Inhibitor tal-Ribonuklasi, Inhibitor RNase 40U ul

Inhibitor tal-Ribonuclease ta' Placenti tal-Ġnus Recombinant, 40U/μl

Soġġettiva

Strain ta' E. coli li jagħmlu espressja ta' klon rekombinant li jporti lill-inhibitor tal-ribonuclease minn placenta umana.

Konċentrazzjoni

40 U/μl.

Definizzjoni Unità

Unità waħda hija definita bil-kantità ta' Inhibitor Rekombinant tal-Ribonuclease li tibgħad li tinbiddu l-attivtà ta' 5ng ta' ribonuclease A bill-50%.

L-attivtà tiċċekkja bill-inbiddu ta' l-idrolissi ta' cytidine 2’3’-ċiklik monofosfat minn ribonuclease A.

Kuċċetta ta' Konservazzjoni

20mM HEPES-KOH(PH7.6), 50mM KCl, 8mM DTT, 50%(v/v) glicerol

ĦAŻNA

Ħafu fl-20°C

Kontroll ta' Qualità

GħadDEX ta' Endonuclease
1μg ta' DNA tal-Lambda jkun ttwassar ma' 200 unitajiet ta' Inhibitor tal-Ribonuclease għall-pjan ta' 16 ori b'37°C.
Baż il-twassar, l-DNA tal-Lambda tkun tivvja kantat fuq gel agarosa imbutta bil-bromid tal-etidju li jagħmlu verifika dwar għadDEX ta' Endonuclease visibbli.

GħadDEX ta' Nickase
1μg ta' pBR322 supercoil ta' Tip I jkun ttwassar ma' 200 unitajiet ta' Inhibitor tal-Ribonuclease għall-pjan ta' 4 ori b'37°C.
Baż il-twassar, id-DNA supercoil tkun tivvja fuq gel agarosa imbutta bil-bromid tal-etidju biex jagħmlu verifika dwar għadDEX ta' nickin jew tagħtiġġi visibbli.

GħadDEX ta' Exonuclease
1μg ta' Markeri ta' Lambda DNA/HindIII jkun ttwassar ma' 200 unitajiet ta' Inhibitor tal-Ribonuclease għall-pjan ta' 16 ori b'37°C.
Baż il-twassar, il-Markeri ta' Lambda DNA/HindIII jiġbu msemmijja fuq gel agarosa ta' 1% u jimmuta bil-bromid tal-etidju. Il-marksijiet jagħmlu li jrimanu kantat sens smearing.

Għadex ta' RNase u RNase latenti
Biex jipprova l-ewwejiet tal-attività ta' RNase, t-tiġieb 1ug ta' RNA ma jkunx bħal incubat mal-200 unitajiet ta' Inhibitor ta' Ribonuclease għall-4 ssa tan-nifs 37°C.
Bażir il-Inkubazzjoni, t-tiġieb ta' RNA jiġi vizzjonalment bħala banda intatta fuq gel ta' agarosa mistainja wara bromid ta' etidju biex jagħmel verifika għall-għadex ta' RNase widiva.
Biex jipprova l-ewwejiet tal-attività ta' RNase latenti, 200unitajiet ta' Inhibitor ta' Ribonuclease jiġu denaturati bil-għerċ fl-70°C għall-15 minuti u jkunu inkubati mal-1ug ta' RNA għall-4 ssa tan-nifs 37°C.
Bażir il-Inkubazzjoni, t-tiġieb ta' RNA jiġi vizzjonalment bħala banda intatta fuq gel ta' agarosa mistainja wara bromid ta' etidju biex jagħmel verifika għall-għadex ta' RNase widiva.

Purità Fizika

Il-purità hija ≥95% kif jinqabru minn gel ta' SDS-polyacrylamide wara stenninijiet bil-Coomassie blue.

Noti dwar l-Użu

Inhibitor ta' Ribonuclease huwa attiv fuq rang ta' pH ampi (pH5.5-9). L-użu standard ta' RT u tranzizzjoni in vitro jikkonċentra l-Inhibitor ta' Ribonuclease bħala konċentrazzjoni finali ta' 1u/ul.

Ordine