pfu dna polymerase sebagai revolusi dalam biologi molekul dan bioteknologi

bidang biologi molekul dan bioteknologi terus berkembang, dan enzim telah berperanan dalam kemajuan penyelidikan dan pembangunan.Pfu DNA polimeraseEnzim ini berasal dari pyrococcus furiosus, bakteria hiperthermophilic mempunyai ciri-ciri unik yang menjadikannya berbeza dari polimeras DNA lain, sehingga menjadikannya sangat berguna dalam pelbagai teknik molekul.

ciri-ciri pfu dna polimerase:

Terdapat beberapa ciri utama pfu DNA polimerase yang telah menjadikannya digunakan secara meluas di pelbagai makmal biologi molekul di seluruh dunia. Mereka termasuk:

1. keupayaan membaca: Phun DNA polimerase yang membezakan dirinya dari kebanyakan yang lain dengan mempunyai aktiviti exonuclease 3 'ke 5' yang melekat dapat memantau kerja sendiri untuk kesilapan. sebagai itu, semasa penguat pcr, ini membantu untuk memudahkan pengenalan dan pembaikan nukleotida yang dimasukkan dengan salah dan dengan itu mengurangkan kadar kesilapan berbanding dengan polimer

2. terma stabil: berasal dari organisma hipertermophil, pfu dna polymerase mempunyai kestabilan yang sangat tinggi pada suhu tinggi. ia kekal aktif sehingga 95 ° C (203 ° F) menjadikannya penting untuk tindak balas yang memerlukan suhu tinggi seperti penguatan pcr templat kaya GC atau templat panjang.

3.kepercayaan: dalam kombinasi dengan keupayaan proofreading dengan termostabiliti meningkatkan tahap kepercayaan pfu dna polymerase berbanding dengan taq polymerase. ini menjadikannya ideal untuk aplikasi di mana ketepatan adalah penting termasuk eksperimen kloning dan mutagenesis kerana terdapat kadar ralat yang jauh lebih rendah akibat penggunaan enzim ini daripada apabila taq polymerase digunakan.

Aplikasi polimerase pfu dna:

keunikan yang mengelilingi sifat seperti ini berkaitan pfu-dna-polimerase mengehadkan penggunaannya yang luas dalam kaedah biologi molekul yang berbeza seperti berikut:

1. amplifikasi pcr: pfu dna polymerase adalah enzim pilihan dalam amplifikasi pcr kerana ia mempunyai kesetiaan tinggi dan keupayaan membaca semula, terutamanya apabila ketepatan produk yang diperkuat adalah penting. ia juga cemerlang dalam memperkuat templat kaya gc atau templat panjang yang mungkin bermasalah untuk polimerases lain.

2.penyalinan dan mutagenesis: Keadaan rendah kesilapan yang berkaitan dengan pfu DNA polimerase menjadikannya pilihan yang sangat baik untuk kloning serta eksperimen mutagenesis yang diarahkan di lokasi di mana mutasi rawak boleh menjejaskan hasil.

3. penurutan DNA: untuk alasan ini, pfu dna polimerase boleh digunakan dalam alat penurutan DNA supaya data urutan mencerminkan templat asal dengan tepat.

pfu dna polimerase dengan sifat luar biasa seperti keupayaan membaca bukti, kestabilan suhu dan ketepatan tinggi telah merevolusikan pelbagai aspek biologi molekul dan bioteknologi. ini menjelaskan mengapa ia mendapati aplikasi dalam pelbagai bidang dari penguat pcr hingga kloning hingga urutan DNA sehingga menjadi sangat diperlukan untuk penyelidikan dan pembangunan biologi molekul moden. dengan kemajuan dalam teknologi, akan ada peningkatan