Молекуляр Биологийн Шалгаруулалтад М-MLV Тойргүй Скриптас

m-mlv эргэн шилжүүлэн бичмэл , Молони Мурины Лейкемийн Вирусын бүтээгдэхүүн нь дэлхийн өнцөг булан бүрийн молекул биологийн лабораторийн үндсэн хэсэг юм. Энэ нь RNA-гаас урвуу транскрипцийн аргаар комплементар ДНХ (cDNA) синтезийг дэмждэг үр дүнтэй фермент юм. Фермент нь өндөр нарийвчлалтай бөгөөд генийн илрүүлгийн шинжилгээ, RNA вирусын клонирчлол, функциональ геномын судалгаанд ашиглах боломжтой.

M-MLV Эрсдэлт Транскриптаасын үзэгдэлүүд ба Агуулга

m-mlv эргэн шилжүүлэн бичмэл энэ нь ихэвчлэн хэрэглэгчдийн сонирхолыг төрүүлж байгаа олон төстэй үзэгдэлтэй. Энэ нь илүү их температурт ажиллах чадвартай, энэ нь зөвхөн нэмэлт үр дүнтэй болох ёстой боловч чанарлаг шинжтэй cDNA-уудыг үүсгэдэг. Мөн энэ нь бага RNase чадвартай учраас процессын дараа RNA-г хамгийн бага хувьд халшлага хийх боломжтой. Дөрөөнөөр, энэ нь олон төрлийн хариуцсан буферуудын тухайн нөхцөлүүдтэй хамт兰члагддаг бөгөөд шинжлэх ухааны эмнэлгүүдэд ихэнхээр гибс байдлыг олгодог.

M-MLV Буцаах Транскриптаасын Ашиглал

Эрэлттэй нь зориулсан үйлдлийн талбайд M-MLV Эх Өөрчлөгчийн хэрэгслээр хамгийн их ашиглах боломжийг олон нэгжүүд дээр илрүүлсэн байна. Энэ нь мРНД-ын тоог тооцоолоход чухал бөгөөд энэ нь мРНД сорилтуудаас санал хайгаа хийх cDNA сангийг үүсгэхэд туслах юм, энэ нь qPCR эсвэл микросистемийн шинжилгээгээр ашигладаг. Мөн M-MLV Эх Өөрчлөгч нь РНД вирустай векторуудад клонлохын тулд вирусын РНД геномын тодорхой хэмжээний копийг үүсгэхэд чухал төлөв байдаг. Сүүлийн үед энэzym нь функцын геномыг шинжлэхэд тусалдаг, яагаад гэвэл тодорхой РНД-уудыг cDNA руу шилжүүлэн дараах ген функцийн шинжилгээнд ашиглах боломжтой.

M-MLV Эх Өөрчлөгчийн хамгийн оптималчлагдсан арга зам, алдаануудыг шийдэх

M-MLV RT-ийг ашиглахад зөвлөмж болгосон урвалын нөхцөл ба протоколуудыг дагаж мөрдөх хэрэгтэй. RNA загварын концентраци, шаардлагатай ферментийн хэмжээ, буферийн сонголт зэрэг хэд хэдэн хүчин зүйлийг анхаарах хэрэгтэй. Асуудал гарсан тохиолдолд, урвалын температурыг оновчтой нөхцөлд өөрчлөх, праймерийн концентрацийг тохируулах эсвэл ашиглах RNase татгалзлагч бүгд RNA-гийн задралыг бууруулахад тусалдаг. Эдгээр нөхцөл нь M-MLV Урвуу Транскриптазын cDNA синтезийн хамгийн их үр ашиг, ургацыг хангах болно.

M-MLV Эрсдэл хөрвүүлгийн энзим нь молекулын биологийн судалгааны тулд RNA-г cDNA руу амжилттай болон дотоод зөвхөн орчуулахад үнэ цэнэтэй хэрэгцээ юм. Энэ энзимийн их зөвлөх чадвар, тус бүрийн арга замд ашигладаг бөгөөд илүү их тооны шинжлэх ухааны эмнэлгүүдэд сонирхож байна. Шинжлэх ухааны эмнэлгүүд энэ энзимийг ашиглах үед хамгийн сайн нөхцөлийг сонгох, мөн алдаануудыг шалгахад анхаарлагддаг.