HiFi II M-MLV Reverse Transcriptase (RNase H-)

Productomschrijving:

Onze HiFi II m-mlv omgekeerde transcriptase (RNase H-) is een zeer efficiënte enzym ontworpen voor reverse transcriptie toepassingen die minimale RNA-degradatie vereisen. Dit enzym is een gemodificeerde versie van het Moloney Murine Leukemia Virus (M-MLV) reverse transcriptase, zonder RNase H-activiteit, wat de degradatie van het RNA-sjabloon tijdens cDNA-synthese voorkomt.

Belangrijkste kenmerken:

• Gemodificeerde M-MLV reverse transcriptase zonder RNase H-activiteit
• Hoge nauwkeurigheid en efficiëntie in cDNA synthese
• Geschikt voor reverse transcriptie van volledige mRNA
• Verkleinde RNA-degradatie voor betere bewaring van het sjabloon
• Compatibel met een breed scala aan RT-PCR buffercondities
• Ideaal voor het genereren van hoge-kwaliteit cDNA voor nadergeplaatste toepassingen

Toepassingen:

• Reverse transcriptie PCR (RT-PCR)
• Synthese van cDNA-bibliotheken voor sequencering en klonen
• Genexpressie analyse
• Detectie en kwantificatie van RNA-virussen
• Versterking van zeldzame of weinig voorkomende RNA-transcripten
• Onderwijs- en onderzoekssituaties voor RNA-studies

Onze HiFi II M-MLV Reverse Transcriptase (RNase H-) is een essentiële tool voor onderzoekers die reverse transcriptie-experimenten uitvoeren. Het ontbreken van RNase H-activiteit zorgt ervoor dat RNA-sjablonen onbeschadigd blijven, wat leidt tot nauwkeuriger en betrouwbaardere cDNA-synthese.

Beschrijving

MMLV Reverse Transcriptase, gecodeerd door het Moloney Murine Leukemie Virus (MMLV RT), is een RNA-afhankelijke DNA-polymerase die de complementaire cDNA-eerste streng synthetiseert vanuit een enkelvoudige RNA-sjabloon waar een primer aan is hybridiseerd. MMLV RT kan ook primers verlengen die zijn hybridiseerd aan enkelvoudig-strandige DNA. De tweede cDNA-streng kan bij sommige mRNA-sjablonen worden gesynthetiseerd zonder een extra DNA-polymerase. Het verschil tussen deze en de algemene M-MLV RT is dat de hittebestendigheid is verbeterd. Het kan 100% activiteit behouden bij 50°C en meer dan 80% activiteit zelfs bij 55°C.

bron

recombinatie van E. coli met Moloney muizenleukemievirus reverse transcriptase gen uit een moloney muizenklon.

Toepassingen

De eerste cDNA-streng synthese; RT-PCR

Kenmerken

• Gebrek aan rnaase-activiteit: zwakke rnaase-activiteit, hoge cdna-opbrengst, kan meer full length cdna krijgen.
• thermostabiel: de optimale reactietemperatuur is 50°c, de hoogste 60°c. kan de sjabloon-RNA-secondary structuur overwinnen en het omgekeerde transcriptase-experiment soepel voltooien.
• breed temperatuurbereik: kan de transcriptie van 37-60°c omkeren, met meer dan 80% van de hoogste activiteit bij 42°c-55°c.
• Sterke versterkingsactiviteit: De genmutatie verbeterde de bindcapaciteit van het enzym en RNA. Verhoogde de versterkingsnelheid, waardoor kwalitatief cDNA kan worden verkregen, geschikt voor cDNA-bibliotheekconstructie.

definitie van eenheid

één eenheid mmlv rt katalyseert de incorporatie van 1 nmol dttp in zuuroplosbaar materiaal in 10 minuten bij 37°c met behulp van oligo ((dt) 12-18-geprimeerde poly ((a)) n als sjabloon.

concentratie : 200 u/μl

Verpakking : bulk

CompoNent : m-mlv (200 u/μl) 5xbuffer (met dtt)

Opslag : -20°c

orde