פתרון מעכב ריבון נוקלאזה טהור מאוד - מעכב רנאזה 40u/μl, אופטימלי להגנת רנא בסינתזה של CDNA ובביולוגיה מולקולרית

תיאור המוצר

הצגת פתרון מעכב ריבונוקלאז טהור מאוד שלנו, ריאגנט באיכות פרימיום עםמעכב רנזהבריכוז גבוה במיוחד של 40 יחידות/μl. פתרון זה מתוכנן במיוחד לספק הגנה מקסימלית מפני ריבונוקלאזים במהלך טיפול ב-RNA בהליכים שונים של ביולוגיה מולקולרית.

תכונות מפתח

• טוהר יוצא דופן: מעכב ריבון נוקלאזה מיוצר באופן רוקומביננטי ונטהר בקפידה כדי להבטיח רמה גבוהה של טוהר, להבטיח שום הפרעה בניסויים שלך.

• נוסחתה מרוכזת ביותר: מוצעת בריכוז של 40U/μl, מעכב זה מאפשר שימוש יעיל ביישומים תובעניים שבהם אפילו כמויות של rnase עלולות לסכן את התוצאות.

• פעילות ספקטרום רחב: המניע נוטרל באופן יעיל מגוון רחב של rnases a, b, c, ו- endo- ו- exoribonucleases אחרים, הגנה על דגימות RNA שלך מחיסור.

• יציב ופעיל: מופק על מנת להיות יציב במגוון טמפרטורות ותנאי ph, מעכב נשאר פעיל במהלך אחסון ובמהלך פרוטוקולים ניסויים שונים.

• התאמה: אידיאלי לשימוש במערכות אוטומטיות ותגובות מוכנות ידנית, הוא תואם לחלוטין עם בופר ואנזימים המשמשים בדרך כלל בסינתזה של CDNA וטכניקות מניפולציה של חומצות נוקליניות.

בקשות

• סינתזת CDNA: חיוני למניעת זיהום rnase במהלך תגובות טרנסקריפציה הפוכה, ובכך לשפר את היבול ואת שלמות CDNA סינתז.

• בידוד וטיהור רנ"א: מרכיב חיוני במערכות מיקוי רנ"א ותזרילי עבודה של טיהור כדי לשמור על שלמות רנ"א לפני ואחרי בידוד.

• בלטינג צפוני: מבטיח העברת RNA באיכות גבוהה והבריבריזה על ידי חסימת פעילות rnase שיכולה להפר את RNA על הממברנות.

• qpcr ו rt- qpcr: מגן על תבניות RNA ב- pcr כמותי וב- pcr כמותי של טרנסקריפציה הפוכה, משפרת רגישות וספציפיות.

• מחקרים של אינטראקציות RNA- חלבון: שומר על מולקולות RNA במהלך co-immunoprecipitation (rip) וניסויים אחרים של אינטראקציות RNA- חלבון.

מקור

זן של E. coli המביע קלון רוקומביננטי שנושא גן מעכב ריבון נוקלאזה משטף האנושי.

ריכוז

40 יו/מיליטר.

הגדרה של יחידה

יחידה אחת מוגדרת ככמות של מעכב ריבונקולייז מחודש הנדרש כדי להדחיק את הפעילות של 5ng של ריבונקולייז א ב 50%.

הפעילות נמדדת על ידי מעכבת ההידרוליזה של סיטידין 23- סיקלי מונופוספייט על ידי ריבונוקלייז א.

מחסום אחסון

20 מ"מ של היפס-קוה (ph7.6), 50 מ"מ של ק"ל, 8 מ"מ של דט, 50% (v/v) של גליצרין

אחסון

שמור ב -20°C

בקרת איכות

חוסר אנדונוקליאז

1μg של DNA למבדה מונח עם 200 יחידות של מעכב ריבון נוקלייזה במשך 16 שעות ב 37°C.

לאחר ההדבקה, ה-DNA של הלמדה מתבונן כשלם על ג'ל אגרוז מלוכלך בברומיד אתידיום כדי לאמת את היעדר אנדונוקליאז נראית.

חוסר ניקזה

1μg של pbr322 מסוג I סופר-סופג עם 200 יחידות של מעכב ריבון נוקלייז במשך 4 שעות ב 37°C.

לאחר ההדבקה, ה-DNA המוגולל במעגל אגרוז מלוכלך בברומיד אתידיום כדי לוודא שאין חותכים או חתכים גלויים.

חוסר של אקזונוקליאז

1μg של סימנים למדה DNA/hindiii מונחים ב-200 יחידות של מעכב ריבון נוקלייזה במשך 16 שעות ב 37°C.

לאחר ההדבקה, סימני ה-Lambda DNA/hindiii נפרדים על ידי 1% ג'ל אגרוז ומודבקים עם ethidium bromide. הסימנים נשארים כבטיסים שלמים ללא חשיפה.

חוסר rnase ו rnase latent

כדי לבדוק את נוכחות פעילות rnase, 1ug של rna הוא מונח עם 200 יחידות של מעכב ריבון נוקלייז במשך 4 שעות ב 37°C.

לאחר ההדבקה, ה-RNA מתבונן כבטיבת שלמה על ג'ל אגרוז מלוכלך בברומיד אתידיום כדי לוודא את היעדר rnase גלוי.

כדי לבדוק את נוכחות פעילות rnase latent, 200 יחידות של מעכב ריבון נוקלייז הוא חום-דנוטור ב 70°C במשך 15 דקות ונקב עם 1ug של rna במשך 4 שעות ב 37°C.

לאחר ההדבקה, ה-RNA מתבונן כבטיבת שלמה על ג'ל אגרוז מלוכלך בברומיד אתידיום כדי לוודא את היעדר rnase גלוי.

טוהר פיזי

טוהר ≥95% כפי שנגזר על ידי ג'ל sds-polyacrylamide עם צבע כחול coomassie.

הערה לשימוש

תרגום rt סטנדרטי ו in vitro משתמשת inhibitor ribonuclease ב ריכוז סופי של 1u / ul.