HiFi II M-MLV Reverse Transcriptase (RNase H-)

Descrizione del prodotto:

La nostra HiFi II m-mlv trascrittasi inversa (RNasi H-) è un enzima altamente efficiente progettato per applicazioni di trascrizione inversa che richiedono una minima degradazione dell'RNA. Questo enzima è una versione modificata del virus della leucemia murina di Moloney (M-MLV) trascrittasi inversa, priva di attività RNasi H, che previene la degradazione del modello di RNA durante la sintesi del cDNA.

Caratteristiche principali:

• Reverse transcriptasi M-MLV modificata senza attività RNase H
• Alta fedeltà ed efficienza nella sintesi di cDNA
• Adatta per la reverse transcription del mRNA a lunghezza piena
• Riduzione della degradazione dell'RNA per una migliore conservazione del template
• Compatibile con un'ampia gamma di condizioni di buffer per RT-PCR
• Ideale per la generazione di cDNA di alta qualità per applicazioni downstream

Applicazioni:

• Trascrizione inversa PCR (RT-PCR)
• Sintesi di biblioteche di cDNA per sequenziamento e clonazione
• analisi dell'espressione genica
• Rilevamento e quantificazione di virus RNA
• Amplificazione di trascritti RNA rari o a bassa concentrazione
• Impieghi didattici e di ricerca per studi su RNA

La nostra HiFi II M-MLV Reverse Transcriptase (RNase H-) è uno strumento essenziale per i ricercatori che conducono esperimenti di reverse transcription. La sua mancanza di attività RNase H garantisce che i template RNA rimangano intatti, portando a una sintesi di cDNA più precisa e attendibile.

Descrizione

La MMLV Reverse Transcriptase, codificata dal Moloney Murine Leukemia Virus (MMLV RT), è una RNA-dipendente DNA polymerasi che sintetizza la prima stranda di cDNA complementare da un modello di RNA singolo filo a cui è stato ibridizzato un primario. La MMLV RT estenderà anche i primer ibridati a DNA singolo filo. La sintesi della seconda stranda di cDNA può essere ottenuta da alcuni modelli di mRNA senza l'aggiunta di una DNA polymerasi. La differenza tra questa e la M-MLV RT generale è che la capacità di resistere al calore è migliorata. Può mantenere l'attività al 100% a 50°C e può conservare più dell'80% di attività anche a 55°C.

sorgente

ricombinazione di E. coli contenente il gene della trascrittasi inversa del virus della leucemia murina di Moloney da clone di murino di Moloney.

Applicazioni

Sintesi della prima stranda di cDNA; RT-PCR

Caratteristiche

• mancanza di attività rnase h: attività rnase h debole, elevato rendimento di CDNA, può ottenere più CDNA a lunghezza completa.
• termostabile: la temperatura di reazione ottimale è di 50°C, la più alta è di 60°C. può superare la struttura secondaria di RNA modello e terminare l'esperimento di trascrittasi inversa senza problemi.
• Ampia gamma di temperature: può invertire la trascrizione da 37-60°C, con oltre l'80% della massima attività a 42°C-55°C. Il cliente può scegliere liberamente la temperatura di reazione.
• Attività di amplificazione forte: la mutazione genica ha migliorato la capacità di legame dell'enzima con l'RNA. Ha aumentato la velocità di amplificazione, si può ottenere cDNA di qualità, adatto per la costruzione di una biblioteca di cDNA.

definizione di unità

una unità di mmlv rt catalizza l'incorporazione di 1 nmol di dttp in materiale insolubile in acido in 10 minuti a 37°c utilizzando come modello il poli (a) n oligo (dt) 12-18-primed.

Concentrazione : 200 u/μl

Imballaggio : sfusi

Componente : m-mlv (200 u/μl) 5x tampone (con dtt)

Conservazione : -20°c

ordine