hifi ii m-mlv reverse transcriptase ((rnase h-)

Desegera hilberê:

HiFi IIm-mlv reverse transcriptase(RNase H-) enzyme-yek e ku ji bo sepandina vegerandina RNA-ê têne afirandin ku pêdivî ye ku RNA-ya kêm bibe. Ev enzyme versiyonek guherandî ye ya Moloney Murine Leukemia Virus (M-MLV) reverse transcriptase-ê ye, ku çalakiyê RNase H-ê nake, ku pêşewazî dike ku RNA-ya şablonê di dema çêkirina cDNA de kêm nebê.

taybetmendiyên sereke:

• transcriptaseya veguherî ya m-mlv ku bê çalakiya rnase h
• rastgirî û karîgeriya bilind di senteza CDNA de
• ji bo transkripsiyona paşverû ya full-length mrna
• kêmkirina rna ji bo parastina şablonê baştir
• bi rêjeyeke berfireh ji şertên rt-pcr buffer re lihevhatî
• ideal ji bo çêkirina cdna high quality ji bo sepanên downstream

sepanên:

• transkripsiyona veguherî pcr (rt-pcr)
• senteza pirtûkxaneyên CDNA ji bo rêzik û klonkirinê
• analîza ekspresyonê genê
• tespît û hejmartina vîrusên RNA
• amplification transcriptên RNA kêm an kêm
• sazîyên perwerde û lêkolînê ji bo lêkolînên RNA

hifi ii m-mlv reverse transcriptase (rnase h-) a me ji bo lêkolînerên ku ceribandinên reverse transcriptionê dikin alaveke girîng e. nebûna çalakiya rnase h ewle dike ku şablonên RNA bêdeng bimînin, ku dibe sedema senteza CDNA ya rasttir û pê

şîrovekirin

mmlv reverse transcriptase, ku ji hêla vîrusa leukemiya moloney murine (mmlv rt) ve tê şîfre kirin polîmeraseya DNA ya girêdayî RNA ye ku ji şabloneke RNA ya yek-şablonê ku primer hatiye hibrîdkirin, şablonê yekemîn a cdna ya

çavkaniya

ji nû vehevkirina E. coli ku genê transcriptase ya veguherî ya vîrusa leukemî ya moloney ya ji klonê moloney ya ji moloneyê pêk tê.

serlêdan

Sîntêza CDNA ya şitê yekem; rt-pcr

taybetmendiyên

• kêm çalakiya rnase h: çalakiya rnase h kêm, CDNA bilind, dikare CDNA dirêjtir bistîne.
• termostable: germahîya berteka herî baş 50°c e, herî bilind 60°c e. dikare li ser struktura duyemîn a template RNA biser bikeve û ceribandina transcriptase ya veguherî bi awayekî bêdeng bi dawî bike.
• range germahîya berfireh: dikare transcript ji 37-60c, bi zêdetir ji 80% ji çalakiya herî bilind de 42°c-55°c mişterî dikarin germahîya reaksiyonê de bi azadî hilbijêre.
• çalakiya amplification xurt: mutation gen zêdekirina kapasîteya binding ji enzyme û RNA. zêdekirina speed amplification, dikarin quality CDNA, minasib ji bo avakirina pirtûkxaneya CDNA bistînin.

yekîneya

yek yekîneya mmlv rt di 10 deqîqeyan de di 37 °C de bi bikaranîna oligo ((dt) 12-18-primed poly ((a) n wek şablonê têkildarî 1 nmol dttp di madeya asîdê de ne diherike katalyze dike.

konsantrasyon: 200u/μl

pakêt: bi awayekî bêhempa

pêkhateya: m-mlv (200u/μl) 5xbuffer (bi dtt)

depoya: -20°C

rêz