リンナース阻害剤

ヒトの再結合性胎盤リボヌクレアース阻害剤,40u/μl

源

人体胎盤からリボヌクレアース阻害基因を携わる再結合クローンを発現するe. coli株

集中度

40 U/μl

単位定義

1ユニットは,リボヌクレアースaの5ngの活性を50%抑制するために必要な再結合リボヌクレアース阻害剤の量として定義されます.

活性度は,リボヌクレアースaによるシチジン23-サイクリックモノフォスファートの水解抑制によって測定されます.

貯蔵バッファ

20mm ヘペスコホ (ph7.6), 50mm kcl, 8mm dtt, 50% (v/v) グリセロール

貯蔵

-20°Cに保存する

品質管理

エンドヌクレアースが存在しない
ランバダDNAの1μgはリボヌクレアース阻害剤200ユニットで37°Cで16時間間化されます.
発育後,ラムダDNAは,目に見えるエンドヌクレアースがないことを確認するために,エチジウムブロマイド染色したアガロースゲルに完整状態で視覚化されます.

ニケスがない
型I超巻き pbr322の1μgは,リボヌクレアース阻害剤200ユニットで37°Cで4時間保育します.
発育後,超巻きDNAは,目に見える切断や切断がないことを確認するために,エチジウムブロマイド染色したアガロースゲルで視覚化されます.

エキゾヌクレアースがない
ランバダDNA/hindiiiマーカーの1μgをリボヌクレアース阻害剤200ユニットで37°Cで16時間保育する.
発育後,ランバダDNA/hindiiiマーカーは1%のアガロースゲルで分離され,エチジウムブロマイドで染められます.マーカーは塗り替えなしで完整な帯のまま残ります.

リン酸欠乏と潜伏リン酸欠乏
rnase 活性を検査するために, 1 ug の rna は,リボヌクレアース 抑制剤 200 単位で 37°C で 4 時間間 化されます.
発酵後,RNAは,目に見えるRNAアゲルがないことを確認するために,エチジウムブロマイド染色したアガロースゲルに完結していない帯として視覚化されます.
潜伏するRNA活性を検査するために,リボヌクレアース阻害剤200ユニットを70°Cで15分間にわたって熱変性化し,37°Cで1ウグのRNAを4時間間化します.
発酵後,RNAは,目に見えるRNAアゲルがないことを確認するために,エチジウムブロマイド染色したアガロースゲルに完結していない帯として視覚化されます.

身体的純潔

純度 ≥95%で,sds-ポリアクリラミドゲルとクオマシーブルー色で判断される.

使用メモ

標準RTとin vitroトランスクリプションでは,リボヌクレアース阻害剤が1u/ulの最終濃度で使用されます.

順序