ribonuclease-rnaaseremmer 40u ul

recombinant menselijk placenta-ribonuclease-remmer, 40u/μl

bron

e. coli-stam die een recombinant klon uitdrukt dat een ribonuclease-remmersgeen uit het menselijk placenta draagt.

concentratie

40 u/μl.

definitie van eenheid

één eenheid wordt gedefinieerd als de hoeveelheid recombinant ribonuclease-remmer die nodig is om de activiteit van 5ng ribonuclease a met 50% te remmen.

De activiteit wordt gemeten door remming van de hydrolyse van cytidine 23-cyclisch monofosfaat door ribonuclease a.

opslagbuffer

20 mm hepes-koh ((ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, 50% ((v/v) glycerol

opslag

op -20°c bewaren

kwaliteitscontrole

afwezigheid van endonuclease
1 μg lambda-DNA wordt gedurende 16 uur bij 37°c geïncubeerd met 200 eenheden ribonuclease-remmers.
Na incubatie wordt lambda-DNA als intact gevisualiseerd op een met ethidiumbromide gevlekte agarosegel om de afwezigheid van zichtbare endonuclease te controleren.

afwezigheid van nikkel
1 μg type i supergecoald pbr322 wordt gedurende 4 uur bij 37°c geïncubeerd met 200 eenheden ribonuclease-remmers.
Na de incubatie wordt het supergecoate DNA gevisualiseerd op een met ethidiumbromide gevlekte agarosegel om te controleren of er geen zichtbare knippen of snijwonden zijn.

afwezigheid van exonuclease
1 μg lambda-dna/hindiii-markers worden gedurende 16 uur bij 37°c geïncubeerd met 200 eenheden ribonuclease-remmers.
Na de incubatie worden de lambda-DNA/hindiii-markers gescheiden met 1% agarose gel en met ethidiumbromide gekleurd. De markers blijven intact als banden zonder smeerwerk.

afwezigheid van rnase en latente rnase
Om te testen op de aanwezigheid van rnase-activiteit wordt 1 ug rna gedurende 4 uur bij 37°c geïncubeerd met 200 eenheden ribonuclease-remmers.
Na incubatie wordt het RNA gevisualiseerd als intacte band op een met ethidiumbromide gevlekte agarose gel om de afwezigheid van zichtbare rnase te controleren.
Om te testen op de aanwezigheid van latente rnase-activiteit, worden 200 eenheden ribonuclease-remmer gedurende 15 minuten bij 70°c warmte-denatureerd en gedurende 4 uur bij 37°c met 1 ug rna geïncubeerd.
Na incubatie wordt het RNA gevisualiseerd als intacte band op een met ethidiumbromide gevlekte agarose gel om de afwezigheid van zichtbare rnase te controleren.

lichamelijke zuiverheid

De zuiverheid is ≥ 95%, beoordeeld met sds-polyacrylamide gel met coomassieblauwe kleur.

gebruiksaanwijzing

De standaard rt en in vitro transcriptie gebruikt een ribonuclease remmer bij een eindconcentratie van 1 u/ul.

orde