M-MLV پێچەوانەی وەرگێڕانی کوالێتی بەرز بۆ IVD

وەسف

پێشکەشکردنی ئێم-ئێم ئێڵ ڤی پێچەوانەی وەرگێڕانی ئێمە لە کۆمەڵەیەکی کوالێتی بەرز، بەتایبەتی دیزاین کراوە بۆ ئین ڤیتۆ دەستنیشانکردن (IVD). ئەم ئەنزیمە بەناوبانگە پێکهاتەیەکی گرنگە لە تاقیگەکانی زیندەزانی گەردیلەیی کە توانای دروستکردنی سی دی ئێن ئەی لە تێمپلەیتەکانی RNA بە متمانەیەکی بێوێنە و چوستییەکی بێوێنەوە دەدات.

سەرچاوە

دووبارە تێکەڵکردنەوەی ئی کۆلی کە ڤایرۆسی لوکیمیای مۆلۆنی مۆرینی تێدایە جینی وەرگێڕانی پێچەوانە دەکاتەوە لە کلۆنی مۆرینی مۆرین.

بەکارهێنانەکان

• cDNA Synthesis: زۆر گرنگە بۆ گۆڕینی تەواوی RNA یان mRNA بۆ دی ئێن ئەی تەواوکەر (cDNA) وەک هەنگاوێکی مەرجی پێویست بۆ PCR (qPCR) ، RT-qPCR و شێوازەکانی تری شیکردنەوەی دەربڕینی جین.

• جین کلۆنینگ:بەکاردێت بۆ کلۆنکردنی زنجیرەکانی سی دی ئێن ئەی بۆ پلازمیدەکان بۆ دەربڕینی پڕۆتینی ڕیکۆمبینانت یان لێکۆڵینەوەی جینۆمی کرداری.

• RNA پرۆفیلینگ: پێویستە لە تاقیکردنەوەکانی مایکرۆرا و نەوەی داهاتوو زنجیرەی کتێبخانە (NGS) ڕێڕەوی کاری ئامادەکردنی کتێبخانە بۆ شیکردنەوەی وەرگێڕان.

• تاقیکردنەوەی دەستنیشانکردن: بەشێکی تەواو لە کەلوپەلی IVD کە پێویستی بە گۆڕینی ئامانجەکانی RNA هەیە بۆ دی ئێن ئەی بۆ دۆزینەوە، وەک دەستنیشانکردنی نەخۆشییە گوازراوەکان و تاقیکردنەوەی بۆماوەیی.

• تایبەتمەندی mRNA: ئاسانکاری دەکات بۆ لێکۆڵینەوە لە پێکهاتەی ئێم ئاڕ ئێن ئەی، تێکەڵکردنی جیاوازییەکان، و گۆڕانکارییەکانی دوای وەرگێڕان بە دابینکردنی ناوەندی جێگیری CDNA.

• M-MLV Reverse Transcriptase لەم کۆمەڵە کۆمەڵەیەدا هەڵبژاردەیەکی باوەڕپێکراوە بۆ تاقیگەکان کە پرۆسەی دەستنیشانکردنی ڕۆتینی و ئاڵۆزی ئەنجام دەدەن و ئەنجامی جێگیر و پێوانەکردن پێشکەش دەکەن بۆ ژینگەی دەستنیشانکردنی گەردی داواکراو.

تایبەتمەندیەکان

• نەبوونی چالاکی RNase H: چالاکی لاوازی RNase H High cDNA، دەتوانێت درێژی تەواوی CDNA بەدەست بهێنێت.

• پلەی گەرمی: باشترین پلەی گەرمی کاردانەوەی ۵۰ پلەی سیلیزییە، بەرزترین پلەی گەرمی ۶۰ پلەی سیلیزییە. دەتوانێت بەسەر پێکهاتەی لاوەکی RNA ی تێمپلەیتەکەدا زاڵ بێت و تاقیکردنەوەی وەرگێڕانی پێچەوانە بە شێوەیەکی ئاسان تەواو بکات.

• مەودای پلەی گەرمی فراوان: دەتوانێت وەرگێڕانەکە پێچەوانە بکاتەوە لە نێوان ۳۷-۶۰ پلەی سیلیزی، لەگەڵ زیاتر لە ۸۰٪ی بەرزترین چالاکی لە ۴۲ پلەی سیلیزی-۵۵ پلەی سیلیزی، کڕیار دەتوانێت بە ئازادی کاردانەوەی پلەی گەرمی هەڵبژێرێت.

• چالاکی گەورەکردنی بەهێز: گۆڕانی بۆماوەیی توانای بەستنەوەی ئەنزیمەکە و RNA باشتر دەکات. زیادکردنی خێرایی گەورەکردن، دەتوانێت کوالێتی CDNA بەدەست بهێنێت، گونجاوە بۆ دروستکردنی کتێبخانەی cDNA.

پێناسەی یەکە

یەکێک لە یەکەکانی MMLV RT هاندەری تێکەڵکردنی 1 nmol dTTP دەکات بۆ ماددەی ترش لە 10 خولەکدا لە 37 پلەی سیلیزی بە بەکارهێنانی ئۆلیگۆ (dT) 12-18-primed poly (A)n وەک نموونە.

چڕکردنەوە: 200U/μl

پاکێج: بە کۆمەڵ

پێکهاتە: M-MLV (200U/μl) 5xBuffer (لەگەڵ DTT)

هەڵگرتن: -20 پلەی سیلیزی