פתרון עכיבת Ribonuclease Extremely טהור - עכיבת RNase 40U/μl, אופטימלי להגנה על RNA בסינתזה של cDNA וביישומים של ביולוגיה מולקולרית

תיאור המוצר

הצגת פתרון מעכב ריבונוקלאז טהור מאוד שלנו, ריאגנט באיכות פרימיום עם מונע RNase בריכוז גבוה במיוחד של 40 יחידות/μl. פתרון זה מתוכנן במיוחד לספק הגנה מקסימלית מפני ריבונוקלאזים במהלך טיפול ב-RNA בהליכים שונים של ביולוגיה מולקולרית.

תכונות עיקריות

• נקיון יוצא דופן: האינהיביטור של ריבונוקלז מיוצר באופן רקורסיבי והופך לנקי בצורה חמורה כדי להבטיח נקיות גבוהה, מה שמבטיח שאף יפריע לניסויים שלך.

• נוסחה מتركيיה: מסופק ב-40U/μl, האינהיביטור מאפשר שימוש יעיל בהתקנים קשים שבהם אפילו כמויות קטנות של RNase יכולות להסיט את התוצאות.

• פעילות רחבה: האינהיביטור מutralizes בצורה יעילה מגוון רחב של ריבונוקלז A, B, C, ועוד ריבונוקלזים פנימיים וחיצוניים, מה שמגן על הדגימות שלך מdegradation.

• יציב ופעיל: נוסח כדי להישאר יציב הטמפרטורות ובתנאים של pH שונים, המהכשיר שומר על פעילותו במהלך אחסון ובמהלך פרוטוקולים ניסיוניים שונים.

• תאימות: מתאים לשימוש עם מערכות אוטומטיות ותגובות מוכנות ידנית, הוא תואם לחלוטין עם חומרי הבסיס והאנזימים שנפוצים בשיטות סינתזה של cDNA וmaniuplation חומצה גרעינית.

ת Peblications

• סינתזה של cDNA: חיוני למניעת זיהום RNase במהלך תגובות תרocopie הפוך, מה שמשפר את התוצרת והשלמות של cDNA שהופק.

• הפרדת RNA וטהירתו: חלק חיוני בקיטי הפרדה של RNA וטיפולי טהרה כדי לשמור על שלמותה של RNA לפני ואחרי ההפרדה.

• בלוט הצפוני: מבטיח העברה וhibridization באיכות גבוהה של RNA על ידי מניעה של פעילות RNase שיכולה להרוס RNA על המembrance.

• qPCR ו-RT-qPCR: מגן על תבניות RNA בבדיקות PCR כמותי ו-RT-PCR כמותי, מה שמגביר רגישות וספציפיות.

• מחקרים על אינטראקציות בין RNA לחלבונים: שומר על מולקולות RNA במהלך תהליך הקוא-אימונופריפיקציה (RIP) וניסויים אחרים של אינטראקציה בין RNA לחלבונים.

מקור

תבנית E. coli המבטאת קローン רקורסיבי שמכיל את גן מעצור ריבונוקלז מהפלטנה האנושית.

ריכוז

40 U\/μl.

הגדרת יחידה

יחידה אחת מוגדרת ככמות של מעצור ריבונוקלז רקורסיבי הנחוצה כדי להמעיט ב-50% את פעילות 5 נג'גרם של ריבונוקלז A.

הפעילות מודדת על ידי חסימת ההידרוליזה של ציטידין 2’3’-סיקלי מונופוספט על ידי ריבונוקלז A.

מכלית אחסון

20mM HEPES-KOH(PH7.6), 50mM KCl, 8mM DTT, 50%(v\/v)ไกลצירול

אחסון

שמור בטמפרטורה של -20°C

בקרת איכות

חוסראין אנדונוקלז

1μg של DNA למדא מטמעת עם 200 יחידות של חסימת ריבונוקלאז במשך 16 שעות בטמפרטורה של 37°C.

לאחר הטמעה, ה-DNA של למדא נראית כשלמה על גל אגרוז עם סימון ברובידום אתידיים כדי לוודא את היעדרן של אנזימים קיצורי-DNA נראים.

היעדרות של Nickase

1μg של pBR322 מסופרקלית מסוג I מטמעת עם 200 יחידות של חסימת ריבונוקלאז במשך 4 שעות בטמפרטורה של 37°C.

לאחר הטמעה, ה-DNA הסופרקליתי נצפה על גל אגרוז עם סימון ברובידום אתידיים כדי לוודא את היעדרו של חיתוך או קריעת נראית.

היעדרות של Exonuclease

1μg של Lambda DNA/HindIII Markers מטמעת עם 200 יחידות של חסימת ריבונוקלאז במשך 16 שעות בטמפרטורה של 37°C.

לאחר הטמעה, Lambda DNA/HindIII Markers מופרד על ידי גל אגרוז ב-1% ומסומן עם ברובידום אתידיים. המציינים נשארים כפסים שלמים ללא התפשטות.

היעדרות של RNase ו-RNase לא פעילה

כדי לבדוק את הימצאותה של פעילות RNase, 1μg של RNA מטמעת עם 200 יחידות של חסימת ריבונוקלאז במשך 4 שעות בטמפרטורה של 37°C.

לאחר התאמה, ה-RNA נראת כתה שלמה על גל אגארוז עם סימון ברומיד אתידיום כדי לוודא את חוסר הימצאותן של RNase נראות.

כדי לבדוק את קיומה של פעילות RNase לא-פעילה, 200 יחידות של מונע ריבונוקלאז מתפרקות תחת חום בטמפרטורה של 70°C במשך 15 דקות והופכות לתוך התאמה עם 1µg של RNA במשך 4 שעות בטמפרטורה של 37°C.

לאחר התאמה, ה-RNA נראת כתה שלמה על גל אגארוז עם סימון ברומיד אתידיום כדי לוודא את חוסר הימצאותן של RNase נראות.

טוהר פיזי

הטוהר הוא ≥95% כפי שדינו על ידי גל פוליאקרילאמיד עם צביעה בקואמוסי כחול.

הערה לשימוש

מונע ריבונוקלאז פעיל הטווח pH הרחב (pH5.5-9). השימוש הסטנדרטי ב-RT ובתסיסה vitro משתמש במונע ריבונוקלאז בקונCENTRATION סופי של 1u/µl.