hifi ii m-mlv ပြောင်းပြန် transcriptase (rnase h)

ထုတ်ကုန်ဖော်ပြချက်

ကျွန်ုပ်တို့၏ HiFi IIm-mlv ဆန့်ကျင်ဘက် transcriptase(RNase H-) သည် RNA ပျက်စီးမှုအနည်းဆုံးလိုအပ်သော ပြန်လည်အသားပေးလျှောက်လွှာများအတွက် ဒီဇိုင်းဆွဲထားသော အထူးထိရောက်သော အင်ဇိုင်းဖြစ်သည်။ ဤအင်ဇိုင်းသည် Moloney Murine Leukemia Virus (M-MLV) ပြန်လည်အသားပေးအင်ဇိုင်း၏ ပြင်ဆင်ထားသော ဗားရှင်းဖြစ်ပြီး RNase H လှုပ်ရှားမှုမရှိသောကြောင့် cDNA ထုတ်လုပ်မှုအတွင်း RNA ပုံစံကို ပျက်စီးမှုမှ ကာကွယ်ပေးသည်။

အဓိက လက္ခဏာများ

• rnase h လှုပ်ရှားမှုမရှိသော ပြောင်းလဲထားသော m-mlv reverse transcriptase
• CDNA synthesis တွင် မြင့်မားသော သစ္စာရှိမှုနှင့် ထိရောက်မှု
• အပြည့်အဝ mrna ကို ပြန်လည်ရေးသားရန် သင့်တော်သည်။
• ပိုကောင်းမွန်တဲ့ ပုံစံထိန်းသိမ်းမှုအတွက် rna ပျက်စီးမှု လျော့နည်းစေခြင်း
• rt-pcr buffer အခြေအနေ အမျိုးမျိုးနှင့် ကိုက်ညီမှုရှိသည်
• downstream application များအတွက် CDNA အရည်အသွေးမြင့် ထုတ်လုပ်နိုင်ရန် အကောင်းဆုံး

အသုံးပြုမှု:

• ပြန်လှန်ရေးသားခြင်း pcr (rt-pcr)
• CDNA စာကြည့်တိုက်များ၏ အချိုးအစားသတ်မှတ်ခြင်းနှင့် ကလော့နစ်လုပ်ခြင်းအတွက် ပေါင်းစပ်ခြင်း
• ဗီဇအမူအရာကို ဆန်းစစ်ခြင်း
• RNA ဗိုင်းရပ်စ်များကို ရှာဖွေခြင်းနှင့် တိုင်းတာခြင်း
• ရှားပါး သို့မဟုတ် အနိမ့်အကျယ် RNA စာမူများကို တိုးပွားစေခြင်း
• RNA လေ့လာမှုအတွက် ပညာရေးနှင့် သုတေသန အခြေအနေများ

ကျွန်ုပ်တို့၏ hifi ii m-mlv reverse transcriptase (rnase h-) သည် ပြန်လှန်ရေးကူးယူမှု စမ်းသပ်မှုများ ပြုလုပ်နေသော သုတေသီများအတွက် မရှိမဖြစ်လိုအပ်သော ကိရိယာတစ်ခုဖြစ်သည်။ ၎င်း၏ rnase h လှုပ်ရှားမှုမရှိခြင်းသည် RNA template များကို မထိခိုက်စေရန်၊ ပိုတိကျပြီး ယုံကြည်စိတ်ချရသော CDNA

သရုပ်ဖော်ချက်

mmlv reverse transcriptase သည် moloney murine leukemia virus (mmlv rt) မှ ကုဒ်သွင်းထားသော rna မှီခိုသော dna polymerase တစ်ခုဖြစ်ပြီး, primer ကို hybridized လုပ်ထားသော single-stranded rna template မှ complementsary cdna first strand ကို synthesise ပြုလုပ်သည်။ mmlv rt သည် single

အရင်းအမြစ်

Moloney ကြွက်သား သွေးဖြူရောင်ရောဂါ ဗိုင်းရပ်စ် ဆန့်ကျင်ရေး transcriptase ဗီဇကို ပါဝင်တဲ့ Moloney ကြွက်သားရဲ့ ကလော့န်မှ E. coli ကို ပြန်လည်ပေါင်းစပ်ခြင်း။

လျှောက်ထားမှု

ပထမကြိုး CDNA synthesis; rt-pcr

လက္ခဏာများ

• rnase h လှုပ်ရှားမှု နည်းပါးခြင်း။ rnase h လှုပ်ရှားမှု အားနည်းခြင်း။ CDNA ထုတ်လုပ်နိုင်မှု မြင့်ခြင်း။
• အပူထိန်းနိုင်မှု: အကောင်းဆုံး ဓာတ်ပြုမှု အပူချိန်က 50°c ဖြစ်ပြီး အမြင့်ဆုံးက 60°c ဖြစ်ပြီး template rna ဒုတိယအဆင့် တည်ဆောက်မှုကို ကျော်လွှားနိုင်ပြီး ဆန့်ကျင်ဘက် transcriptase စမ်းသပ်မှုကို အဆင်ပြေစွာ ပြီးဆုံးစေပါတယ်။
• အပူချိန်အကွာအဝေးကျယ်ပြန့်: 37-60c မှပြန်လှန်ရေးထုတ်လွှင့်နိုင်သည်၊ 42°c-55°c တွင်အကောင်းဆုံးလုပ်ဆောင်မှု၏ 80% ကျော်ရှိသည်
• မြင့်မားသော တိုးပွားမှု လှုပ်ရှားမှု: ဗီဇပြောင်းလဲမှုကြောင့် အင်ဇိုင်းနှင့် RNA တို့၏ ချိတ်ဆက်နိုင်စွမ်း တိုးတက်လာပြီး တိုးပွားမှုနှုန်း မြင့်တက်လာသဖြင့် CDNA စာကြည့်တိုက် တည်ဆောက်ရန် သင့်တော်သော CDNA အရည်အသွေးကို ရရှိနိုင်သည်။

ယူနစ်အနက်ဖွင့်ချက်

mmlv rt တစ်ယူနစ်သည် dttp ၏ nmol 1 ကို acid insoluble material သို့ 10 မိနစ်အတွင်း 37°c တွင် oligo ((dt) 12-18-primed poly ((a)) n ကို template အဖြစ်အသုံးပြု၍ catalyzes လုပ်သည်။

စုစည်းမှု: 200 ယူနစ်/μl

အိတ်: အဝယ်အထည်များ

အစိတ်အပိုင်း: m-mlv (200u/μl) 5xbuffer (dtt ပါရှိသည်)

သိုလှောင်ခြင်း-၂၀°C

အမိန့်