germî hesas mutant hotstar taq DNA polymerase
- pêşniyar
pêşniyar
Desegera hilberê:
HotStart ya mutantê hestîyê sarî ya metaq polîmerase DNAvaryantê taybetî ya polymerase Taq ya kevn e, ku bi guherandina hestîyê sarî hate çêkirin ku çalakî li ser temperatura odeyê qebûl nakir. Ev dizaynek nû pêşniyar dike ku enzyme bê çalakî bimîne heta gava destpêka denatûrasyona PCR, ku zêdebûna ne-taybetî û çêkirina primer-dimerê kêm dike.
taybetmendiyên sereke:
- mutasyona hesas ji bo aktîvkirina kontrolkirî
- di germahiya odeyê de ti çalakî tune ye, xurtkirina ne taybetî kêm dike
- taybetmendiya zêde û hilberîna DNA ya armanc
- ji bo touch-down pcr û gradient pcr minasib
- performansa baştir di reaksiyonên multiplex pcr de
- ji bo pergalên hilberîna avayî yên avayî yên avayî
sepanên:
- touch-down pcr û gradient pcr
- multiplex pcr ji bo amplification hevdem ji armancên multiplex
- sazkirina PCR ya otomatîk bi bikaranîna robotên hilberîna rûnê
- testên teşhîsê yên ku taybetmendiya bilind dixwazin
- sepanên lêkolînê ku şablonên tevlîhev an kêm-abundance tê de
- ceribandina forensîk û klînîk ku taybetmendî girîng e
Polîmeraseya me ya DNA ya germ-hestiyar a germ-şewitandî taq di sepanên PCR de avantajeke girîng dide bi pêşkêşkirina destpêkek nû ji bo pêvajoya zêdekirinê. Aktivasyona wê ya kontrolkirî encameke bi armanc û bi bandortir misoger dike, ku
şîrovekirin
polîmerasên taq ên germ (polîmerasên taq ên germ ên germ) cureyek polîmeraseya hotstar e. çavkaniya ji e. coli ya germ. li gor polîmeraseya taq a germ a li ser antibody monoclonal an taq a germ a germ a bi kîmyewî
Polîmerasên taq ên tûj ên germ ji bo PCR-ya germ destpêkirin hatine dîzaynkirin, ew di germahîya nizm de nîne. Ew taybetmendiyek baş û du qat rastbûna bilindtir ji taq-ya type wild pêşkêş dike. Ew ji bo PCR-ya bi şablonên dijwar ên
Polîmerasên taq ên ku ji sarî re hesas in, bi taybetî ji bo dirêjkirina pêşîn a polîmorfîzma yek nukleotîd (snp) markera baş in.
Polîmerasên taq ên ku ji sarî re hesas in, di şertên ku ji bo hilberîna bilind hatine çêkirin de jî taybetmendiya baş û paşverû ya kêm biparêzin. Bi rastî jî, di şablonên genomîk de jî, enzaym dikare bi konsantrasyonên mgcl2+ yên 10 mm bilind
polîmerasên taq ên ku ji sarî re hesas in dikarin bi herêmên dijwar re derbas bibin, wek herêmên ku dubareyên tandem ên veguherî û yên ku bi rêjeyeke mezin a avaniya duyemîn hene.
Polîmerasên taq ên ku ji sarî re hesas in bi awayekî bi tevahî yekane dixebitin, ku hilbijartina nukleotîda li cihê çalak baştir dike, û rêjeyeke gelek kêmtir a dirêjkirina ne-hevhatinê, ango ku tenê primerên bi temamî lihevkirî dê bên dirêjkirin.
serlêdan
- xurtkirina pcr destpêkirina germ
- amplification taybetî ji CDNA tevlihev û template genomic, ji bo amplification ji template zehmet, wek parçe GC-berhem û microsatellites
- dirêjkirina primer ji markers snp
- amplification ji armancên DNA genomic heta 10 kb bi dilsoziya bilind, taybetî û hesasîyetê
- amplification ji hejmara kopî kêm template DNA, high-throughput hot start pcr bi taybetîbûna bilind, hesasîyet û yield
- PCR-ya destpêkirina germ a teşxîskirinê ya rutîn ku pêdivî bi nûvekirineke bilind e.
- PCR-ê demên rastîn
- pcr multiple
- hilberîna berhemên PCR ji bo klonkirina
kontrolkirina kalîteyê
- bêdengiya fonksîyonel a çalakiya endonukleazê ya du qatî û yek qatî;
- test purity> 99% bi sds gel electrophoresis;
- her lûtkeya polîmeraseya csm taq DNA ji bo amplification ji 10 ng ji DNA-ya genomîk a mirovan tê testkirin;
- bi temamî di germahiya odeyê de ji bo hefteyekê çalak bimînin;
- tu DNAya mêvandar tune ye.
tevna reaksiyonê saz kirin
pêkhateya | volume | konsantrasyonê dawî |
şablon | DNA < 1 ug | wek pêwîstî |
pêşînkerê pêşînkerê (10 μm) | 2 μl | 0,4 μm |
primerê veguherî (10 μm) | 5 μl | 1x |
2.5mm her dntpmix | 4 μl | Her yek ji wan 200μm |
csm taq DNA polymerase, 5u/μl | 0.4 μl | 2 yekîneyên |
hd2o ji bo volume dawî | 50μl | ne pêkan e |
konsantrasyon: 5 u/μl
depoya: di -20°C de biparêze
pakêt: bi awayekî bêhempa
rêz
pc05 | csm taq DNA polymerase | Polîmerasên DNA yên tûnd ên taq ên ku ji sarî re hesas in, 5u/μl |