פולימראז DNA תק HotStar מוטנט רגיש לקור
- הקדמה
הקדמה
תיאור המוצר:
הפולימראז DNA HotStart שלנו רגיש לקור תא-ק דנה פולימראז הוא וריאנט ייחודי של הפולימראז Taq המסורתי, מהונדס עם מוטציה רגישת קור שמונעת פעילות בטמפרטורת החדר. העיצוב החדשני הזה מבטיח שהאנזים יישאר לא פעיל עד שלב ההכחדה הראשוני של PCR, מה שמפחית הגברה לא ספציפית והיווצרות דימרים של פריימר.
תכונות מפתח:
- מוטציה חסינה על קור להפעלה מוחלטת
- אין פעילות בטמפרטורת החדר, מה שמזער את ההעתקה הלא ספציפית
- הגדלת הספציפיות והייצור של DNA מטרה
- מתאימה עבור PCR ירידה ול-PCR גרדיאנט
- הופכת את הביצועים בדרכי PCR מרובות
- אידיאלית למערכות תפעול אוטומטיות עם מנהיג נוזלים
ת Pebahot:
- PCR ירידה ול-PCR גרדיאנט
- PCR מרובה להעתקה סימולטנית של מספר מטרות
- הרכבות PCR אוטומטיות באמצעות רובוטי תפעול נוזלים
- בדיקותתורי אבחנה המצריכים ספציפיות גבוהה
- יישומי מחקר המעורבים תבניות מורכבות או בשיעור נמוך
- בדיקות פשע וקליניות שבהן הספציפיות היא חשובה ביותר
פולימראז HotStart Taq DNA הרגיש לקור שלנו מציע יתרון משמעותי בהישגיו של PCR על ידי מסירת התחלה נקיה לתהליך ההגדלה. האקטיבציה המאולתרת שלו מבטיחה תוצאה מכוונה ויעילה יותר, מה שופך אותו לנכס ערך עבור מוסדות מחקר שמחפשים לשפר את תהליכי ה-PCR שלהם.
תֵאוּר
פולימראז CSM Taq (פולימראז Taq מוטנט רגיש לקור) הוא סוג של פולימראז HotStar. מקורו במוטנט E. coli. הפולימראז CSM Taq שונה מה-Pol יסוד חם תחילתי-Taq המבוסס על אנטיבד"מ חד-שכרי או Hot Start Taq כימי-משונן. Cold Taq הוא מוטנט רגיש לקור של Taq. הוא שומר על יכולת ההתחלה חמה בכל מחזורי ההגדלה.
פולימראז Taq מוטנטת רגישה לקור מעוצבת עבור PCR התחלה חמה, ולא בטמפרטורה נמוכה. היא מציעה ספציפיות יוצאת דופן ודיוק גבוה פי שניים מאשר Taq מסוג ברווז. היא מעוצבת עבור PCR עם תבניות קשות כמו שברים עשירי GC ומיקרוסטלייטים.
פולימראז Taq מוטנטת רגישה לקור מתאימה במיוחד להרחבה של ראשונים עבור סימני Single Nucleotide Polymorphism (SNP).
פולימראז Taq מוטנטת רגישה לקור שומרת על ספציפיות מעולה ורקע מינימלי אפילו בתנאים מיועדים ליield גבוה. למעשה, אפילו על תבניות גנומיות, האנזים יכול לשמש עם ריכוזים של MgCl2+ בגובה של עד 10 mM.
פולימראז Taq מוטנטת רגישה לקור מסוגלת להרחיב דרך אזורים קשים, למשל אזורים הכוללים חזרות תандמיות הפוכות ואלו עם כמות גבוהה של מבנה משני.
פולימראז Taq מוטנטת רגישה לטמפרטורה נמוכה עובדת בדרך ייחודית לחלוטין, הכוללת בחירה משופרת של נוקלאוטידים באתר הפעיל וקצב הרבה יותר נמוך של הרחבה של התאמה שגויה, מה שאומר שהרק פimers תואמים בצורה מושלמת יורחבו. כתוצאה מכך, האנזים יכול לתת ספציפיות גבוהה יותר מאשר טכניקות הot start (ידניות או אוטומטיות) ללא צורך בצעדי פרה-הכנה לא נעימים.
יישומים
- הגברת PCR עם הot start
- הגברת ספציפית של תבנית cDNA ו-DNA גנומי מורכבת, להגברת תבניות קשות, כמו שברים עשירי GC ומיקרוסטלייטים
- הרחבת primer לסימני SNP
- הגברת מטרות DNA גנומי עד 10 ק"ב עם אמינות, ספציפיות ורגישות גבוהות
- הגברת תבניות DNA עם מספר העתקות נמוך, PCR הot Start במסיביות גבוהה עם ספציפיות, חساسות ותוצר גבוה
- PCR דיאגנוסטית רגילה המצריכה תקיפה גבוהה של תוצאות זהות.
- PCR בזמן אמת
- PCR מרובה
- יצירת תוצרי PCR עבור כיווץ TA
בקרת איכות
- חוסר חוסר תפקודי של פעילות אנזימית של אנדונוקליאז דו-סיבי וחד-סיבי;
- נקיון >99% בדיקה על ידי גלクトפוזה SDS;
- כל חבילת CSM Taq DNA Polymerase נבדקת עבור אמפליפיקציה מפחות מ-10 נג"ג של DNA גנומי אנושי ;
- מוכיחה פעילות מלאה בטמפרטורת החדר במשך שבוע אחד;
- אין שאריות DNA של המארח.
הכנת תערובת תגובה
רכיב | כמות | עוצמה סופית |
תבנית | DNA <1 מיקרוגרם | כפי הצריכה |
פרימר קדימה (10 מיקרוM) | 2 μl | 0.4 μM |
פרימר אחורה (10 מיקרוM) | 5 מיקרוליטר | 1x |
2.5mM כל dNTPmix | 4 מיקרוליטר | 200μM כל |
CSM Taq DNA polymerase, 5U\/μl | 0.4 μl | 2 יחידות |
ddH 2O כדי נפח סופי | 50μl | לא רלוונטי |
ריכוז : 5 ו'/מיי
אחסון : שמור ב-20°C מינוס
אריזת : כמות גדולה
הזמנה
PC05 | csm Taq DNA Polymerase | תאוריון מוטנטי רגיש לקור, פולימראז DNA Taq, 5U/μl |