Халуунд санах мутацийн хотстар Taq ДНХ Полимераз
- Танилцуулга
Танилцуулга
Бүтээгдэхүүний тодорхойлолт:
Манай хүйтэнд мэдрэмтгий мутацид орсон HotStart taq DNA полимераз бол нь уламжлалт Taq полимеразын өвөрмөц хувилбар бөгөөд хүйтэнд мэдрэмтгий мутациар тоноглогдсон тул өрөөнд температурт үйл ажиллагааг нь зогсоодог. Энэ шинэчлэгдсэн загвар нь ферментийг PCR-ийн анхны задралын үе шат хүртэл идэвхгүй байлгахыг баталгаажуулж, тодорхой бус нэмэгдэл болон primer-dimer үүсэхийг бууруулдаг.
Гол онцлогууд:
- Хамгаалалттай үйлдвэрлэхийн тулд хамгийн ирээдүй өөрчлөлт
- Өргөөний температурд ажиллахгүй, эсрэг нь зөв чадваргүй байдалд шинжилгээ хийхэд тусална
- Зорилтот DNA-ийн тодорхойлолтыг нэмэгдүүлэх
- Touch-down PCR болон gradient PCR-д зориулсан
- Multiplex PCR-ийн үйл ажиллагааг сайжруулна
- Автоматик цэвэрлэлийн системд зориулж буй
Хэрэглээ:
- Touch-down PCR болон gradient PCR
- Нэг дээр нь олон зорилготой PCR-ийн үйл ажиллагаа
- Барилгын хэрэглээний роботуудыг ашиглан автоматжуулсан PCR тохиргоонууд
- Эрсдэлтэй шинжилгээнд зориулагдсан дагалдах тестүүд
- Чанартай эсвэл бага тооны үзэмжтэй temple-уудыг агуулж буй судалгааны үйл ажиллагаа
- Эрсдэлтэй байдлыг тухайн чухал болгон нь суурьлан зөвшөөрөгдөх forensic, clinical шалгамж
Бидний Cold sensitive mutant HotStart Taq DNA Polymerase PCR технологийн хэрэглээнд ихээр томъёолж буй хувьд томоохон хүчирхэг юм. Amplification процессыг цөөнгөй эхлүүлэх боломжийг олгодог. Төрөл бүрийн активчлагдлыг хяналттай байдлаар хангахад тодорхой, үр дүнтэй гаралт өгөхөөр лабораториудад PCR workflow-ийг боловсруулахад ихээр хэрэгтэй байдаг.
Тайлбар
CSM Taq polymerases (Cold sensitive mutant Taq polymerases) нь хот star polymerase-ийн нэг төрөл юм. Mutant E. coli-оос гаргасан. CSM Taq polymerase monoclonal антителуудаар хангаж буй хот start Taq эсвэл химийн үйлдвэрлэлийн хот start Taq-тэй адилгүй. Cold Taq нь mutant Taq-ийн cold sensitive mutant юм. Энэ нь бүх циклүүдэд хот start чадварыг хадгалдаг.
Хамгийн их үзэгдлийн тэмцээн (Hot Start PCR)-д ашигладаг, цагаан усны температурт ажиллаж байхгүй Cold sensitive mutant Taq polymerase-ыг зөвлөж байна. Энэ нь дараах олон шатанд илүү нарийвчлалтай байдаг Taq-ээс хоёр дахин илүү нарийвчлалтай байдаг. Энэ нь GC-той фрагментууд, микросателлитууд сонголтоор PCR-д зөвлөгөө өгөхөд зориулагдсан.
Cold sensitive mutant Taq polymerase Single Nucleotide Polymorphism (SNP) маркерийн праймер шилжүүлэхэд ихэвчлэн зориулж байна.
Cold sensitive mutant Taq polymerase-ын ихэвчлэн нарийвчлалтай болон бага background-тай байдал нь их үр үүсгэх зорилгоор зохиогдсон нөхцөлүүдэд ч анхааруулга өгдөг. Үнэндээ, genom загваруудад энзим MgCl2+ концентраци 10 mM-ээс их тохиолдолд ч ашигладаг.
Cold sensitive mutant Taq polymerase-ыг хэцүү рүү шилжүүлэх, жишээлбэл, инверт тандем давтамж, их хэмжээний хоёртын структууртай хэсгүүдээр ашиглах боломжтой.
Хамгийн их хэмжээнд ирсэн Taq polymerase-ийн алхамжтай генетик мутацийн үр дүнд суурилсан амилазын ажиллагаа нь эрэлттэй байдаг. Энэ нь актив сайтын доторх нуклеотид сонголтоо сайжруулж, зөвхөн зөв тохирсон праймерүүдийг шилжүүлэх боломжийг олгодог. Үүний дараа enzyme нь хотын эхлэлийн (хэрэглэгчийн эсвэл автомат) техник хамтран ашигладаггүйгээр ч ихэвчлэн тодорхойлогдоно.
Хэрэглээ
- Hot start PCR-amplification
- Олон төрлийн cDNA, genom template-ийн тодорхойлогч амплификация, GC-багтах fragment-үүд, микросателлитүүдийг амплифицирч байна
- SNP маркерийн праймер шилжүүлэх
- Геном DNA-ийн 10 kb хүртэлх зорилгоор амплификация, тодорхойлогч, фиделитэй, хямдарахгүй
- Эрэлттэй DNA template-ийн бага тооны амплификация, их хэмжээнд хотын эхлэлийн PCR, тодорхойлогч, хямдарахгүй, үр дүн гаргах
- Тодорхойлогч хотын эхлэлийн PCR-ийн рутин диагностика
- Real-Time PCR
- Multiple PCR
- TA cloning-д ашиглах PCR бүтээгдэхүүн үүсгэх
Чанарын хяналт
- Хоёр талын болон нэг талын эндонуклеазын үйлчилгээний функц хамаагүй байдал;
- Шардлагатай SDS гел электрофорезийн ажлын хүснэгтээр чисталт> 99%;
- Хүний genom DNA-ийн 10 ng-с бага тооны урьдчилгаараа CSM Taq DNA Polymerase-ийн үйлчилгээний үншлэх зорилгоор үзүүлэх ёстой;
- Өрөө дундаж температурд нэг долоо хоног байдлаар үйлчилгээний дулаан бүрэн хадгалагддаг;
- Газрын DNA-ийн үлдэгдэл байхгүй.
Холбогдох урсгалын загвар сэргээх
Компонент | Хөгжлийн хэмжээ | Дуусгасан концентрацийн |
Загвар | DNA <1 ug | шаардлагатай |
Эхний Пример (10 μM) | 2 μl | 0.4 μM |
Дараах Пример (10 μM) | 5 μl | 1x |
2.5mM each dNTPmix | 4 μl | 200μM each |
CSM Taq DNA polymerase, 5U/μl | 0.4 μl | 2 unit |
ddH 2O үндсэн хэмжээнд | 50μl | Хэрэглээгүй |
Хүнд төвлөрөл : 5 U/μl
Хадгалалт : -20°C-д нэмэгдэхгүй байршуул
Савлах : Bulk
захиалга
PC05 | csm Taq DNA Polymerase | Халуунд хямдагддаг мутаци Тaq DNA Polymerases, 5U/μl |