M-MLV урд төгсөлт эмчийн молекуляр биологид суурьлалтай байдлыг судлах

Мэдлэг m-mlv эргэн шилжүүлэн бичмэл

M-MLV Reverz Transcriptase нь Moloney murine leukemia вирус (M-MLV) ашиглан гаргасан их хамгийн чухал энзимүүдийн нэг юм. Энэ нь молекуляр биологийн талбарт үндэслэлийн зорилгоор ашигладаг. Тэр нь гурван дугаар шинжлэх ухаанд нэртэй процесс реверз транскрипцийн үед томоохон RNA-г нөөц DNA (cDNA)-руу шилжүүлдэг. Урт cDNA хуулбаруудыг синтезлэх чадвар нь ген экспресийн шинжилгээ, эукариот mRNA-г клонлох зэрэг олон зориулалтаар ашиглагдахад ихэнхээс нь зориулагдсан.

cDNA синтезийн хэрэглээ

cDNA синтезид M-MLV Reverz Transcriptase-ийн үндсэн ажил нь cDNA синтезлэх явдал юм. Энэ нь messenger RNA шаблонуудыг PCR-ийн цэвэрлэлт эсвэл library байгуулалтын тулд ашигладаг анхны cDNA-руу шилжүүлдэг. Энзимийн их ажилчлах чадвар болон бага алдаатай байдлын тулд эх сурвалжийн RNA секвенцийг илүү зөв харуулахад чухал.

RT-qPCR-д ажиллах

Эх сургамжийн үеэр М-МЛВ Эрсдэлт Транскриптаас RNA нь cDNA руу шилжүүлэгддэг. Энэ нь RT-qPCR дээр ген ур чадварын тогтвортой тооцооллыг хөгжүүлдэг. М-МЛВ Эрсдэлт Транскриптаасын зориулалттай байдлаар алдаа багасгах ёстой, энэ нь илүү тодорхой үр дүнтэй үр дүнг өгдөг. Бусад Эрсдэлт Транскриптаасуудаас хамаарах нь

М-МЛВ Эрсдэлт Транскриптаас болон AMV (Амьтны Мелобластоз Вирус) RT гэх мэт бусад эрсдэлт транскриптаасуудын хооронд ихэнх үзэгдлийн ялгаа байна. Илүү их ажилчлах чадвар, алдааны хувь хэмжээний багасгал нь AMV RT болон бусадтай харьцуулахад урт cDNA-ийн синтезийг хийхэд ихэнхдээ их хэмжээний эрчимтэй байдаг. Эдгээр үзэгдлийн хариу тогтоомж нь шалгаруулсан судалгааны үндсэн зорилгоор илүү үнэтэй cDNA-ийг бий болгоход зориулсан.

Хариуцлага нөхцөлийг зөв зохицуулах

Хариуцлага нөхцөлийг зөв зохицуулах нь ашиглахад чухал байдаг m-mlv эргэн шилжүүлэн бичмэл Өөртдийн ажиллагааг хамгийн ихээр нь тогтоож өгөхыг зорьсон. Энзимийн үйлчилгээ болон дотоод байдал нь pH, температурын өөрчлөлт, магнийн концентрацийн тухай факторуудаар ихээр өөрчлөгдөх боломжтой. Эдгээр параметрүүдийг шинжлэх бичгийн ажлын үндсэн үр дүнтэй болгох, зөвхөн тохиромжтой үр дүн гаргахад оролцоно.

Генетикийн судалгааг catalyzing болон чанарлагчдын эрхэм

M-MLV Reverse Transcriptase нь үндсэн судалгаанд туслахад нь өөрөө генетик судалгаагаа эхлүүлэх боломжийг олгодог. RNA секвенцийн зөвхөн дупликатыг өгөхөөрөө ген экспресийн тэмдэгтүүдийг тодорхойлоход тусалдаг, болон нийтлэлийн механизмыг харгалзах боломжийг олгодог. Мөн генетик эмчилгээний эх сурвалжид энэ энзим нь эмчилгээндээ хэрэглэгдэх RNAs-г DNA руу зөвхөн копируулж, клеткүүд дотор өөрчлөлт үүсгэхэд тусална.

Шинжлэх бичгийн ажлын дарааллаар эволюция

M-MLV Эрсдэл Хөрвүүлэгчийн ашиглах зорилго нь шинжлэх ухааны судалгаа хамтдаа өөрчлөгдөнө. Энэ эрсдлийн тусгай зөвлөгөө, чадварууд дахин боловсруулагдаж байна. Үргэлжлэх шинэчлэлүүдийн дагуу M-MLV Эрсдэл Хөрвүүлэгчийн ашиглалт нь ихэнхээс нь олон талын аргаар нэмэгдэх боломжтой бөгөөд молекулын биологид амжилттай ашигладаг түрээсийн нэг гэж тодорхойлогдоно.