koudgevoelig mutant hotstar taq dna polymerase
- inleiding
inleiding
productbeschrijving:
Onze koude gevoelige mutant HotStarttaq dna-polymerasenis een unieke variant van de traditionele Taq-polymerase, ontworpen met een koude-gevoelige mutatie die activiteit bij kamertemperatuur voorkomt. Dit innovatieve ontwerp zorgt ervoor dat het enzym inactief blijft tot de initiële denaturatiestap van PCR, waardoor niet-specifieke amplificatie en primer-dimervorming worden verminderd.
belangrijkste kenmerken:
- koudgevoelige mutatie voor gecontroleerde activering
- geen activiteit bij kamertemperatuur, waardoor niet-specifieke versterking tot een minimum wordt beperkt
- Verbeterde specificiteit en rendement van het doel DNA
- geschikt voor touch-down pcr en gradient pcr
- verbeterde prestaties bij multiplex pcr-reacties
- ideaal voor geautomatiseerde vloeistofbehandelingssystemen
toepassingen:
- touch-down pcr en hellingspcr
- Multiplex pcr voor gelijktijdige versterking van meerdere doelen
- geautomatiseerde pcr-installaties met behulp van robots voor het verwerken van vloeistoffen
- diagnostische tests die een hoge specificiteit vereisen
- onderzoekstoepassingen met complexe of weinig voorkomende sjablonen
- forensische en klinische testen waarbij de specificiteit van het grootste belang is
De gecontroleerde activering zorgt voor een meer gerichte en efficiënte uitkomst, waardoor het een waardevolle troef is voor laboratoria die hun PCR-werkstromen willen optimaliseren.
beschrijving
csm taq polymerases (koudegevoelige mutante taq polymerases) is een soort hotstar polymerase. bron uit de mutante E. coli. csm taq polymerase in tegenstelling tot de monoclonale antilichaam gebaseerde hot start taq of chemisch gemodificeerde hot start taq, is koude taq
De koudgevoelige mutante taq-polymerasen zijn ontworpen voor warmstartende pcr, niet bij lage temperatuur. Ze bieden uitstekende specificiteit en een twee keer hogere trouw dan wild-type taq. Ze zijn ontworpen voor pcr met moeilijke sjablonen zoals GC-rijke fragmenten en microsatellieten.
Koudgevoelige mutante taq-polymerasen zijn bijzonder geschikt voor primer-extensie van markers voor enkelvoudig nucleotide-polymorfisme (snp).
De voor koude gevoelige mutante taq-polymerasen behouden zelfs onder omstandigheden die zijn ontworpen voor een hoge opbrengst een uitstekende specificiteit en minimale achtergrond. Het enzym kan zelfs op genomische sjablonen worden gebruikt met concentraties van mgcl2+ tot 10 mm.
koudgevoelige mutante taq-polymerasen kunnen zich uitstrekken door moeilijke gebieden, bijvoorbeeld gebieden met omgekeerde tandemherhalingen en gebieden met een grote hoeveelheid secundaire structuur.
Koudgevoelige mutante taq-polymerasen werken op een totaal unieke manier, waarbij een betere nucleotide-selectie op de actieve site en een veel lagere mate van mismatch-extensie worden verricht, wat betekent dat alleen perfect uitgelijnd primers worden uitgebreid. Als gevolg hiervan kan het enzym zelfs een hogere
aanvragen
- warmstart pcr versterking
- specifieke versterking van complexe cdna- en genomische templates, voor versterking van moeilijke templates, zoals gc-rijke fragmenten en microsatellieten
- primaire uitbreiding van snp-markers
- versterking van genomische DNA-doelen tot 10 kb met hoge trouw, specificiteit en gevoeligheid
- versterking van een dna-sjabloon met een laag aantal kopieën, een warmstartpcr met een hoge doorvoer met een hoge specificiteit, gevoeligheid en rendement
- routinematige diagnostische warmstart-PCR die een hoge reproduceerbaarheid vereist.
- realtime pcr
- Multiple pcr
- Productie van pcr-producten voor de kloning
kwaliteitscontrole
- functionele afwezigheid van dubbele en enkelstrengige endonuclease-activiteit;
- zuiverheid> 99% met sds-gelelektrophoreze;
- Elke partij csm taq dna-polymerases wordt getest op versterking uit slechts 10 ng menselijk genoomdna;
- een week lang volledige activiteit behouden bij kamertemperatuur;
- Geen DNA-residu van de gastheer.
reactiemengsel is ingesteld
onderdeel | volume | eindconcentratie |
template | DNA < 1 ug | naargelang de vereisten |
voorwaartsprinter (10 μm) | 2 μl | 0,4 μm |
een verwarming van de splijtstof met een diameter van niet meer dan 10 μm, | 5 μl | 1x |
2,5 mm per dntpmix | 4 μl | 200 μm elk |
csm taq DNA-polymerasen, 5u/μl | 0,4 μl | 2 eenheden |
D2o tot het eindvolume | 50 μl | niet van toepassing |
concentratie: 5 u/μl
opslag: bewaren bij -20°c
Pakket: bulk
orde
pc05 | csm taq DNA-polymerasen | koudgevoelige mutante taq-dna-polymerasen, 5u/μl |