အအေးဒဏ်ခံနိုင်ရည်ရှိတဲ့ ဗီဇပြောင်း Hotstar taq DNA polymerase
- အဝင်
အဝင်
ထုတ်ကုန်ဖော်ပြချက်
ကျွန်ုပ်တို့၏ အအေးခံမူလတန်း HotStarttaq DNA ပိုလီမာရေဇသည် ရိုးရာ Taq polymerase ၏ ထူးခြားသော အမျိုးအစားဖြစ်ပြီး အခန်းအပူချိန်တွင် လှုပ်ရှားမှုကို ကာကွယ်သော အအေးခံမူလတန်းပြောင်းလဲမှုဖြင့် အင်ဂျင်နီယာလုပ်ထားသည်။ ဤထူးခြားသော ဒီဇိုင်းသည် အင်ဇိုင်းကို PCR ၏ ပထမဆုံး အပူချိန်ချိန်ညှိခြင်းအဆင့်အထိ လှုပ်ရှားမှုမရှိစေပြီး မသက်ဆိုင်သော အမြှုပ်နှင့် ပရိုမိုတာ-ဒိုင်မာဖွဲ့စည်းမှုကို လျှော့ချသည်။
အဓိက လက္ခဏာများ
- ထိန်းချုပ်ထားတဲ့ တက်ကြွမှုအတွက် အအေးအာရုံခံ ဗီဇပြောင်းခြင်း
- အခန်းအပူချိန်မှာ လှုပ်ရှားမှုမရှိဘဲ မထူးခြားတဲ့ အသံတိုးမှုကို အနည်းဆုံးထိ လျှော့ချပေးပါတယ်။
- target DNA ၏ ပိုမိုကောင်းမွန်သော အထူးသဘာဝနှင့် yield
- touch-down pcr နှင့် gradient pcr တို့အတွက်သင့်တော်သည်။
- multiplex pcr ဓာတ်ပြုမှုတွင် ပိုမိုကောင်းမွန်သော စွမ်းဆောင်ရည်
- အလိုအလျောက် အရည်ကိုင်တွယ်ရေး စနစ်များအတွက် အကောင်းဆုံး
အသုံးပြုမှု:
- touch-down pcr နဲ့ gradient pcr တို့
- ပစ်မှတ်များစွာကို တစ်ပြိုင်နက် မြှင့်တင်ရန်အတွက် multiplex pcr
- အရည်ကိုင်တွယ်ရေး ရိုဘော့များ အသုံးပြုပြီး အလိုအလျောက် PCR တပ်ဆင်မှု
- အထူးသဘာဝမြင့်မားမှုလိုအပ်သော ရောဂါစစ်ဆေးမှုဆိုင်ရာ စမ်းသပ်မှု
- ရှုပ်ထွေးတဲ့ ဒါမှမဟုတ် နည်းပါးတဲ့ ပုံစံတွေကို ပါဝင်တဲ့ သုတေသန အသုံးချမှု
- အထူးပြုချက်က အရေးပါဆုံးဖြစ်တဲ့အခါ တရားစီရင်ရေးနဲ့ ဆေးဝါးဆိုင်ရာ စမ်းသပ်မှု
ကျွန်ုပ်တို့၏ အအေးခံလွယ်သော ဗီဇပြောင်း hotstart taq DNA polymerase သည် PCR အသုံးပြုမှုတွင် PCR လုပ်ငန်းစဉ်ကို သန့်ရှင်းစွာ စတင်ပေးခြင်းဖြင့် သိသာသော အကျိုးကျေးဇူးတစ်ခု ရရှိစေသည်။ ၎င်း၏ ထိန်းချုပ်ထားသော တက်ကြွမှုသည် ပိုမိုရည်ရွယ်ချက်ရှိပြီး ထိရောက်သော ရလဒ်ကို အာမခံပေးပြီး ၎င်းသည် PCR လုပ်ငန်း
သရုပ်ဖော်ချက်
csm taq polymerases (အအေးအာရုံခံ mutant taq polymerases) သည် hotstar polymerase အမျိုးအစားဖြစ်သည်။ မူကွဲ E. coli မှထွက်ရှိသည်။ csm taq polymerase သည် monoclonal ပဋိပစ္စည်းအခြေခံ hot start taq သို့မဟုတ် ဓာတုပြောင်းလဲသော hot start taq နှင့်မတူဘဲအအေးအာရုံခံ mut
အအေးခံနိုင်စွမ်းရှိတဲ့ mutant taq polymerases တွေကို hot start PCR အတွက် ဒီဇိုင်းထုတ်ထားပြီး အပူချိန်နိမ့်မှာ မဟုတ်ဘူး။ wild type taq ထက် ထူးခြားတဲ့ တိကျမှုနဲ့ နှစ်ဆပိုမြင့်တဲ့ သစ္စာရှိမှုရှိပါတယ်။
အအေးဒဏ်ခံနိုင်သော mutant taq polymerases များသည် single nucleotide polymorphism (snp) မားကယ်များ၏ ပရိုင်းမာ တိုးချဲ့မှုအတွက် အထူးသင့်တော်သည်။
