowcy mogą klonować określone geny z próbek RNA. W konsekwencji, określone geny mogą być izolowane i wzmocnione, aby można było je dalej analizować pod względem funkcji.
Analiza ekspresji: niezbędnym etapem w każdej technice analizy ekspresji, takiej jak analiza qpcr lub mikroarray, jest synteza CDNA pośredniczonej przez enzym poprzez jego aktywność rnazy h. Dzięki tym sposobom naukowcy mają możliwość dowiedzieć się, w jaki sposób geny wyrażają
funkcjonalna genomika: w funkcjonalnej genomiczności m-mlv rt jest używana do przygotowania bibliotek CDNA z złożonych populacji RNA. Biblioteki te są następnie sprawdzane pod kątem genów o określonych funkcjach lub fenotypach, ujawniając w ten sposób nowe spostrzeżenia dotyczące funkcji gen
zalety i względy
m-mlv odwrotna transkryptaza ma kilka zalet, takich jak wysoka wydajność, specyficzność i odtwarzalność. Należy jednak zauważyć, że enzym działa dobrze w określonych warunkach, takich jak optymalna temperatura, wartości pH oraz stężenie soli. Czasami podczas syntezy CDNA występuje
W rezultacie m-mlv odwrotna transkryptaza jest pomocnym narzędziem w badaniach biologii molekularnej do syntezy CDNA z szablonów RNA do różnych zastosowań. Klon genów, analiza ekspresji i badania genomii funkcjonalnej w dużym stopniu opierają się na m