M-MLV Transverse Transcriptase, IVD အတွက် အရည်အသွေးမြင့် အထုပ်အပိုး
- နိဒါန်း
နိဒါန်း
ဖော်ပြချက်
M-MLV Reverse Transcriptase ကို အရည်အသွေးမြင့် အထုပ်အပိုးတစ်ခုထဲ မိတ်ဆက်ပေးခြင်းဖြစ်ပြီး In Vitro Diagnstic (IVD) applications အတွက် အထူးပုံစံပြုထားပါတယ်။ ဤ ကျော်ကြား သော အင်ဇိုင်း သည် မော်လီကျူး ဇီဝဗေဒ ဓာတ်ခွဲခန်း များ တွင် အရေးပါ သော အစိတ်အပိုင်း တစ် ခု ဖြစ် ပြီး ၊ ထူးခြား သော ယုံကြည် စိတ်ချ မှု နှင့် ထိရောက် မှု နှင့်အတူ အာရ်အဲန်အေ ပုံစံ များ မှ စီဒီအဲန်အေ ၏ စုစည်း မှု ကို စုစည်း နိုင် စေ သည် ။
ရင်းမြစ်
မော်လိုနီ မိုရီ သွေးကင်ဆာ ဗိုင်းရပ်စ်ပါဝင်သော အီး. ကိုလီကို ပြန်လည်စုစည်းခြင်းက မော်လုန်းနံရောင်ကလုန်းမှ ကလုန်းမှ transcriptase ဗီဇကို ပြောင်းပြန်ဖြစ်စေသည်။
အပ္ပလီကေးရှင်းများ
CDNA Synthesis: RNA သို့မဟုတ် MRNA (CDNA) အဖြစ် စုစုပေါင်း RNA (CDNA) အဖြစ် ပြောင်းလဲပေးဖို့အတွက် အရေးပါတဲ့ ခြေလှမ်းတစ်ခုအနေနဲ့ PCR (qPCR) ၊ RT-qPCR နှင့် အခြားမျိုးရိုးဗီဇ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာနည်းစနစ်များအတွက် လိုအပ်ချက်ရှိတဲ့ ခြေလှမ်းတစ်ခုဖြစ်ပါတယ်။
မျိုးရိုးဗီဇ ကလုန်းနင်– ပလက်စမစ်အသုံးအနှုန်းတွေ ဒါမှမဟုတ် လုပ်ဆောင်နိုင်တဲ့ မျိုးရိုးဗီဇလေ့လာမှုတွေအတွက် ပလက်စမစ်တွေထဲမှာ CDNA အစီအစဉ်တွေကို စီဒီအဲန်အေအစီအစဉ်တွေမှာ ကလုန်းလုပ်ဖို့ အသုံးပြုတယ်။
RNA Profiling: Microray စမ်းသပ်မှုတွေနဲ့ နောက်မျိုးဆက်စာကြည့်တိုက် ပြင်ဆင်မှု (NGS) စာကြည့်တိုက် ကြိုတင်ပြင်ဆင်မှုတွေမှာ မရှိမဖြစ်လိုအပ်ပါတယ်။
ရောဂါလက္ခဏာစစ်ဆေးခြင်း– အာရ်အဲန်အေ ပစ်မှတ်များကို ရှာဖွေတွေ့ရှိရန် ဒီအဲန်အေသို့ပြောင်းလဲရန်လိုအပ်သည့် IVD ပစ္စည်းများ၏ အင်တီဗွီအစိတ်အပိုင်းဖြစ်ပြီး ကူးစက်ရောဂါလက္ခဏာများနှင့် မျိုးရိုးဗီဇစမ်းသပ်မှုကဲ့သို့သော DNA သို့ပြောင်းလဲရန် လိုအပ်သည်။