အအေးဒဏ်ခံနိုင်စွမ်းရှိတဲ့ mutant taq polymerases တွေဟာ အမြင့်ထွက်နှုန်းအတွက် ပုံစံထုတ်ထားတဲ့ အခြေအနေတွေမှာတောင်မှ ထူးခြားတဲ့ အထူးပြုမှုနဲ့ အနိမ့်ဆုံး နောက်ခံကို ထိန်းသိမ်းထားတယ်။ တကယ်တမ်းက မျိုးရိုးဗီဇ ပုံစံတွေမှာတောင် mgcl2+ ကိုင်တွယ်မှု ၁၀ မီလီမီတာအထိ သုံးနိုင်ပါတယ်။
အအေးဒဏ်ခံနိုင်တဲ့ mutant taq polymerases တွေဟာ ခက်ခဲတဲ့ ဒေသတွေအကြားမှာ တိုးပွားနိုင်ပါတယ်၊ ဥပမာ အပြန်အလှန် tandem ထပ်ကျော့မှုတွေ ပါဝင်တဲ့ ဒေသတွေနဲ့ ဒုတိယအဆင့် တည်ဆောက်မှု ပမာဏမြင့်တဲ့ ဒေသတွေပေါ့။
အအေးဒဏ်ခံနိုင်ရည်ရှိတဲ့ mutant taq polymerases တွေဟာ လုံးဝထူးခြားတဲ့နည်းနဲ့ အလုပ်လုပ်ကြပြီး တက်ကြွတဲ့နေရာမှာ နျူကလိယိုတီဒ ရွေးချယ်မှု တိုးတက်လာစေပြီး မညီမျှတဲ့ တိုးချဲ့မှုနှုန်း ပိုနည်းစေပြီး ဆိုလိုတာက အပြည့်အဝ ချိတ်ဆက်ထားတဲ့ ပရိုင်းမာတွေပဲ တိုး
လျှောက်ထားမှု
- အပူပိုင်းစတင် pcr တိုးမြှင့်မှု
- gc-rich fragments နှင့် microsatellites တို့ကဲ့သို့ ခက်ခဲသော template များကို တိုးချဲ့ရန်အတွက် ရှုပ်ထွေးသော cdna နှင့် genomic template များကို အထူးချဲ့ထွင်ခြင်း
- SNP အမှတ်အသားများ၏ အဦးချဲ့ခြင်း
- Genome DNA target များကို 10 kb အထိ မြှင့်တင်ခြင်းဖြင့် မြင့်မားသော သစ္စာရှိမှု၊ တိကျမှုနှင့် အာရုံခံမှု
- အရေအတွက်နည်း DNA template မှ amplification, မြင့်မားသော specificity, အာရုံခံနိုင်ရည်နှင့် yield နှင့်အတူမြင့်မားသော throughput hot start pcr
- ပုံမှန် စူးစမ်းရေး hot start PCR အတွက် ပြန်ထုတ်လုပ်နိုင်စွမ်းမြင့်မားပါတယ်။
- အချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR
- အများအပြား pcr
- cloning အတွက် PCR ထုတ်ကုန်များ ထုတ်လုပ်ခြင်း
အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု
- နှစ်ထပ်နဲ့ တစ်မျှင် endonuclease လှုပ်ရှားမှု မရှိခြင်း
- သန့်ရှင်းမှု > ၉၉% sds gel electrophoresis ဖြင့် စမ်းသပ်ခြင်း
- csm taq DNA polymerase ၏ တစ်ပွဲစီကို လူ့ဗီဇ DNA ၏ 10 ng သာရှိသည့် amplification အတွက် စမ်းသပ်သည်။
- အခန်းအပူချိန်တွင် တစ်ပတ်လုံး အပြည့်အဝ လုပ်ဆောင်နိုင်စွမ်းရှိစေရန်၊
- အိမ်ရှင် DNA ကျန်ရစ်မှုမရှိဘူး။
ဓာတ်ပြုမှု ရောစပ်မှု
အစိတ်အပိုင်း | အရေအတွက် | နောက်ဆုံးအကျပ်အတည်း |
ပုံစံ | DNA < 1 ug | လိုအပ်သလို |
ရှေ့သို့ ပရိုင်းမာ (10 μm) | ၂ မိုင်လီတာ | 0.4 μm |
ဆန့်ကျင်ဘက် ပရိုင်းမာ (၁၀ မိုက်ခရမ်) | ၅ မိုင်လီတာ | ၁x |
၂.၅ မီလီမီတာစီ dntpmix | ၄ မိုင်လီတာ | တစ်လုံးစီမှာ ၂၀၀ မီလီမီတာ |
csm taq DNA ပိုလီမာဇ၊ 5u/μl | 0.4 μl | ၂ ယူနစ် |
ddh2o နောက်ဆုံးပမာဏအထိ | ၅၀ မီလီလီတာ | မသက်ဆိုင် |
စုစည်းမှု: ၅ ယူနစ်/မီလီတာ
သိုလှောင်ခြင်း-၂၀ ဒီဂရီ စင်တီဂရိတ် အပူချိန်မှာ သိမ်းထားပါ
အိတ်: အဝယ်အထည်များ
အမိန့်
pc05 | csm taq DNA ပိုလီမာရေဇ | အအေးကို အာရုံခံတဲ့ mutant taq dna polymerases 5u/μl |