MMLV Reverse Transcriptase, IVD အတွက် အများအားဖြင့် ပက်ပို့ထားသည် - MLV Reverse Transcriptase(RNase H+)
- အကြောင်းအရာ
အကြောင်းအရာ
m-mlv ဆန့်ကျင်ဘက် transcriptase , wide type၊ RNase H အပြုံး။ 200U/μl၊ 5x Reaction Buffer နှင့်ပေးအပ်သည်။ အဆင့်မြင့်လုပ်ဆောင်မှု။
ဖော်ပြချက်
MMLV Reverse Transcriptase သည် Moloney Murine Leukemia Virus (MMLV RT) မှ ကုဒ်လုပ်ထားသော RNA-လွန်ခြင်းအတိုင်း DNA polymerase ဖြစ်ပြီး၊ primer တစ်ခုဖြင့် hybridized ထားသော single-stranded RNA template မှ ပထမဆုံး complementary cDNA strand ကို ထုတ်လုပ်သည်။ MMLV RT သည် single-stranded DNA တွင် hybridized ထားသော primers ကိုလည်း ရွေ့လျှော့ခြင်းပြုသည်။ mRNA template အချို့မှ second strand cDNA synthesis ကို additional DNA polymerase မပါဘဲ ရရှိနိုင်သည်။ ယင်းအား general M-MLV RT နှင့် မတူညီသည်မှာ heat endurance capacity က ပိုမိုတင်းတက်ထားသည်ဟု ဖော်ပြရပါမည်။ 50°C တွင် 100% activity ကို ထိန်းသိမ်းနိုင်ပြီး၊ 55°C တွင်မူ 80% ထက်ပိုသော activity ကိုလည်း ထိန်းသိမ်းနိုင်သည်။
အရင်းအမြစ်
Moloney murine leukemia virus reverse transcriptase gene ကို clone ထားသော E. coli ၏ recombination ဖြင့် ဖြစ်ပေါ်လာသည်။
အသုံးပြုမှုများ
ပထမဆုံး cDNA synthesis; RT-PCR
အင်္ဂါရပ်များ
- RNase H activity မရှိ: Weak RNase H activity High cDNA yield, full length cDNA ကို ပိုမိုရရှိနိုင်သည်။
- thermoStable: အကောင်းဆုံးတိုက်ရောက်မှုအပူချိန် ၅၀°C ဖြစ်ပြီး အများဆုံးအပူချိန်မှာ ၆၀°C ဖြစ်သည်။ RNA ဒုတိယဖွဲ့စည်းပုံကို ကျွန်းဆိုလိုက်ပြီး reverse transcriptase အperiment ကို လျှော့ချမှုမှာလဲ ပြီးစီးစေသည်။
- အပူချိန်အကျယ်ပြန့်: ၃၇-၆၀°C အတွင်း reverse transcript လုပ်ဆောင်နိုင်ပြီး ၄၂°C-၅၅°C တွင် အမြင့်ဆုံးလုပ်ဆောင်မှု၏ ၈၀% ထက်ပိုသည်။ အသုံးပြုသူများသည် အပူချိန်ကို လွတ်လပ်စွာရွေးချယ်နိုင်သည်။
- အီးက်စ်ပလိုင်းလုပ်ဆောင်မှုကြီး: ဂျင်မျိုးရေးပြောင်းလဲမှုဖြင့် enzyme နှင့် RNA ကြားရှိ binding အင်ပ်ပြားမှုကို တိုးတက်စေသည်။ အီးက်စ်ပလိုင်းလုပ်ဆောင်မှုအမြင့်ကို တိုးတက်စေပြီး quality cDNA ကိုရရှိနိုင်ပြီး cDNA library တည်ဆောက်ရေးအတွက် အဆင်ပြေစေသည်။
ယူနစ်အဓိပ္ပါယ်
MMLV RT တစ်ယူနစ်သည် oligo(dT)12-18-primed poly(A)n အဖြစ် template အဖြစ်သုံး၍ ၃၇°C တွင် ၁၀ မိနစ်အတွင်း ၁ nmoL မှ dTTP ကို acid insoluble material ထဲသို့ incorporate လုပ်ဆောင်သည်။
အရေအတွက် : ၂၀၀U/μl
ထုပ်ပိုး : Bulk
အစိတ်အပိုင်း : M-MLV (၂၀၀U/μl) ၅xBuffer (DTT ပါဝင်သည်)
သိမ်းဆည်းမှု : -၂၀°C
အမိန့်
RT01 | M-MLV Reverse Transcriptase(RNase H-) | M-MLV Reverse Transcriptase, RNase H Minus ၂၀၀U/μl, ၅x Reaction Buffer ပါဝင်သည် |
RT02 | M-MLV အနောက်ဆိုင်ရာ လှုပ်ရှားမှု (RNase H+) | M-MLV အနောက်ဆိုင်ရာ လှုပ်ရှားမှု၊ အမျိုးအစား ဝাইဒ်၊ RNase H အပြင်ဆင်ထားသည်။ 200U/μl၊ 5x Reaction Buffer ဖြင့် ပေးဆောင်ထားသည်။ အလုပ်လုပ်ခွင့်မြင့်မားသည်။ |
RT03 | အိုင်းတိုးနိုင်သော M-MLV အနောက်ဆိုင်ရာ လှုပ်ရှားမှု (RNase H-) | အိုင်းတိုးနိုင်သော အနောက်ဆိုင်ရာ လှုပ်ရှားမှု၊ RNase H အနည်းငယ်၊ အလုပ်လုပ်ခွင့်အပူချိန် 55°C အထိ၊ 200U/μl |
RT04 | အိုင်းတိုးအောင်မြင်သော M-MLV အနောက်ဆိုင်ရာ လှုပ်ရှားမှု (RNase H-) | အိုင်းတိုးအောင်မြင်သော အနောက်ဆိုင်ရာ လှုပ်ရှားမှု၊ RNase H အနည်းငယ်၊ အလုပ်လုပ်ခွင့်အပူချိန် 60°C အထိ၊ 200U/μl |
RT05 | HiFi II M-MLV Reverse Transcriptase (RNase H-) | M-MLV အန္တရာယ်ပြောင်းလဲမှုအက်ဆီသည် RNase H Minus၊ IVD အသုံးပြုရန် |
RT05L | HiFi II M-MLV Reverse Transcriptase (RNase H-) လိုဟိုက်လိုက်ပေါ်ဒါ | M-MLV အန္တရာယ်ပြောင်းလဲမှုအက်ဆီ၊ RNase H Minus၊ IVD အသုံးပြုရန်၊ လိုဖိုလိုက်ထားသော ပိုဒ် |
RTY3 | HiFi III M-MLV Reverse Transcriptase (RNase H-) | COVID အတွက် ပြုစုထားသော M-MLV |
RT05F | HiFi II M-MLV Reverse Transcriptase (RNase H-) (Glycerol-free) | MMLV |
RT42 | M-MLV Reverse Transcriptase (RNase H-) | MMLV Reverse Transcriptase၊ 42°C RNase H Minus 200U/μl၊ ၅x Reaction Buffer ပါဝင်သည် |
IIA16 | HiFi II M-MLV Reverse Transcriptase (RNase H-) A16 | MMLV Reverse Transcriptase (RNase H-) IIA16 |