larutan perencat ribonukleasa yang sangat tulen - perencat rnase 40u/μl, optimum untuk perlindungan rna dalam sintesis cdna dan aplikasi biologi molekul
- pengantar
pengantar
Penerangan produk
Memperkenalkan Penyelesaian Penghalang Ribonuklease Kami yang Sangat Murni, reagen berkualiti premium yang menampilkanPenghalang rnasepada kepekatan ultra 40 Unit/μl. Penyelesaian ini direka khusus untuk memberikan perlindungan maksimum terhadap ribonuklease semasa pengendalian RNA dalam pelbagai prosedur biologi molekul.
ciri utama
kemurnian yang luar biasa: penghalang ribonukleasa dihasilkan secara rekombinan dan dimurnikan dengan ketat untuk menjamin tahap kemurnian yang tinggi, memastikan tiada gangguan dengan eksperimen anda.
Rumus ultra pekat: yang dibekalkan pada kepekatan 40u / μl, inhibitor ini membolehkan penggunaan yang cekap dalam aplikasi yang menuntut di mana walaupun jumlah jejak rnase boleh menjejaskan hasil.
Aktiviti spektrum luas: inhibitor secara berkesan meneutralkan pelbagai rnases a, b, c, dan endoribonuklease dan exoribonuklease lain, melindungi sampel RNA anda dari penguraian.
stabil dan aktif: dirumuskan untuk kestabilan dalam pelbagai suhu dan keadaan ph, perencat tetap aktif semasa penyimpanan dan sepanjang pelbagai protokol eksperimen.
keserasian: sesuai untuk digunakan dengan sistem automatik dan tindak balas yang disediakan secara manual, ia sepenuhnya serasi dengan penyangga dan enzim yang biasa digunakan dalam sintesis CDNA dan teknik manipulasi asid nukleat.
aplikasi
Sintesis CDNA: penting untuk mencegah pencemaran rnase semasa tindak balas transkripsi terbalik, dengan itu meningkatkan hasil dan integriti CDNA yang disintesis.
Pengasingan dan pemurnian RNA: komponen penting dalam kit ekstraksi RNA dan aliran kerja pemurnian untuk mengekalkan integriti RNA sebelum dan selepas pengasingan.
Penggoresan utara: memastikan pemindahan RNA berkualiti tinggi dan hibridisasi dengan menghalang aktiviti rnase yang boleh merosot RNA pada membran.
qpcr dan rt-qpcr: melindungi templat RNA dalam pcr kuantitatif dan analisis pcr transkripsi terbalik, meningkatkan kepekaan dan spesifisiti.
Kajian interaksi rna-protein: memelihara molekul rna semasa co-immunoprecipitation (rip) dan eksperimen interaksi rna-protein yang lain.
sumber
Strain e. coli yang menyatakan klon rekombinan yang membawa gen penghambat ribonukleasa dari plasenta manusia.
kepekatan
40 u/μl.
definisi unit
satu unit ditakrifkan sebagai jumlah inhibitor ribonukleasa rekombinan yang diperlukan untuk menghalang aktiviti 5ng ribonukleasa a sebanyak 50%.
Aktiviti dikesan dengan penghambatan hidrolisis cytidine 23-cyclic monophosphate oleh ribonuclease a.
penyangga simpanan
20mm hepes-koh ((ph7.6), 50mm kcl, 8mm dtt, 50% ((v/v) gliserol
penyimpanan
Simpan pada suhu -20°c
kawalan kualiti
tiada endonukleasa
1μg lambda DNA dikukus dengan 200 unit penghambat ribonukleasa selama 16 jam pada 37 °C.
Selepas inkubasi, lambda DNA dilihat utuh pada gel agarose yang diwarnai dengan ethidium bromide untuk mengesahkan ketiadaan endonukleasa yang kelihatan.
Tiada nikase
1μg pbr322 supercoiled jenis i dikukus dengan 200 unit penghambat ribonukleasa selama 4 jam pada 37 °C.
Selepas inkubasi, DNA supercoiled dilihat pada gel agarose yang diwarnai dengan ethidium bromide untuk mengesahkan ketiadaan pencucian atau pemotongan yang kelihatan.
ketiadaan exonuclease
1μg penanda lambda dna/hindiii dikukus dengan 200 unit penghambat ribonukleasa selama 16 jam pada 37°c.
Selepas inkubasi, penanda lambda DNA/hindiii dipisahkan dengan gel agarose 1% dan diwarnai dengan ethidium bromide. Penanda kekal sebagai jalur utuh tanpa mencuci.
Tiada rnase dan rnase laten
Untuk menguji kehadiran aktiviti rnase, 1 ug rna dikukus dengan 200 unit penghambat ribonukleasa selama 4 jam pada 37 °C.
Selepas inkubasi, RNA divisualkan sebagai jalur utuh pada gel agarose yang diwarnai dengan ethidium bromide untuk mengesahkan ketiadaan rnase yang kelihatan.
Untuk menguji kehadiran aktiviti rnase laten, 200 unit penghalang ribonukleasa dipenuhkan dengan haba pada 70°C selama 15 minit dan diinkubasi dengan 1ug rna selama 4 jam pada 37°C.
Selepas inkubasi, RNA divisualkan sebagai jalur utuh pada gel agarose yang diwarnai dengan ethidium bromide untuk mengesahkan ketiadaan rnase yang kelihatan.
kemurnian fizikal
kemurnian ≥95% yang dinilai oleh gel sds-polyacrylamide dengan pewarnaan biru coomassie.
Nota penggunaan
Penghambat ribonukleasa aktif dalam julat pH yang luas (ph5. 5-9). rt standard dan transkripsi in vitro menggunakan penghambat ribonukleasa pada kepekatan akhir 1 u / ul.