MRNA Charterization: အမ်အာရ်အဲန်အေ ဖွဲ့စည်းပုံကို လေ့လာဖို့ လွယ်ကူစေတယ်၊ အမျိုးမျိုးကွဲကွဲပြားခြင်းနဲ့ တည်ငြိမ်တဲ့ စီဒီအဲန်အေ ကြားခံတွေကို ထောက်ပံ့ပေးခြင်းအားဖြင့် ကူးယူပြီးနောက် ပြုပြင်ပြောင်းလဲမှုတွေကို လွယ်ကူစေပါတယ်။
အမ်-အမ်အယ်လ်ဗွီ အပြောင်းအလဲ ပတ်ဝန်းကျင် ကို တောင်းဆို ခြင်း အတွက် တစ်သမတ်တည်း ရလဒ် များ နှင့် အတိုင်းအတာ များ ကို ကမ်းလှမ်း ခြင်း ၊ လုပ်ရိုးလုပ်စဉ် နှင့် ရှုပ် ထွေး သော ရောဂါ စစ်ဆေး မှု လုပ်ထုံးလုပ်နည်း များ လုပ်ဆောင် နေ သော ဓာတ်ခွဲခန်း များ အတွက် ယုံကြည် စိတ်ချ ရ သော ရွေးချယ် မှု တစ် ခု ဖြစ် သည် ။
အသွင်အပြင်များ
RNAse H လှုပ်ရှားမှုမရှိပါ– အားနည်းတဲ့ RNAse H လှုပ်ရှားမှု မြင့်မားတဲ့ စီဒီအဲန်အေ အမြတ်ထုတ်မှုဟာ ပိုပြီး အတိုင်းအတာရှိတဲ့ စီဒီအဲန်အေကို ရရှိနိုင်ပါတယ်။
အပူချိန်– အကောင်းဆုံးတုံ့ပြန်မှုအပူချိန်မှာ 50°C ဖြစ်ပြီး အမြင့်ဆုံးမှာ ၆၀°C ဖြစ်ပါတယ်။ အာရ်အဲန်အေ ဒုတိယအဆောက်အအုံကို ကျော်လွှားနိုင်ပြီး အပြန်အလှန် ရိုးဆက်ရောင်ရမ်းနာ စမ်းသပ်မှုကို ချောမောစွာ ပြီးစီးနိုင်ပါတယ်။
ကျယ်ပြန့်သော အပူချိန်အကွာအဝေး – ၃၇-၆၀ စင်တီဂရိတ်မှ ပြောင်းပြန်လုပ်နိုင်ပါသည်။ ၄၂°C-55°C ဖောက်သည်တွင် အမြင့်ဆုံးလုပ်ဆောင်မှု၏ ၈၀% ကျော်သည် တုံ့ပြန်မှုအပူချိန်ကို လွတ်လွတ်လပ်လပ်ရွေးချယ်နိုင်ပါသည်။
အင်ဇိုင်းနဲ့ အာရ်အဲန်အေရဲ့ ချည်နှောင်နိုင်စွမ်းကို မျိုးရိုးဗီဇပြောင်းလဲမှုက တိုးမြှင့်ပေးတယ်။ အမြန်နှုန်းကို တိုးမြှင့်လိုက်ရင် စီဒီအဲန်အေ စာကြည့်တိုက်ဆောက်လုပ်ရေးအတွက် သင့်တော်တဲ့ အရည်အသွေးရှိတဲ့ စီဒီအဲန်အေကို ရရှိနိုင်ပါတယ်။
ယူနစ် သတ်မှတ်ချက်
MMLV RT ရဲ့ ယူနစ်တစ်ခုက DTTP ရဲ့ 1nmol ကို 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ 37°C မှာ အက်ဆစ် သွေးသွင်းပစ္စည်းထဲ ထည့်သွင်းထားတာကို အိုလီဂို (dT)12
အာရုံစူးစိုက်ခြင်း: ၂၀၀ယူ/μl
ပက်ကေ့ချ်𛈇
အပိုင်းအစ: M-MLV (2000U/μl) 5xBuffer (DTT နှင့်)
သိုလှောင်ခြင်း-20°C