Урацил-N-Гликозилаз, Өнгөрөөсөө хамгаалагддаг
- Танилцуулга
Танилцуулга
Бүтээгдэхүүний тодорхойлолт:
Бидний Урацил-N-Гликозилаз (UNG) нь өнгөрч буй энзим юм, яг урацил агуулсан DNA цагаан шугамыг зөвшөөрөх боломжтой. Энэ энзим нь өмнөх ажиллагааны хариуцлагатай загваруудыг буургахад ашигладаг PCR ажиллагаанд ихэвчлэн ашигладаг.
Гол онцлогууд:
- Урацил агуулсан DNA цагаан шугамыг зөвшөөрөх
- Өнгөрч буй үсгийг том температурт хянахад зориулсан
- PCR-д хариуцлагатай загваруудыг буургахад амжилттай
- UNG-т ашиглагдаж буй PCR master mixes-д зориулсан
- Хариуцлагатай загваруудыг буургах үеэр хоорондоо холбогдох шаардлагагүй
- Эргэлтийн их PCR ажиллагааны систем болон автоматик платформүүдэд зориулсан
Хэрэглээ:
- Хариуцлагатай загваруудыг буургахад PCR болон реалтайм PCR
- ПЦР хамгийн их бүтэц дээр урацил-ДНХ гликосидазын шинжилгээ
- Татгалзах магадлал байгаа ДНХ зураасуудын эхдээ төрөлөөтэй нөөцлөх
- Амьдралд оролцох шалгуурлагын шалгамжлага хэрэглээний аюулгүй байдлыг строглох
- ПЦР-дээр тулгуурлан шалгах арга хэмжээнүүдийг шинжлэх, өөрчлөх
- Молекуляр биологийн чиглэлүүдийг сургах, сурах боломжийг үзүүлэх
Бидний Урацил-Н-Гликосидаз нь ПЦР ажлуудад маш их ур чадвартай нэмэлт болж, татгалзсан аюултай хамааралтай алдааны эерэг үр дүнтэй байдалд хүрэхийг хамгаалах боломжийг олгодог. Энэ нь хувийн уур амьсгалтай байдлаар хянах, идэвхгүй болгохыг зөвлөж, энэ нь лабораторид ПЦР шалгамжлагыг хийхэд хамгийн батерийн сонголт болно.
Тайлбар
Урацил-DNA Гликосидаз (UNG), Халдваргүй нь E. coli-д рекомбинант протеин, тус бодисын эх сурвалж ашигладаг. Энзим нь гал ёсны болон хоёр хавтгайн DNA-д U-DNA-г агуулсан урацилын гликосидик хамбарт хидролиз хийх, урацилыг гаргаж авах, DNA-д алкали хамаарах чадваргүй цэгүүд үүсгэнэ. Энзим нь RNA болон урацилгүй естэй DNA-нд ямар ч үйлчилгээгүй. Урацил-DNA Гликосидаз (UNG), Халдваргүй нь мөсний ионуудад шаардлагатай биш учраас EDTA-д байдлаар ихэвчлэн үйлчлэх боломжтой.
Урацил-DNA Гликосидаз (UNG), Хүчирхэг хэмжээнд дUTP-тай ашиглан өмнөх DNA бий гүйцэтгэлийн хариуцсан PCR "carry over" тухай алдааг устгахад зориулагддаг. PCR бүтээгдэхүүнийг шинэчлэхийн тулд PCR холбооны дотор дTTP-г дUTP-р сольно. Дараачийн PCR холбоог PCR-ээрээ анхны эхлэх Uracil-DNA Glycosylase (UNG) болгон урацилтai DNA-г шинэчлэхийн тулд илүү хурдан эхлүүлэх шаардлагатай. Эх сурвалжтай DNA нь урацилтэй биш учраас энэ үед шинэчлэгдэхгүй.
Эх: Давтангаар E. coli
Нягтрал ба Урт: 1U/μL
Нэгжийн тодорхойлолт
Нэг нэгж нь 37°C-н температурт 60 минутанд 1μg-ийн чанарын хамгийн их урацилтэй ерөнхий страндын DNA-г цөөнгөөр шинэчлэх шаардлагатай Uracil-DNA Glycosylase (UNG)-г тодорхойлно.
Хадгалалтын буфер
20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 1mM DTT, 0.5%(v/v) Tween-20, 0.5%(v/v) NP-40, 50%(v/v) глицерол.
Чанарын хяналт
SDS page-ар Пурити>99%
Эндонуклеаз, Никкейс, Эксонуклеаз, RNase-тай холбогдох оюун ухааны мэдрэмж байхгүй.
Үүрэгтэй хөдөлгөөнтэй
50°C 2 минут байдлаар
Хариуцагчийн температур
20~37°C 10 минут байдлаар
Ашиглалтын хэмжээ
50ул хариуцагчдад 0.1~1U УНГ энзим
Зөөлөн, хадгалал
-20°C-д хадгалах, гел үсгээр зөөх
захиалга
UG01 | Урацил-N-Гликозилаз (UNG) | Урацил-DNA Гликосидаз, E.coli, 1U/μl |
UG02 | Урацил-N-Гликозилаз, Өнгөрөөсөө хамгаалагддаг | Урацил-DNA Гликозилаз, Термо санамшгүй, 1Е/μл |