MMLV Reverse Transcriptase, bulk verpakking voor IVD-M-MLV Reverse Transcriptase (RNase H+)

m-mlv omgekeerde transcriptase , wijd type, RNase H positief. 200U/μl, geleverd met 5x Reactiebuffer. Hoge activiteit.

Beschrijving

MMLV Reverse Transcriptase, gecodeerd door het Moloney Murine Leukemie Virus (MMLV RT), is een RNA-afhankelijke DNA-polymerase die de complementaire cDNA-eerste streng synthetiseert vanuit een enkelvoudige RNA-sjabloon waar een primer aan is hybridiseerd. MMLV RT kan ook primers verlengen die zijn hybridiseerd aan enkelvoudig-strandige DNA. De tweede cDNA-streng kan bij sommige mRNA-sjablonen worden gesynthetiseerd zonder een extra DNA-polymerase. Het verschil tussen deze en de algemene M-MLV RT is dat de hittebestendigheid is verbeterd. Het kan 100% activiteit behouden bij 50°C en meer dan 80% activiteit zelfs bij 55°C.

bron

recombinatie van E. coli met Moloney muizenleukemievirus reverse transcriptase gen uit een moloney muizenklon.

Toepassingen

De eerste cDNA-streng synthese; RT-PCR

Kenmerken

• Gebrek aan rnaase-activiteit: zwakke rnaase-activiteit, hoge cdna-opbrengst, kan meer full length cdna krijgen.
• thermostabiel: de optimale reactietemperatuur is 50°c, de hoogste 60°c. kan de sjabloon-RNA-secondary structuur overwinnen en het omgekeerde transcriptase-experiment soepel voltooien.
• breed temperatuurbereik: kan de transcriptie van 37-60°c omkeren, met meer dan 80% van de hoogste activiteit bij 42°c-55°c.
• Sterke versterkingsactiviteit: De genmutatie verbeterde de bindcapaciteit van het enzym en RNA. Verhoogde de versterkingsnelheid, waardoor kwalitatief cDNA kan worden verkregen, geschikt voor cDNA-bibliotheekconstructie.

definitie van eenheid

één eenheid mmlv rt katalyseert de incorporatie van 1 nmol dttp in zuuroplosbaar materiaal in 10 minuten bij 37°c met behulp van oligo ((dt) 12-18-geprimeerde poly ((a)) n als sjabloon.

concentratie : 200 u/μl

Verpakking : bulk

CompoNent : m-mlv (200 u/μl) 5xbuffer (met dtt)

Opslag : -20°c

orde