молекуляр биологийн судалгааны зориулалтаар m-mlv эргэн шилжүүлэн бичмэл

m-mlv эргэн шилжүүлэн бичмэл, Молони Мурины Лейкемийн Вирусын бүтээгдэхүүн нь дэлхийн өнцөг булан бүрийн молекул биологийн лабораторийн үндсэн хэсэг юм. Энэ нь RNA-гаас урвуу транскрипцийн аргаар комплементар ДНХ (cDNA) синтезийг дэмждэг үр дүнтэй фермент юм. Фермент нь өндөр нарийвчлалтай бөгөөд генийн илрүүлгийн шинжилгээ, RNA вирусын клонирчлол, функциональ геномын судалгаанд ашиглах боломжтой.

m-mlv реверс транскриптазын шинж чанар, давуу тал

m-mlv эргэн шилжүүлэн бичмэлЭнэ нь өндөр температурт сайн ажиллах чадвартай бөгөөд үр өгөөж нь сайжирсан ба CDNA-ийн чанартай байдаг. Үүнээс гадна, энэ нь rnase-ийн үйл ажиллагаа багатай тул процессын үеэр rna-ийн бага зэргийн уналттай байдаг. Үүнээс гадна, энэ нь судлаачдад зарим хэлбэржилтийг зөвшөөр

m-mlv эргэн шилжүүлэн бичгийн халдварын хэрэглээ

янз бүрийн салбарт хэрэглээний хувьд m-mlv эргэн шилжүүлэн бичмэл нь хэр олон талт болохыг практикээр харуулсан. Энэ арга нь mRNA-ийн үлгэрлэлийг тодорхойлоход чухал ач холбогдолтой бөгөөд энэ нь qpcr эсвэл микроарей шинжилгээ гэх мэтээр ашиглаж болох mRNA шинжилгээ

m-mlv эргэн шилжүүлэн бичгийн халдварын оптималжлалт, алдааны шийдвэрлэл

M-MLV RT-ийг ашиглахад зөвлөмж болгосон урвалын нөхцөл ба протоколуудыг дагаж мөрдөх хэрэгтэй. RNA загварын концентраци, шаардлагатай ферментийн хэмжээ, буферийн сонголт зэрэг хэд хэдэн хүчин зүйлийг анхаарах хэрэгтэй. Асуудал гарсан тохиолдолд, урвалын температурыг оновчтой нөхцөлд өөрчлөх, праймерийн концентрацийг тохируулах эсвэл ашиглахrnase inhibitors -ийгбүгд RNA-гийн задралыг бууруулахад тусалдаг. Эдгээр нөхцөл нь M-MLV Урвуу Транскриптазын cDNA синтезийн хамгийн их үр ашиг, ургацыг хангах болно.

m-mlv эргэн шилжүүлэн бичмэл нь молекуляр биологийн судалгааны хувьд үнэ цэнэтэй хэрэгсэл бөгөөд рнн-ийг cdna-д үр ашигтай, нарийвчлалтай хувиргах боломжийг олгодог. өндөр үнэнч байдал, мөн бат бөх үйл ажиллагаа нь олон судлаачдын хувьд илүүд үздэг