zeer zuivere ribonuclease-inhibitoroplossing - rnase-inhibitor 40u/μl, optimaal voor rna-bescherming bij cdna-synthese en moleculaire biologie toepassingen

productbeschrijving

Introductie van onze Hoogwaardige Ribonuclease Inhibitor Oplossing, een reagentia van premium kwaliteit metrnase-remmerin een ultra-geconcentreerde 40 Eenheden/μl. Deze oplossing is specifiek ontworpen om maximale bescherming te bieden tegen ribonucleases tijdens RNA-behandeling in verschillende procedures voor moleculaire biologie.

belangrijkste kenmerken

• uitzonderlijke zuiverheid: de ribonucleaseremmers worden recombinant geproduceerd en strikt gezuiverd om een hoge zuiverheid te garanderen, zodat uw experimenten niet worden verstoord.

• ultraconcentreerde formule: deze remmer wordt geleverd in een concentratie van 40 u/μl en kan efficiënt worden gebruikt in veeleisende toepassingen waarbij zelfs sporen van rnase de resultaten in gevaar kunnen brengen.

• breed spectrum activiteit: de remmer neutraliseert effectief een breed scala aan rnases a, b, c en andere endo- en exoribonucleasen, waardoor uw rna-monsters worden beschermd tegen afbraak.

• stabiel en actief: geformuleerd voor stabiliteit in een reeks temperaturen en pH-omstandigheden, blijft de remmer actief tijdens opslag en tijdens verschillende experimentele protocollen.

• Compatibiliteit: ideaal voor gebruik met geautomatiseerde systemen en handmatig voorbereide reacties, volledig compatibel met buffers en enzymen die gewoonlijk worden gebruikt bij de synthese van cdna en nucleïnezuurmanipulatietechnieken.

aanvragen

• CDNA-synthese: essentieel voor het voorkomen van rnase-contaminatie tijdens omgekeerde transcriptie-reacties, waardoor de opbrengst en integriteit van gesynthetiseerd CDNA verbetert.

• rna-isolatie en -zuivering: essentieel onderdeel in rna-extractie-kits en -zuiveringswerkstromen om de rna-integriteit voor en na isolatie te behouden.

• Northern blotting: zorgt voor hoogwaardige RNA-overdracht en hybridisatie door rnaas-activiteit te remmen die RNA op membranen kan afbreken.

• qpcr en rt-qpcr: beschermt RNA-templates in kwantitatieve pcr- en omgekeerde transcriptie kwantitatieve pcr-tests, waardoor de gevoeligheid en specificiteit worden verbeterd.

• Rna-protein interactiestudies: behoudt rna-moleculen tijdens co-immunoprecipitatie (rip) en andere rna-protein interactie experimenten.

bron

e. coli-stam die een recombinant klon uitdrukt dat een ribonuclease-remmersgeen uit het menselijk placenta draagt.

concentratie

40 u/μl.

definitie van eenheid

één eenheid wordt gedefinieerd als de hoeveelheid recombinant ribonuclease-remmer die nodig is om de activiteit van 5ng ribonuclease a met 50% te remmen.

De activiteit wordt gemeten door remming van de hydrolyse van cytidine 23-cyclisch monofosfaat door ribonuclease a.

opslagbuffer

20 mm hepes-koh ((ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, 50% ((v/v) glycerol

opslag

op -20°c bewaren

kwaliteitscontrole

afwezigheid van endonuclease

1 μg lambda-DNA wordt gedurende 16 uur bij 37°c geïncubeerd met 200 eenheden ribonuclease-remmers.

Na incubatie wordt lambda-DNA als intact gevisualiseerd op een met ethidiumbromide gevlekte agarosegel om de afwezigheid van zichtbare endonuclease te controleren.

afwezigheid van nikkel

1 μg type i supergecoald pbr322 wordt gedurende 4 uur bij 37°c geïncubeerd met 200 eenheden ribonuclease-remmers.

Na de incubatie wordt het supergecoate DNA gevisualiseerd op een met ethidiumbromide gevlekte agarosegel om te controleren of er geen zichtbare knippen of snijwonden zijn.

afwezigheid van exonuclease

1 μg lambda-dna/hindiii-markers worden gedurende 16 uur bij 37°c geïncubeerd met 200 eenheden ribonuclease-remmers.

Na de incubatie worden de lambda-DNA/hindiii-markers gescheiden met 1% agarose gel en met ethidiumbromide gekleurd. De markers blijven intact als banden zonder smeerwerk.

afwezigheid van rnase en latente rnase

Om te testen op de aanwezigheid van rnase-activiteit wordt 1 ug rna gedurende 4 uur bij 37°c geïncubeerd met 200 eenheden ribonuclease-remmers.

Na incubatie wordt het RNA gevisualiseerd als intacte band op een met ethidiumbromide gevlekte agarose gel om de afwezigheid van zichtbare rnase te controleren.

Om te testen op de aanwezigheid van latente rnase-activiteit, worden 200 eenheden ribonuclease-remmer gedurende 15 minuten bij 70°c warmte-denatureerd en gedurende 4 uur bij 37°c met 1 ug rna geïncubeerd.

Na incubatie wordt het RNA gevisualiseerd als intacte band op een met ethidiumbromide gevlekte agarose gel om de afwezigheid van zichtbare rnase te controleren.

lichamelijke zuiverheid

De zuiverheid is ≥ 95%, beoordeeld met sds-polyacrylamide gel met coomassieblauwe kleur.

gebruiksaanwijzing

De standaard rt en in vitro transcriptie gebruikt een ribonuclease remmer bij een eindconcentratie van 1 u/ul.