CDNA синтез дахь m-mlv эргэн шилжүүлэн бодох ёсны үүрэг

m-mlv эргэн шилжүүлэн бичмэлнь молекуляр биологийн алдартай фермент бөгөөд RNA-ийн транскрипцийг нэмэлт ДНХ-д (cdna) оруулах бөгөөд Moloney мурын цусны цусны вирусоос гардаг. Энэ нь генийг клононжуулах, дарааллах, мөн генийн илэрхийллийн судалгааны хэрэглээг олоход

молекулын биологийн хэрэглээ

m-mlv эргэн шилжүүлэн бичмэлийн хамгийн түгээмэл хэрэглээ нь генийн илэрхийлэл судлалын талбарт байдаг. Энэ нь ихэвчлэн генийн илэрхийлэл түвшинг тоо хэмжээний pcr (qpcr) -ээр үнэлэх боломжийг олгодог cdna-д шилжүүлэн бичмэ

давуу тал, хязгаарлалтууд

m-mlv эргэн шилжүүлэн бичмэл нь өндөр процессивит, үнэнч байдлыг бий болгох чадвартай зэрэг зарим давуу талыг эзэлдэг. Гэсэн хэдий ч энэ ферментийн зарим сул талууд байдаг.

техник, протокол

M-MLV Уртасгагч Транскриптазийг үр дүнтэй ашиглахын тулд, праймеруудын сонголт, урвалын температур болон буферийн найрлага зэрэг хүчин зүйлсэд онцгой анхаарал хандуулах хэрэгтэй. Праймеруудыг үүсгэхдээ үсрэлттэй гогцоо байхгүй, мөн RNA загвартай холбогдох нь хамгийн их байхаар зохион байгуулах ёстой. Энзимийн урвалд хамгийн тохиромжтой гэж үздэг 42°C температур нь ийм урвалд нийтлэг байдаг тул энзимийн үйл ажиллагаа болон тогтвортой байдал хамгийн сайн байна. Үүний эсрэг,rnase inhibitors -ийгбусад бодисуудыг ашиглах нь урвалын явцад муудах RNA-г хадгалахад тусалж магадгүй.

Ирээдүйн төлөв

Биотехнологийн цаашид хөгжүүлэх нь мөн m-mlv эргэн шилжүүлэн бичмэлийг ашиглах чиглэлээр цаашид дэвшил гаргахад тусална. Өнөөдрийн шинэ стратеги нь инженерүүд үйлдвэрлэсэн хүсэлтэй шинж чанарыг нь өөрчилсөн ферментүүдийг бүтээх явдал юм. Үүнээс гадна энэ технологийг одоогийн дараа

дүгнэж хэлэхэд, m-mlv эргэн шилжүүлэн суулгах нь CDNA-г эсийн дотор нэвтрүүлэхэд чухал ач холбогдолтой тул молекуляр биологийн судалгааны чухал шинж чанар юм. Хэдийгээр үргэлж сорилт гарч байгаа ч m-mlv эргэн шилжүүлэн суулгахын шинж чанары